TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC<br />
<br />
ðIỀU TRỊ RỐI LOẠN BỀ MẶT NHÃN CẦU NẶNG HAI MẮT<br />
BẰNG GHÉP TẤM BIỂU MÔ NIÊM MẠC MIỆNG NUÔI CẤY<br />
Nguyễn Thị Thu Thủy1, Nguyễn Thị Bình2, Hoàng Thị Minh Châu1<br />
1<br />
<br />
Bệnh viện Mắt Trung ương, 2Trường ðại học Y Hà Nội<br />
<br />
Rối loạn nặng b ề mặt nhãn cầu 2 mắt do suy giảm toàn bộ tế b ào gốc vùng rìa là một thách thức trong<br />
nhãn khoa do ñiều trị và tiên lượng còn rất khó khăn. Sử dụng tấm biểu mô niêm mạc miệng nuôi cấy thay<br />
thế biểu mô giác mạc là giải pháp mới ñã áp dụng thành công trên thế giới, ñem lại nhiều hứa hẹn trong ñiều<br />
trị b ệnh lý này. Nghiên cứu nhằm ñánh giá kết quả ghép tấm biểu mô niêm mạc miệng nuôi cấy trên thỏ<br />
thực nghiệm và ứng dụng ñiều trị cho một số b ệnh nhân có rối loạn nặng b ề mặt nhãn cầu 2 mắt. Trên thực<br />
nghiệm, nuôi cấy và ghép tự thân thành công tấm b iểu mô niêm mạc miệng cho 15 thỏ, 14 thỏ kết quả tốt, 1<br />
thỏ kết quả khá. Trên lâm sàng, nuôi cấy và ghép tự thân cho 20 ca rối loạn bề mặt nhãn cầu 2 mắt, trong<br />
ñó 3 ca phẫu thuật 2 lần, có 14 ca thành công, 2 ca tấm b iểu mô b ị tiêu hủy do tổn thương ngấm sâu vào nội<br />
nhãn, 4 ca tân mạch xâm lấn tới trung tâm giác mạc. Ghép tấm b iểu mô niêm mạc miệng nuôi cấy là<br />
phương pháp an toàn, hiệu quả trong kiến tạo b ề mặt nhãn cầu.<br />
Từ khóa: Bề mặt nhãn cầu, tấm biểu mô niêm mạc miệng nuôi cấy<br />
<br />
I. ðẶT VẤN ðỀ<br />
Bề mặt nhãn cầu ñóng vai trò quan trọng<br />
trong việc bảo vệ nhãn cầu, duy trì sự trong<br />
suốt của giác mạc, ñảm bảo chức năng thị<br />
giác. Bề mặt nhãn cầu ñược ổn ñịnh nhờ sự<br />
toàn vẹn của các yếu tố cấu thành bao gồm<br />
biểu mô kết mạc, giác mạc, biểu mô vùng rìa<br />
và phim nước mắt.<br />
Trong các rối loạn bề mặt nhãn cầu sau<br />
viêm nhiễm giác mạc k éo dài, bỏng, pemphigoid, hội chứng Stevens – Johnson, … t ổn<br />
thương xảy ra do suy giảm trầm trọng tế bào<br />
gốc vùng rìa của biểu mô giác mạc. Biểu hiện<br />
của các rối loạn này là sự xâm lấn của biểu<br />
mô kết mạc, tổ chức xơ và tân mạch vào giác<br />
mạc làm giảm thị lực có thể dẫn tới mù lòa [1;<br />
2]. Rối loạn bề mặt nhãn cầu nặng khi có suy<br />
giảm toàn bộ 360° tế bào gốc vùng rìa giác<br />
<br />
mạc cho tới nay vẫn là thách thức ñối với các<br />
nhà nhãn khoa do ñiều trị và tiên lượng còn<br />
khó khăn.<br />
Với những bệnh nhân rối loạn bề mặt nhãn<br />
cầu ở một mắt, phẫu thuật ghép tế bào gốc tự<br />
thân từ vùng rìa của mắt lành là phương pháp<br />
ñiều t rị tối ưu ñã ñược áp dụng t hành công<br />
trên thế giới, ở Việt Nam ñã có những kết quả<br />
bước ñầu khả quan. Các bệnh nhân có rối<br />
loạn nặng xảy ra ở cả 2 mắt không áp dụng<br />
ñược phương pháp này do không còn tế bào<br />
gốc tự thân, ñể ñiều trị có thể tiến hành ghép<br />
tế bào gốc dị thân song phải phối hợp các<br />
thuốc ức chế miễn dịch toàn thân kéo dài ñể<br />
chống thải ghép, dẫn tới nguy cơ cao cho tổn<br />
hại chức năng gan, thận, nguy cơ nhiễm trùng<br />
toàn thân, tại chỗ. Với sự phát triển mạnh mẽ<br />
của công nghệ nuôi cấy tế bào, các nhà khoa<br />
học trên t hế giới ñã sử dụng biểu mô niêm<br />
<br />
ðịa chỉ liên hệ: Nguyễn Thị Thu Thủy – khoa Kết giác<br />
mạc, bệnh viện Mắt Trung ương, 85 Bà Triệu, Hà Nội.<br />
Email: thuyoph@gmail.com<br />
Ngày nhận: 03/12/2014<br />
Ngày ñược chấp thuận: 18/5/2015<br />
<br />
64<br />
<br />
mạc miệng nuôi cấy làm nguồn cung cấp tế<br />
bào biểu mô tự thân ñể thay thế cho biểu mô<br />
giác mạc trong việc kiến tạo bề mặt nhãn cầu<br />
[3 - 7].<br />
TCNCYH 93 (1) - 2015<br />
<br />
TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC<br />
Từ kinh nghiệm lâm sàng trong ñiều trị các<br />
<br />
miệng theo quy trình của Lab nuôi cấy mô –<br />
<br />
bệnh lý bề mặt nhãn cầu và nhữ ng thành tựu<br />
<br />
Bộ môn Mô phôi, Trườ ng ðại học Y Hà Nội.<br />
<br />
bước ñầu của công nghệ nuôi cấy tế bào của<br />
<br />
Sau 2 tuần nuôi cấy thu ñược 2 tấm biểu mô<br />
<br />
Bộ môn Mô - Phôi trường ðại học Y Hà Nội,<br />
<br />
niêm mạc miệng , 1 tấm dùng ñể ñịnh danh, 1<br />
<br />
chúng tôi ñã phối hợ p nghiên cứu ghép tấm<br />
biểu mô niêm mạc miệng nuôi cấy nhằm mục<br />
<br />
tấm ghép tự thân cho thỏ.<br />
Quy trình phẫu t huật: mở kết mạc rìa 360º,<br />
<br />
tiêu: ðánh giá kết quả ghép tấm biểu mô niêm<br />
<br />
phẫu tíc h xơ dưới kết mạc. Gọt bỏ tổ chức<br />
<br />
mạc miệng nuôi cấy trên thỏ thực nghiệm và<br />
<br />
màng xơ mạc h trên giác mạc và vùng rìa. Trải<br />
<br />
ứng dụng ñiều trị cho một số bệnh nhân có rối<br />
<br />
tấm biểu mô nuôi cấy trên bề mặt nhãn cầu.<br />
<br />
loạn nặng bề mặt nhãn cầu 2 mắt.<br />
<br />
Khâu c ố ñịnh bằng chỉ 10/0 mũi rời quanh rìa.<br />
<br />
II. ðỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP<br />
1. ðối tượng<br />
- 15 thỏ thực nghiệm khỏe mạnh chủng<br />
Orytolagus Cuniculus, trọng lượng 2 ± 0,2 kg<br />
ñược nuôi cùng ñiều kiện phòng thí nghiệm.<br />
- 12 bệnh nhân rối loạn bề mặt nhãn cầu<br />
nặng 2 mắt ñược ñiều trị tại khoa Kết giác<br />
mạc – Bệnh viện Mắt Trung ương từ 01/2009<br />
ñến 05/2013.<br />
Tiêu chu(n l+a ch-n b/nh nhân: các<br />
<br />
tấm biểu mô.<br />
ðánh giá sau mổ toàn trạng của thỏ, tình<br />
trạng mắt thỏ ở các thời ñiểm sau ghép 7<br />
ngày, 15 ngày, 30 ngày, 60 ngày, 180 ngày,<br />
dựa trên tiêu chí ñộ trong và áp của tấm biểu<br />
mô, sự toàn vẹn của bề mặt nhãn cầu và tân<br />
mạch giác mạc.<br />
Tiến hành giết thỏ theo từng lô ở từng thời<br />
ñiểm theo dõi ñể kiểm tra cấu trúc vi thể và<br />
siêu vi của giác mạc thỏ sau khi ghép.<br />
<br />
bệnh nhân rối loạn nặng bề mặt nhãn cầu,<br />
<br />
Trên b/nh nhân<br />
<br />
không nhiễm trùng, ñã ñiều trị qua giai ñoạn<br />
<br />
Sinh thiết niêm mạc miệng: gây tê tại chỗ<br />
<br />
viêm cấp, xơ mạch xâm lấn toàn bộ giác mạc<br />
<br />
dưới niêm mạc, sinh thiết 1 mảnh niêm mạc<br />
<br />
hoặc tổn thương biểu mô khó hàn gắn, bệnh<br />
<br />
mặt trong vùng giữa má ñường kính 3 mm.<br />
<br />
nhân ñồng ý tham gia nghiên cứu.<br />
<br />
Nuôi cấy tạo tấm biểu mô t heo quy trình c ủa<br />
<br />
Tiêu chu(n lo3i tr6: bất thường mi mắt<br />
<br />
bộ môn Mô phôi – Trường ðại học Y Hà Nội.<br />
<br />
như quặm, biến dạng hay hở mi, có hiện<br />
<br />
Sau 2 tuần nuôi cấy thu ñược 2 tấm biểu mô<br />
<br />
tượng sừng hóa bề mặt nhãn cầu.<br />
<br />
niêm mạc miệng, 1 tấm dùng ñể ñịnh danh, 1<br />
<br />
2. Phương pháp<br />
Thi7t k7: nghiên cứu thực nghiệm và lâm<br />
sàng, tiến cứu<br />
<br />
2015<br />
<br />
Nhuộm Fluorescein kiểm tra ñộ toàn vẹn c ủa<br />
<br />
tấm ghép tự thân cho bệnh nhân.<br />
Quy trình phẫu t huật: mở kết mạc rìa 360º,<br />
phẫu tíc h xơ dưới kết mạc. Gọt bỏ tổ chức<br />
màng xơ mạc h trên giác mạc và vùng rìa. Trải<br />
<br />
Các b;