Bài giảng Cập nhật những kĩ thuật mới trong chuyển gen động vật

Chia sẻ: Lavie Lavie | Ngày: | Loại File: PDF | Số trang:73

Thêm vào BST

Báo xấu

101
lượt xem 17
download

Download Vui lòng tải xuống để xem tài liệu đầy đủ

Bài giảng Cập nhật những kĩ thuật mới trong chuyển gen động vật bao gồm những nội dung về protein tái tổ hợp, liệu pháp gen, động vật chuyển gen, các thành phần chuyển gen, các phương pháp chuyển gen, chiến lược chuyển gen,... Mời các bạn tham khảo.

Chủ đề:

Bình luận(0) Đăng nhập để gửi bình luận!

Lưu

Nội dung Text: Bài giảng Cập nhật những kĩ thuật mới trong chuyển gen động vật

Cập nhật những kĩ thuật mới trong chuyển gen động vật Th.s Nguyễn Thái Quỳnh Anh Đại học Khoa Học Tư Nhiên Tp HCM nguyenthaiquynhanh@gmail.com
Protein tái tổ hợp Human growth hormone Human insulin Granulocyte colony-stimulating factor Follicle-stimulating hormone Factor VIII Insulin-like growth factor 1
Liệu pháp gen SCID (Severe Combined Immunodeficiency) (bubble boy disease) Suy giaûm mieãn dòch do thieáu Adenosine desaminase Taùch teá baøo T  nuoâi caáy in vitro  chuyeån gene laønh  tieâm caùc teá baøo naøy trôû laïi maùu cuûa beänh nhaân  heä mieãn dòch taêng cöôøng, nhöng khoâng hoaøn toaøn beàn vöõng  laëp laïi sau vaøi thaùng (1990)
Động vật chuyển gen Tạo ra động vật với đặc điểm di truyền mong muốn: - Sản phẩm từ động vật - Tạo ra các động vật kháng bệnh ( kháng thể, vaccine) - “Bioreactor” sản xuất sinh dược phẩm - Mô hình động vật bệnh lý
Tái thiết lập chương trình Induced pluripotent stem cells (iPS cells hoặc iPSCs) Tế bào gốc vạn năng được tạo ra từ tế bào trưởng thành
CAÙC THAØNH PHAÀN CHUYỂN GENE VAÄT LIEÄU DI TRUYEÀN PHÖÔNG PHAÙP CHIEÁN LÖÔÏC CAÀN CHUYEÅN CHUYEÅN GENE CHUYEÅN GENE… 1. Gene söûa chöõa hay 1. Vector virus Hai nhoùm chíeán löôïc thay theá chính : 2. Vector khoâng phaûi 2. Gene gaây cheát laø virus - Ex vivo  in vivo 3. Antisense nucleic 3. Phöông phaùp vaät - In vivo acid lyù : vi tieâm, suùng baén gene Teá baøo nhaän gene Vaät lieäu di truyeàn caàn chuyeån: teá baøo chöa chuyeån goàm : bieät hoùa nhö doøng teá Gene caàn chuyeån + baøo taïo maùu, nguyeân Promoter maïnh + baøo sôïi, nguyeân baøo Gene choïn loïc cô,.. Lieân keát vôùi plasmid hay vector laø virus
TẠO DÒNG PHÂN TỬ Figure 9.2
Các phương pháp chuyển gen Hệ thống chuyển gen không sử dụng virus Phương pháp hóa chất Phương pháp vật lí Phương pháp vi tiêm Hệ thống chuyển gen sử dụng virus Adenovirus Lentivirus Retroviris
HEÄ THOÁNG CHUYEÅN KHOÂNG DUØNG VIRUS  Ñoùng goùi beân ngoaøi  Nhaäp baøo  Thoaùt khoûi endosome  Ñi vaøo nhaân  Bieåu hieän
LIPOPLEX Lipoplex laø caùc tuùi nhoû hình thaønh töø 1 lôùp maøng ñôn lipid tích ñieän döông, ñöôøng kính 50-200 nm. Troän caùc liposome naøy vôùi dung dòch DNA  phöùc hôïp tích ñieän döông bao laáy DNA  phöùc hôïp keát hôïp vôùi beà maët teá baøo tích ñieän aâm vaø ñöôïc ñöa vaøo trong Öu ñieåm : - Tính beàn - Khaû naêng gaén DNA, RNA traàn raát cao, haàu nhö khoâng coù giôùi haïn kích thöôùc ñoaïn gene caàn chuyeån - Coù theå xaâm nhieãm moïi loaïi teá baøo - Khoâng coù tính khaùng nguyeân & caùc hoaït tính sinh hoïc khoâng mong muoán Nhöôïc ñieåm : Khoâng coù tính ñaëc hieäu teá baøo
POLYPLEX Polyplex laø 1 phöùc hôïp phaân töû hai chöùc naêng duøng ñeå gaén DNA & chuyeån DNA vaøo teá baøo ñích thoâng qua söï gaén leân thuï theå & söï nhaäp baøo. Moät phaàn cuûa phöùc hôïp laø 1 nhoùm gaén DNA (nhö polylysine tích ñieän döông), phaàn kia laø 1 ligand cuûa 1 thuï theå ñaëc hieäu naèm treân teá baøo ñích Öu ñieåm : khaéc phuïc nhöôïc ñieåm cuûa lipoplex vaø caùc vector virus
Calcium Phosphate DEAE -Dextran Liposome
Điện biến nạp
Vi Tiêm Vi tiêm với DNA ngoại lai Tế bào chất Pipette giữ Nhân
Súng bắn gen
CHIEÁN LÖÔÏC CHUNG ÑEÅ TAÏO VECTOR VIRUS TRONG LIEÄU PHAÙP GENE
VECTOR RETROVIRUS Öu ñieåm : (1) Hieäu quaû xaâm nhieãm teá baøo cao (2) Vector khoâng hoaøn chænh  khoâng coù khaû naêng laây lan (3) Gaén xen ñöôïc vaøo boä gene  bieåu hieän beàn vöõng Nhöôïc ñieåm : (1) Ñoaïn gene < 7.5 kb (2) Chæ xaâm nhieãm teá baøo ñang phaân chia (3) Gaén cheøn vaøo boä gene  coù khaû naêng gaây ung thö (4) Khaû naêng taùi saép xeáp lôùn Vector ñaàu tieân ñöôïc söû duïng cho lieäu phaùp gene sau khi ñaõ ñöôïc bieán ñoåi ñeå trôû thaønh khoâng hoaøn chænh vaø ñeå coù theå xaâm nhieãm nhieàu loaïi teá baøo. Nguoàn goác laø MMLV (Moloney Murine Leukemia Virus) Boä gene chöùa 3 gene gag-pol-env. Ba gene naøy seõ bò loaïi boû vaø thay theá baèng gene caàn chuyeån