NGHIÊN CỨU SỰ TÁI SINH IN VITRO MỘT SỐ GIỐNG KHOAI LANG VIỆT NAM

Chia sẻ: Sunshine_3 Sunshine_3 | Ngày: | Loại File: PDF | Số trang:0

Thêm vào BST

Báo xấu

74
lượt xem 11
download

Download Vui lòng tải xuống để xem tài liệu đầy đủ

Khoai lang là một torng những cây lượng thực quan trọng và được trồng tại hơn 100 nước trên thế giới. Ở nước ta khoia lang được trồng phổ biến ở khắp các vùng vì không đòi hỏi thăm canh cao mà vẫn có thể cung cấp lượng lớn sinh khối làm lương thực, thực phẩm cho con người và thức ăn cho chăn nuôi. Tuy nhiên các giống đang trồng chủ yếu là giống địa phương năng suất và phẩm chất không cao, năng suất trung bình của cả nước chỉ đạt 6,5-7,0 tấn/ha. Do đó việc nghiên cứu...

Chủ đề:

Bình luận(0) Đăng nhập để gửi bình luận!

Lưu

Nội dung Text: NGHIÊN CỨU SỰ TÁI SINH IN VITRO MỘT SỐ GIỐNG KHOAI LANG VIỆT NAM

Nghiªn cøu sù t¸i sinh in vitro mét sè gièng khoai lang ViÖt nam Study on in vitro regeneration of some Vietnam sweetpotato varieties NguyÔn ThÞ Lý Anh, NguyÔn ThÞ Hång Nhung, NguyÔn Quang Th¹ch Summary A in vitro regeneration of sweetpotato for gene transfering was studed. The experiments were carried out on some sweet potato varieties: Chiem dau (CD), Nong nghiep 31 (NN31) and Lim. Research results show that: + The stem internodes were effective explants for shoot formation + Culture mediums for shoot induction from stem internodes were: MS+1,2ppmkietin+0,5ppmIAA ( for CD variety), MS+2,0ppmkietin+0,1ppmIAA ( for NN31 variety) and MS+1,0ppmkietin+0,5ppmIAA ( for Lim variety) + There is no morphologically variation between the regenerated plants and the normal plants. Key words: sweet potato, in vitro regeneration, stem internode, explant. 1. §Æt vÊn ®Ò Khoai lang (Ipomoea batatas L.) lµ mét trong nh÷ng c©y l−¬ng thùc quan träng vµ ®−îc trång t¹i h¬n 100 n−íc trªn thÕ giíi (Faostat- FAO, 1999). ë n−íc ta, khoai lang ®−îc trång phæ biÕn ë kh¾p c¸c vïng v× kh«ng ®ßi hái th©m canh cao mµ vÉn cã thÓ cung cÊp l−îng lín sinh khèi lµm l−¬ng thùc, thùc phÈm cho con ng−êi vµ thøc ¨n ch¨n nu«i. Tuy nhiªn, c¸c gièng ®ang trång chñ yÕu lµ gièng ®Þa ph−¬ng n¨ng suÊt vµ phÈm chÊt kh«ng cao, n¨ng suÊt trung b×nh cña c¶ n−íc chØ ®¹t 6,5-7,0 tÊn/ha (Niªn gi¸m thèng kª, 2003). Do ®ã, viÖc nghiªn cøu c¶i tiÕn hay bæ sung thªm mét sè ®Æc tÝnh n«ng sinh häc cÇn thiÕt cho c¸c gièng khoai lang ViÖt Nam lµ yªu cÇu cña thùc tiÔn s¶n xuÊt. Tuy nhiªn, ®Ó cã ®−îc nh÷ng gièng khoai lang míi víi c¸c tÝnh tr¹ng mong muèn th× ph−¬ng ph¸p t¹o gièng truyÒn thèng ph¶i mÊt nhiÒu thêi gian, c«ng søc. Trong khi ®ã, kü thuËt chuyÓn gen cã thÓ kh¾c phôc nh÷ng h¹n chÕ nµy. §Æc biÖt, viÖc chuyÓn gen cho phÐp bæ sung nh÷ng tÝnh tr¹ng cÇn thiÕt mµ vÉn gi÷ ®−îc ®Æc tÝnh cña gièng (C. James, 2003). Nh−ng ®Ó t¹o ®−îc c©y chuyÓn gen th× quy tr×nh t¸i sinh in vitro lµ yªu cÇu ®Çu tiªn vµ cã ý nghÜa quyÕt ®Þnh ®Õn sù thµnh c«ng cña ph−¬ng ph¸p v× th−êng chØ cã thÓ chuyÓn gen vµo c¸c tÕ bµo, m« (l¸, th©n, callus), ph«i… sau ®ã nu«i cÊy chóng ®Ó t¸i sinh thµnh c©y hoµn chØnh cã mang c¸c ®Æc tÝnh ®· ®−îc chuyÓn n¹p. ë n−íc ta, sù t¸i sinh in vitro cña mét sè gièng khoai lang ®· ®−îc c«ng bè (Ph¹m BÝch Ngäc vµ CS, 2002), nh−ng còng cßn nh÷ng h¹n chÕ nh−: hÖ thèng t¸i sinh phøc t¹p, thêi gian nu«i cÊy dµi ... nªn c¸c vÊn ®Ò nµy rÊt cÇn ®−îc tiÕp tôc nghiªn cøu c¶i tiÕn. 2. VËt liÖu vµ ph−¬ng ph¸p nghiªn cøu 2.1. VËt liÖu nghiªn cøu VËt liÖu dïng trong c¸c thÝ nghiÖm lµ c©y in vitro s¹ch virus cña c¸c gièng khoai lang Chiªm d©u (CD), N«ng nghiÖp 31 (NN31) vµ Lim ®· ®−îc t¹o ra trong c¸c nghiªn cøu tr−íc ®©y (NguyÔn ThÞ Lý Anh, NguyÔn Quang Th¹ch, 2003). 2.2. Ph−¬ng ph¸p nghiªn cøu Tiªu chuÈn c©y khoai lang ®Ó t¸ch mÉu cÊy: c©y nu«i cÊy m« cã 8 l¸, cao 7cm. MÉu cÊy lµ ®o¹n th©n kh«ng cã chåi n¸ch dµi 0,5 - 0,7cm vµ m« l¸ kÝch th−íc 0,5 x 1cm. C¸c mÉu cÊy nµy ®−îc nu«i cÊy trªn m«i tr−êng MS (Murashige - Skoog, 1962) cã bæ sung c¸c chÊt ®iÒu tiÕt sinh tr−ëng thùc vËt tuú thuéc tõng thÝ nghiÖm. C¸c thÝ nghiÖm in vitro ®−îc tiÕn hµnh trong ®iÒu kiÖn: nhiÖt ®é: 27±2oC, c−êng ®é chiÕu s¸ng: 3000 lux, quang chu kú: 16 giê chiÕu s¸ng/ 8 giê tèi. 1
Tiªu chuÈn c©y khoai lang cÊy m« khi ®−a ra v−ên −¬m: c©y cã 5 l¸, cao 4cm, cã 3-4 rÔ. C©y con ®−îc trång trong ®iÒu kiÖn tù nhiªn ë nhµ l−íi c¸ch ly, t−íi Èm th−êng xuyªn, cung cÊp dinh d−ìng Growmore (20:20:20) 1 lÇn/ tuÇn. ThÝ nghiÖm ®−îc bè trÝ ngÉu nhiªn hoµn toµn, mçi c«ng thøc ®−îc bè trÝ 3 lÇn nh¾c l¹i, mçi lÇn nh¾c l¹i cã 50 mÉu. C¸c chØ tiªu thÝ nghiÖm ®−îc quan s¸t vµ ®o ®Õm ®Þnh kú, 5 –15 ngµy 1 lÇn (tuú theo yªu cÇu cña thÝ nghiÖm). 3. KÕt qu¶ nghiªn cøu 3.1. Kh¶ n¨ng t¸i sinh cña m« th©n c©y khoai lang ¶nh h−ëng cña Benzyladenin (BA) vµ c¸c hîp chÊt auxin ®Õn sù t¸i sinh cña m« th©n Trong thÝ nghiÖm nµy, m« th©n khoai lang chØ t¸i sinh (t¹o rÔ, t¹o callus vµ t¹o chåi) khi ®−îc nu«i cÊy trªn m«i tr−êng cã bæ sung chÊt ®iÒu khiÓn sinh tr−ëng (b¶ng 1). H×nh thøc t¸i sinh callus lµ phæ biÕn nhÊt vµ ®Òu cho tû lÖ t¸i sinh ®¹t 100% trªn tÊt c¶ c¸c c«ng thøc, tiÕp ®Õn lµ h×nh thøc t¸i sinh rÔ (c«ng thøc tèt nhÊt ®¹t 100%) vµ thÊp nhÊt lµ t¸i sinh chåi (c«ng thøc tèt nhÊt ®¹t 43,3%). Trong c¸c c«ng thøc thÝ nghiÖm trªn, m«i tr−êng cho tØ lÖ t¸i sinh chåi ®¹t cao nhÊt ë gièng Chiªm d©u lµ m«i tr−êng MS cã bæ sung 1ppmBA + 0,5ppmIAA/lÝt (®¹t 43,3%) vµ gièng NN31 lµ m«i tr−êng MS cã bæ sung 1ppmBA + 0,1ppm IAA/lÝt (®¹t 16,6%). Chåi ®−îc h×nh thµnh lµ chåi ®¬n vµ t¸i sinh tõ m« sÑo. §−êng h−íng t¸i sinh nµy kh«ng th«ng qua qu¸ tr×nh t¹o ph«i soma nh− mét sè c«ng bè tr−íc ®©y (Liu Q. C., et al., 1998, Lucckmini K. W. et al., 1994). B¶ng 1. ¶nh h−ëng cña BA vµ c¸c hîp chÊt auxin ®Õn sù t¸i sinh m« th©n c©y khoai lang gièng CD vµ NN31 (sau 8 tuÇn) C¸c ®−êng h−íng t¸i sinh C«ng thøc thÝ nghiÖm(ppm) TØ lÖ t¹o cal (%) TØ lÖ t¹o rÔ (%) TØ lÖ t¹o chåi (%) Sèchåi/mÉu cÊy Gièng Chiªm d©u MS (§C) 0 0 0 0 MS+1ppmBA+0,1ppmIAA 100 23,3 11,1 1 MS+1ppmBA + 0,5ppmIAA 100 46,6 43,3 1 MS+1ppmBA+0,1ppm αNAA 100 0 3,3 1 MS+1ppmBA+0,5ppm αNAA 100 100 16,6 1 MS+1ppmBA+0,1ppm 2,4D 100 0 0 0 MS+1ppmBA+0,5ppm 2,4D 100 0 0 0 Gièng NN31 MS (§C) 0 0 0 0 MS+1ppmBA+0,1ppmIAA 100 50 16,6 1 MS+1ppmBA + 0,5ppmIAA 100 50 3,3 1 MS+1ppmBA+0,1ppm αNAA 100 43,3 3,3 1 MS+1ppmBA+0,5ppm αNAA 100 100 0 0 MS+1ppmBA+0,1ppm 2,4D 100 0 0 0 MS+1ppmBA+0,5ppm 2,4D 100 0 0 0 ¶nh h−ëng cña kinetin vµ c¸c hîp chÊt thuéc nhãm auxin ®Õn sù t¸i sinh cña m« th©n KÕt qu¶ nghiªn cøu ®−îc tr×nh bµy ë b¶ng 2 chøng tá t¸c ®éng cña tæ hîp kinetin vµ c¸c hîp chÊt auxin ®Õn kh¶ n¨ng t¸i sinh cña m« th©n còng theo quy luËt t−¬ng tù nh− t¸c ®éng cña tæ hîp BA vµ c¸c auxin. Nh−ng trong thÝ nghiÖm nµy tû lÖ mÉu t¸i sinh chåi ®· ®−îc c¶i thiÖn h¬n. M«i tr−êng MS + 1ppm kinetin + 0,5 ppm IAA lµ m«i tr−êng cho tû lÖ mÉu t¸i sinh chåi cao nhÊt ®èi víi c¶ gièng CD (53,3%) vµ NN31 (20,0%). Nh− vËy, so víi BA, kinetin tá ra cã hiÖu qu¶ h¬n trong kÝch thÝch sù t¸i sinh chåi tõ m« th©n vµ trong sù tæ hîp víi c¸c auxin th× tæ hîp gi÷a kinetin vµ IAA cho tû lÖ mÉu t¸i sinh chåi cao nhÊt.Tõ nhËn ®Þnh nµy, thÝ nghiÖm ®· ®−îc më réng víi nh÷ng tæ hîp cã nång ®é cao cña kinetin ®Ó n©ng cao h¬n n÷a sù t¸i sinh chåi cña mÉu cÊy v× ®©y lµ ®−êng h−íng t¸i sinh quan träng nhÊt. 2
B¶ng 2. ¶nh h−ëng cña kinetin vµ c¸c hîp chÊt auxin ®Õn sù t¹o chåi cña m« th©n c©y khoai lang gièng CD vµ NN31 (sau 8 tuÇn) C«ng thøc thÝ nghiÖm §−êng h−íng t¸i sinh TØ lÖ t¹o cal (%) TØ lÖ t¹o rÔ (%) TØ lÖ t¹o chåi (%) Sèchåi/ mÉu cÊy Gièng Chiªm d©u MS(§C) 0 0 0 0 MS+1ppmKi+0,1ppmIAA 100 100 36,6 1 MS+1ppmKi + 0,5ppmIAA 100 100 53,3 1 MS+1ppmKi+0,1ppm αNAA 100 100 23,3 1 MS+1ppmKi+0,5ppm αNAA 100 100 0 0 MS+1ppmKi+0,1ppm 2,4D 100 0 0 0 MS+1ppmKI+0,5ppm 2,4D 100 0 0 0 Gièng NN31 MS(§C) 0 0 0 0 MS+1ppmKi+0,1ppmIAA 100 100 6,6 1 MS+1ppmKi + 0,5ppmIAA 100 100 20,0 1 MS+1ppmKi+0,1ppm αNAA 100 100 13,3 1 MS+1ppmKi+0,5ppm αNAA 100 100 6,6 1 MS+1ppmKi+0,1ppm 2,4D 100 0 0 0 MS+1ppmKI+0,5ppm 2,4D 100 0 0 0 KÕt qu¶ thùc nghiÖm ë b¶ng 3 chØ râ: m« th©n c©y khoai lang cã kh¶ n¨ng t¸i sinh callus vµ rÔ khi ®−îc nu«i cÊy trªn m«i tr−êng cã bæ sung kinetin (tõ 1- 2 ppm) kÕt hîp víi IAA (nång ®é 0,1ppm vµ 0,5 ppm) víi tû lÖ 100%. Nh−ng nång ®é cao cña kinetin ®· lµm gi¶m tû lÖ t¸i sinh chåi cña m« th©n gièng CD. C«ng thøc CT3 (1,2ppm kinetin phèi hîp víi 0,5 ppm IAA) cho tØ lÖ t¸i sinh chåi cao nhÊt, ®¹t 73,3%. §èi víi gièng NN31 quy luËt t¸i sinh chåi cã sù kh¸c biÖt so víi gièng CD, c«ng thøc CT7 (cã 2 ppm kinetin vµ 0,1IAA) lµ c«ng thøc cho tØ lÖ t¸i sinh chåi cao nhÊt, ®¹t 33,3%. §èi víi c¶ 2 gièng, ®· cã mét tû lÖ nhá mÉu cÊy t¸i sinh theo h−íng h×nh thµnh côm chåi. Tuy nhiªn, sè l−îng chåi/côm chåi cßn Ýt (th«ng th−êng lµ 2 chåi). B¶ng 3. ¶nh h−ëng cña kinetin vµ IAA ®Õn sù t¸i sinh cña m« th©n c©y khoai lang gièng CD vµ NN31 (sau 8 tuÇn) C«ng thøc thÝ nghiÖm §−êng h−íng t¸i sinh TØ lÖ t¹o callus (%) TØ lÖ t¹o rÔ (%) TØ lÖ t¹o chåi (%) Sèchåi/ mÉu cÊy Gièng Chiªm d©u MS(§C) 0 0 0 0 MS+1ppmKi+0,1ppmIAA 100 100 36,6 1,0 MS+1ppmKi+0,5ppmIAA 100 100 53,3 1,2 MS+1,2ppmKi+0,1ppmIAA 100 100 36,6 1,4 MS+1,2ppmKi+0,5ppm IAA 100 100 73,3 1,3 MS+1,5ppmKi+0,1ppmIAA 100 100 40,0 1,4 MS+1,5ppmKi+0,5ppm IAA 100 100 33,3 1,0 MS+2,0ppmKi+0,1ppm IAA 100 100 26,6 1,0 MS+2,0ppmKi+0,5ppm IAA 100 100 36,6 1,00 Gièng NN31 MS(§C) 0 0 0 0 MS+1ppmKi+0,1ppmIAA 100 100 6,6 1,0 MS+1ppmKi+0,5ppmIAA 100 100 26,6 1,1 MS+1,2ppmKi+0,1ppmIAA 100 100 0 0 MS+1,2ppmKi+0,5ppm IAA 100 100 13,3 1,3 MS+1,5ppmKi+0,1ppmIAA 100 100 13,3 1,0 MS+1,5ppmKi+0,5ppm IAA 100 100 16,6 1,2 MS+2,0ppmKi+0,1ppm IAA 100 100 33,3 1,0 MS+2,0ppmKi+0,5ppm IAA 100 100 23,3 1,0 3
§Ó x¸c ®Þnh kh¶ n¨ng t¸i sinh cña gièng khoai lang Lim, m« th©n cña gièng nµy ®· ®−îc nu«i cÊy trªn mét sè m«i tr−êng t¸i sinh chåi cã hiÖu qu¶ cña gièng CD vµ NN31. KÕt qu¶ nghiªn cøu ®−îc thÓ hiÖn trªn b¶ng 4. B¶ng 4. ¶nh h−ëng cña kinetin vµ IAA ®Õn sù t¸i sinh cña m« th©n c©y khoai lang Lim (sau 8 tuÇn) TØ lÖ t¹o cal TØ lÖ t¹o rÔ TØ lÖ t¹o Sè chåi/ mÉu C«ng thøc thÝ nghiÖm (%) (%) chåi (%) cÊy §C: MS 0 0 0 0 CT1:1,0ppm Ki + 0,5ppm IAA 100 100 40,0 1 CT2:1,2ppm Ki + 0,5 ppm IAA 100 100 56,6 1 T−¬ng tù nh− gièng CD vµ NN31, m« th©n cña gièng khoai lang Lim chØ t¸i sinh (t¹o callus, t¹o rÔ, t¹o chåi) trªn m«i tr−êng cã bæ sung chÊt ®iÒu tiÕt sinh tr−ëng (kinetin vµ IAA). ë c¶ c«ng thøc CT1 vµ CT2 mÉu cÊy cã kh¶ n¨ng t¸i sinh cao, tØ lÖ t¹o chåi lµ 40% vµ 56,6%. Ph−¬ng thøc h×nh thµnh chåi cña gièng Lim còng lµ chåi t¸i sinh tõ callus vµ ë d¹ng chåi ®¬n. 3.2. Kh¶ n¨ng t¸i sinh cña m« l¸ c©y khoai lang B¶ng 5. ¶nh h−ëng cña kinetin vµ IAA ®Õn sù t¸i sinh chåi cña m« l¸ c©y khoai lang (sau 8 tuÇn) Gièng NN31 Gièng Chiªm d©u Gièng Lim TØ lÖ TØ lÖ TØ lÖ TØ lÖ TØ lÖ TØ lÖ TØ lÖ TØ lÖ TØ lÖ C«ng thøc thÝ nghiÖm t¹o t¹o t¹o t¹o t¹o t¹o t¹o t¹o t¹o cal rÔ chåi cal rÔ chåi cal rÔ chåi (%) (%) (%) (%) (%) (%) (%) (%) (%) §C: MS 0 0 0 0 0 0 0 0 0 MS+1,0ppmKi+0,5ppmIAA 100 3,3 0 100 6,6 0 100 10 3,3 MS+1,2ppmKi+0,5ppmIAA 100 3,3 3,3 100 6,6 0 100 10 3,3 M« l¸ cña c¸c gièng khoai lang nghiªn cøu ®· ®−îc nu«i cÊy trªn mét sè c«ng thøc thÝ nghiÖm ®· cho tû lÖ t¸i sinh chåi cao khi nu«i cÊy m« th©n. KÕt qju¶ nghiªn cøu (b¶ng 5) cho thÊy m« l¸ cña c¸c gièng khoai lang cã kh¶ n¨ng t¸i sinh callus rÊt m¹nh (100% trªn hai c«ng thøc CT1 vµ CT2). Nh−ng kh¸c víi m« th©n, tû lÖ m« l¸ t¹o rÔ chØ ®¹t 3,3 - 10,0 %. §Æc biÖt, kh¶ n¨ng t¸i sinh chåi tõ m« l¸ ë c¸c gièng rÊt thÊp: gièng CD kh«ng cã c¶m øng t¹o chåi ë c¶ hai c«ng thøc CT1 vµ CT2, gièng NN31 cã sù h×nh thµnh chåi ë c«ng thøc CT2, riªng gièng Lim cã sù t¹o chåi ë c¶ hai c«ng thøc CT1 vµ CT2 nh−ng tû lÖ h×nh thµnh chåi ë tÊt c¶ c¸c c«ng thøc ®Òu chØ ®¹t lµ 3,3%. Do ®ã, rÊt cÇn ph¶i tiÕp tôc nghiªn cøu ®Ó n©ng cao ®−îc tû lÖ t¸i sinh chåi cña m« l¸. 3.3. §¸nh gi¸ sù sai kh¸c vÒ sinh tr−ëng gi÷a c©y t¸i sinh vµ c©y nh©n gièng v« tÝnh in vitro trong giai ®o¹n v−ên −¬m C¸c c©y t¸i sinh tõ m« th©n cña gièng Chiªm d©u ®−îc trång trong ®iÒu kiÖn tù nhiªn cña v−ên −¬m. So víi c¸c c©y nh©n nhanh in vitro (nu«i cÊy c¸c ®o¹n th©n mang 1 n¸ch l¸) cña gièng nµy, c¸c c©y t¸i sinh kh«ng cã sù sai kh¸c vÒ tû lÖ sèng vµ h×nh th¸i. Nh−ng sù sinh tr−ëng cña c¸c c©y nh©n in vitro tá ra −u thÕ h¬n ®«i chót. B¶ng 6. Kh¶ n¨ng sèng vµ sinh tr−ëng cña c©y t¸i sinh vµ c©y nh©n gièng v« tÝnh in vitro t¹i v−ên −¬m (sau 4 tuÇn) Lo¹i c©y TØ lÖ c©y ChiÒu cao TB Sè l¸ TB (l¸) §Æc ®iÓm h×nh th¸i sèng (%) (cm) C©y t¸i sinh 100 22,74 ± 2,1 6,63 ± 0,7 C©y mËp, khoÎ, l¸ xanh C©y nh©n in vitro 100 24,70 ± 2,5 7,48 ± 0,8 C©y mËp, khoÎ, l¸ xanh Nh− vËy cã thÓ kÕt luËn r»ng c©y t¸i sinh tõ m« th©n c©y khoai lang cã thÓ sinh tr−ëng b×nh th−êng ë ®iÒu kiÖn ngoµi v−ên −¬m gièng nh− c©y nh©n gièng v« tÝnh in vitro. Tuy nhiªn cÇn ph¶i tiÕp tôc ®¸nh gi¸ sù ph¸t triÓn vµ h×nh thµnh s¶n phÈm kinh tÕ (cñ) cña c©y t¸i sinh trong thêi gian tiÕp theo. 4
4. KÕt luËn §· x©y dùng ®−îc quy tr×nh t¸i sinh in vitro cña c¸c gièng khoai lang Chiªm d©u, N«ng nghiÖp 31 vµ Lim lµm c¬ së cho kü thuËt chuyÓn gen qua viÖc x¸c ®Þnh ®−îc: 4.1. Lo¹i m« thÝch hîp dïng ®Ó t¸i sinh c©y khoai lang qua m« sÑo lµ m« th©n. 4.2. Ph−¬ng thøc h×nh thµnh chåi chñ yÕu lµ chåi ®¬n t¸i sinh tõ m« sÑo. 4.3. M«i tr−êng t¸i sinh chåi tèt nhÊt ®èi víi m« th©n c¸c gièng khoai lang kh¸c nhau lµ kh¸c nhau: §èi víi gièng Chiªm D©u vµ gièng Lim: MS + 1,2 ppmkinetin vµ 0,5 ppm IAA/lÝt. Trªn m«i tr−êng nµy tû lÖ t¸i sinh chåi cña gièng Chiªm d©u ®¹t 73,3% vµ gièng Lim ®¹t 56,6%. §èi víi gièng NN31: MS + 2,0 ppm kinetin vµ 0,1 IAA/lÝt. Trªn m«i tr−êng nµy tû lÖ t¸i sinh chåi ®¹t 33,3% 4.4. C©y t¸i sinh cã kh¶ n¨ng sèng vµ sinh tr−ëng b×nh th−êng gièng nh− c©y nh©n gièng v« tÝnh in vitro ë ngoµi ®iÒu kiÖn m«i tr−êng tù nhiªn. Tµi liÖu tham kh¶o NguyÔn ThÞ Lý Anh, NguyÔn Quang Th¹ch, 2003. “Nghiªn cøu lµm s¹ch virus b»ng nu«i cÊy meristem trªn mét sè gièng khoai lang ë B¾c ViÖt nam”. B¸o c¸o khoa häc héi nghÞ c«ng nghÖ sinh häc toµn quèc 2003. Nxb Khoa häc kü thuËt, trang: 735-739. Ph¹m BÝch Ngäc, §inh thÞ Phßng, Egnin M., Prakash C. S., Lª TrÇn B×nh, 2002. “Hoµn thiÖn ph−¬ng ph¸p chuyÓn gen vµo mét sè gièng khoai lang ViÖt Nam th«ng qua Agrobacterium tumefaciens”. T¹p chÝ khoa häc vµ c«ng nghÖ. TËp 40-sè §B/2002, trang:142-149. Niªn gi¸m thèng kª, 2003. Nxb Thèng kª, Hµ néi-2003. Trang: 45 Clive James, 2003. “ Global Status of Commercialized Transgenc Crops: 2003”. ISAAA Briefts. p: 1-25. Liu Q. C., et al., 1998. “An efficient system of embryogenic suspension culture and plant regeneration in sweetpotato, Impact on a changing world". International potato center program report, 1997-1998, p. 265 – 267 Lucckmini K. W. et al., 1994. “Plant regeneration of sweetpotato(Ipomoea batatas Poir.)”. Plant Cell Reports 3, p: 112-115 Murashige T., Skoog F. A., 1962. “A revised medium for rapid growth and biossays with tobaco tissue culture”. Physiol. plant. 15, p: 473-479 Faostat - FAO Statistics Database (Online). Accessed June 1999. http://apps.fao.org 5