Phân lập, xác định đặc tính và nhận diện các vi khuẩn nội sinh cây mía (Saccharum Officinarum L.) trồng ở tỉnh Tây Ninh

TAÏP CHÍ KHOA HOÏC ÑAÏI HOÏC SAØI GOØN Soá 12 (37) - Thaùng 2/2016<br /> <br /> <br /> <br /> <br /> Phân lập, xác định đặc tính và nhận diện các vi khuẩn<br /> nội sinh cây mía (Saccharum Officinarum L.)<br /> trồng ở tỉnh Tây Ninh<br /> Isolation, characterization and identification of endophytic bacteria in sugarcane<br /> (Saccharum Officinarum L.) cultivated on soils of Tay Ninh province<br /> SV. Nguyễn Thị Thu Hằng (1)<br /> ThS. Đặng Thị Ngọc Thanh (2)<br /> (1), (2)<br /> Trường Đại học Sài Gòn<br /> <br /> St. Nguyen Thi Thu Hang (1)<br /> M.S. Dang Thi Ngoc Thanh (2)<br /> (1), (2)<br /> Sai Gon University<br /> <br /> Tóm tắt<br /> T ười a u rễ à ười a u h n c y a r ng ại a huy n h u Thành Tr ng àng à T n<br /> i n c a nh T y Ninh h n ư c y ư i òng i hu n n i inh r n i rường G<br /> h ng ạ . h n n c c òng i hu n hu ư c c hu n ạc ạng ròn a nguy n n i ch<br /> hư c – . Đa c c à c ạng u ng n à h n ng chuy n ng. T c c c òng hu<br /> ư c c h n ng c ịnh ạ hòa an n h an à inh ng h . òng i hu n HT h<br /> hi n c a ặc nh n u r n n n ư c uy n chọn nh n i n ằng hư ng h inh học h n<br /> ử. K u gi i r nh ự h ng n h a 16S r N à nh i c ở ữ i u c a N ằng<br /> c ng cụ a n ch h y òng HT c ự ư ng ng 96% i a ry r uca n i ài i hu n<br /> c h n ng húc y ng rưởng hực ư c c .<br /> Từ khóa: cây mía, cố định đạm, hòa tan lân, vi khuẩn thúc đẩy tăng trưởng thực vật, tổng hợp IAA, vi<br /> khuẩn nội sinh…<br /> Abstract<br /> Endophytic bacteria in sugarcane plant cultivated on soils of Tay Ninh province were isolated and<br /> characterized. Sugarcane materials were collected from three districts of this province including Chau<br /> Thanh, Trang Bang, and Tan Bien. There were 75 bacterial isolates that were isolated in N free medium<br /> LGI. The majority of their colonies are round-shaped, climy, smooth, colourless or milk-color, with size<br /> about 0.5-5.0 mm. Cells often have short rod-shape and most of them have motility. All of them have<br /> ability of nitrogen fixation, and phosphate solubilization together with IAA biosynthesis. The best<br /> isolate HTR8 was selected to sequencing 16S rRNA gene fragment. This isolate showed a high degree<br /> of similarity (96%) to reference strain Labrys portucalensis train F11 of the GenBank of NCBI, and one<br /> potential Plant Growth Promoting Bacteria has recently been reported.<br /> Keywords: endophytic bacteria, IAA biosynthesis, nitrogen fixation, phosphate solubilization, Plant<br /> Growth Promoting Bacteria...<br /> <br /> <br /> <br /> <br /> 108<br />  1. Đặt vấn đề Burkholderia vietnamiensis, B. unamae, B.<br /> Đường giữ vai trò quan trọng trong silvatlantica . … c i hu n này có kh<br /> kh u ph n n hằng ngày c a c n người. n ng húc y ng rưởng thực v t thông<br /> Đường ư c n u a nguy n i u ua c c c ch trực ti p hay gián ti như c<br /> hi n chi h n 6 % ng s n ư ng ường ịnh ạm, hòa tan lân, t ng h p IAA, v.v...<br /> thô c a toàn th gi i. Vi t Nam, cây mía (Hoang Minh Tam và Cao Ngoc Diep, 2014)<br /> ư c tr ng ở nhiều ịa hư ng. Tr ng Nghiên cứu này nhằm tìm ki m và<br /> Tây Ninh là t nh có di n tích tr ng mía l n ư c u nh n di n các dòng vi khu n n i<br /> nh t khu vực Đ ng Na . Tuy nhiên, t inh c y a c c c ặc tính t . Đ y à c c<br /> n 2 1 n n 2 13 i n tích tr ng dòng vi khu n b n ịa có tiề n ng ứng<br /> mía c a t nh này gi m t 25,5 nghìn ha dụng trong s n xu t phân bón vi sinh<br /> xu ng còn 22,3 nghìn ha (T ng cục th ng chuyên dùng cho cây mía c a ịa hư ng.<br /> kê Vi t Nam, 2015). M t trong những cách 2. Vật liệ<br /> hường ư c sử dụng uy r n ng u t 2.1. Khử trùng mẫu và phân lập<br /> và s n ư ng à ng cường bón phân hóa vi khuẩn<br /> học ch c y. ư ng h n ạm hóa học c u thân và rễ c a cây mía<br /> hường ư c n ng n c c nư c sử dụng là (Saccharum officinarum L.) r ng giai ạn<br /> 2 g N/ha/n h ặc th ch n n v a tr cờ ư c thu th p ở các ru ng mía tại<br /> 400 - g N/ha/n (H ang Minh Ta 13 xã thu c 3 huy n Châu Thành, Tr ng<br /> và Cao Ngoc Diep, 2014). Bón phân không Bàng và huy n Tân Biên c a t nh Tây Ninh.<br /> c n i, h p lý sẽ gây tình trạng v a th a M u ư c ti n hành khử trùng qua các<br /> v a thi u inh ưỡng cho cây tr ng, gây giai ạn như c a Hoang Minh Tam<br /> hi n ư ng chai cứng, gi phì, và thay và Cao Ngoc Diep (2014) v i sự ng n ng<br /> i tính ch t v t lý, hóa học và sinh học c n n 96º cũng như ng hời gian khử<br /> c a t tr ng ng thời còn gây nh hưởng m u và xác nh n hi u qu khử trùng qua<br /> x u n i rường và sức khỏ c n người ki ra nư c rửa cu i r n i rường<br /> ( hạ V n T n à Trư ng H T c, TYGA (Tryptone Yeast Glucose Agar). M u<br /> 2004). Do v y ngày nay u hư ng tìm sau khi khử trùng bề mặ hành c ng ư c<br /> ki m các ch ng vi khu n c ch r ng ti n hành thu l y dịch chi t và ch ng vào<br /> có các vi khu n n i sinh, nhằm ứng dụng i rường LGI (Cavalcante và Döbereiner,<br /> như c c ch ph m giúp b sung hoặc thay 1988) kh ng ạ n ặc. Sau 24 – 48 giờ ,<br /> th m t ph n phân bón hóa học cho cây sự xu t hi n c a màng mỏng (pellicle) cách<br /> tr ng ư c chú trọng. bề mặ i rường 1 – 4 mm chứng tỏ có sự<br /> Vi khu n n i sinh tr i qua ph n l n hi n di n c a vi khu n n i sinh. C y ria l p<br /> òng ời trong cây ch . Chúng t p trung bên dịch này ang i rường G ặc và ti p tục<br /> trong t bào, kho ng gian bào hay h th ng c y chuy n ch n hi hu ư c các khu n<br /> mạch mà không gây b nh hoặc b t kỳ h u lạc th t sự thu n nh ưu rữ, b o qu n<br /> qu tiêu cực nà i v i cây ch (Cao Ngọc như c c òng h n p (isolates) theo mô t<br /> Đi p, 2011). Nhiều loài vi khu n n i inh ã c a Cao Ngọc Đi p (2011).<br /> ư c phân l p t c y a như 2.2. Xác định đặc tính khuẩn lạc và<br /> Gluconacetobacter diazotrophicus, tế bào<br /> Herbaspirillum sp., Pantoea sp., Mô t ặc i m hình thái khu n lạc và<br /> <br /> 109<br /> t bào theo Cao Ngọc Đi p (2011) và Tr n gi i v i các trình tự c r ng c ở dữ li u<br /> inh Thư c và ctv. (2001). X c ịnh Gram c a GenBank. Tìm dòng có ch s ư ng<br /> c a c c òng hu ư c bằng hư ng h ng cao, t uy n n ài c a dòng<br /> nhu m Gram theo Nguyễn Đức ư ng và vi khu n uy n chọn.<br /> ctv. (2003) k t h p v i ki m tra nhanh 3. Kết quả và thảo luận<br /> bằng hư ng h “KOH S ring T ” 3.1. Phân lập vi khuẩn nội sinh<br /> (von Graevenitz và Bucher, 1983). Vi khu n n i sinh có trong dịch chi t<br /> 2.3. Khảo nghiệm khả năng cố định các m u c y a hử trùng bề mặt<br /> đạm, hòa tan lân và tổng hợp IAA phát tri n trong c i rường LGI bán<br /> Các dòng mọc r n i rường phân ặc tạo thành màng mỏng như c a<br /> l à G h ng ạ ư c c y chuy n Perin và ctv. (2006), Nguyễn Thị Thu Hà<br /> ang i rường NBRIP chứa và ctv. (2009) (Hình 1). Sau hi ư c c y<br /> orthophosphate khó tan. Dòng nào phát chuy n ang i rường G h ng ạm<br /> tri n ư c trên c hai loại i rường này ặc và làm thu n, các dòng vi khu n ư c<br /> chứng tỏ có kh n ng c ịnh ạm và hòa ti p tục c y ché ang i rường NBRIP<br /> tan lân. Các dòng này ti p tục ư c nh ặc chứa orthophosphate. K t qu hu ư c<br /> giá kh n ng ng h p NH4+ trong môi là 75 dòng vi khu n có cùng lúc hai kh<br /> rường ur ’ ( ar à c 2 ) h ng n ng c ịnh ạ à hòa an n.Tr ng<br /> ạm lỏng, kh n ng hòa an n h an có 46 dòng có ngu n g c t rễ mía<br /> r ng i rường NBRIP (Nautiyal, 1999) (61,33%) và 29 dòng có ngu n g c t<br /> lỏng ng thời c ịnh kh n ng inh (38,67%). Nhiều tác gi khác khi nghiên<br /> r ng i rường LGI lỏng có b sung cứu vi khu n n i inh cũng nh n th y s<br /> 100 mg tryptophan/L h c c hư ng dòng vi khu n n i sinh phân l ư c t rễ<br /> pháp dựa trên ph n ứng màu k t h hường nhiều h n i phân l p t thân<br /> m uang như c a Hoang Minh c y iều này ng h m t trong những gi<br /> Tam và Cao Ngoc Diep (2014). thuy t về ngu n g c vùng rễ (rhizophere)<br /> 2.4. Định danh dòng có khả năng c a vi khu n n i sinh (Rosenblueth và<br /> cố định đạm, hòa tan lân và tổng hợp IAA Martínez-Romero, 2006).<br /> tốt nhất<br /> Chọn dòng vi khu n c ặc tính t t<br /> nh ịnh danh bằng gi i trình tự m t<br /> chiều g n 16S rRNA v i m i ng<br /> (universal primer) 27F (gửi m u cho Công<br /> ty Nam Khoa, Tp. H Chí Minh).<br /> 2.5. Phương pháp xử lý số liệu<br /> Dựa à hư ng r nh ư c chu n và<br /> trị s O ư c c ịnh ư ng NH4+,<br /> P2O5 ( ư ng ư ng) à c r ng u. Hình 1. Vi khuẩn nội sinh phát triển<br /> Tính toán và xử lý th ng kê bằng trên môi trường LGI bán đặc (B) và đối<br /> Microsoft Excel 2010 và SPSS 16.0. chứng âm gồm dịch chiết từ mẫu mô mía<br /> Sử dụng chư ng r nh a n c a đã hấp tiệt trùng (A)<br /> N so sánh trình tự 16S r N<br /> <br /> 110<br />  3.2. Đặc tính khuẩn lạc và tế bào chi m 56% và Gram (+) chi m 44% (Hình<br /> Về hình thái khu n lạc a các dòng 3). K t qu này ư ng ự như c c t qu<br /> vi khu n phân l ư c có dạng tròn nghiên cứu vi khu n n i sinh trong m t s<br /> (90,67%), s còn lại có dạng h ng ều cây m t lá m h c như h (Nguyễn<br /> (9,33%). Khu n lạc có màu tr ng ục Thị Thu Hà và ctv., 2009), các loại cỏ ch n<br /> chi m 38,67%, màu tr ng trong chi m nuôi (Cao Ngọc Đi p và Nguyễn Ái Chi,<br /> 25,33%, màu tr ng ngà chi m 28% và màu 2009), ngô (Dang Thi Ngoc Thanh và Cao<br /> là vàng nhạt chi m 8%. Đa các dòng thu Ngoc Diep, 2014) và vi khu n n i sinh cây<br /> ư c tạo khu n lạc có dạng bìa nguyên mía tr ng ở t nh Đ ng Nai (Hoang Minh<br /> (92%) à n imô (96%), còn lại là dạng Tam và Cao Ngoc Diep, 2014).<br /> a r ng cưa ( %) à n i lài (4%).<br /> Đường kính khu n lạc c a các dòng thu<br /> ư c nằm trong kho ng t 0,5 n 5 mm<br /> (Hình 2).<br /> <br /> <br /> <br /> <br /> Hình 3. Kết quả nhuộm Gram của một<br /> số dòng vi khuẩn nội sinh<br /> 3.3. Khả năng cố định đạm, hòa tan<br /> lân và tổng hợp IAA<br /> B ng 1 au y r nh ày ề ngu n<br /> Hình 2. Hình thái khuẩn lạccủa một số<br /> g c và kh n ng c ịnh ạm, hòa tan lân<br /> dòng vi khuẩn nội sinh<br /> và sinh t ng h p IAA c a 10 dòng t t nh t<br /> Qua uan ư c ư i kính hi n vi trong s 75 dòng vi khu n n i sinh cây mía<br /> quang học, nh n th y ch y u các dòng có hân l ư c.<br /> t bào hình que ng n, nhỏ và t t c ều có<br /> kh n ng chuy n ng. Qua k t qu ki m<br /> tra Gram cho th y các dòng Gram (-)<br /> <br /> <br /> Bảng 1. Kết quả định lượng sự cố định đạm, hòa tan lân và tổng hợp IAA của 10<br /> dòng vi khuẩn nổi trội<br /> <br /> Dòng NH4+ P2O5 IAA<br /> STT Nguồn gốc<br /> vi khuẩn (mg/L)* (mg/L)* (mg/L)*<br /> <br /> 1 CT4 Th n n - Châu Thành 1,507 e 57,892 a 18,212 b<br /> <br /> 2 DR2 Rễ, H o Đức - Châu Thành 1,248 f 40,687 c 9,019 f<br /> <br /> 3 KT1 Th n Đ ng Khởi - Châu Thành 1,625 d 42,458 c 5,562 gh<br /> <br /> <br /> 111<br />  4 KT2 Th n Đ ng Khởi - Châu Thành 1,059 g 30,170 d 17,450 c<br /> <br /> 5 LT2 Thân, Thành Long - Châu Thành 1,465 c 22,887 e 10,307 d<br /> <br /> 6 TVT1 Thân, Trà Vong - Tân Biên 2,079 b 46,639 b 6,304 g<br /> <br /> 7 TVT4 Thân, Trà Vong - Tân Biên 1,197 fg 41,625 c 5,296 h<br /> <br /> 8 TDT8 Thân, Thạnh Đ ng - Tân Biên 1,207 fg 26,870 d 5,929 gh<br /> <br /> 9 GBR5 Rễ, Gia Bình - Tr ng Bàng 0,254 h 61,315 a 10,413 e<br /> <br /> 10 HTR8 Rễ Hưng Thu n - Tr ng Bàng 2,654 a 58,417 a 18,836 a<br /> <br /> 11 Đ i chứng 0,000 i 0,000 f 0,000 i<br /> <br /> CV (%) 6,391 5,911 5,050<br /> <br /> <br /> *Số liệu trình bày trong bảng là bình quân của 4 đợt đo mẫu với 3 lần lặp: 2, 4, 6, 8<br /> ngày sau khi cấy đối với NH4+ và IAA; 5, 10, 15, 20 ngày sau khi chủng đối với P2O5.<br /> Những số (trong cùng một cột) được theo sau bởi cùng chữ cái không có sự khác biệt<br /> ý nghĩa ở mức 5%.<br /> <br /> Qua nh n th y ư ng ạm c ịnh . … ư c thông báo (Puente và ctv.,<br /> c a 10 dòng t t nh a ng t 0,254 – 2009; de-Bashan và ctv., 2008, Ryan và<br /> +<br /> 2,654 mg/L NH4 ư ng lân hòa tan trong ctv., 2008;).<br /> kho ng 22,87 – 61,315 mg/ L P2O5 và<br /> ư ng ạt t 296 – 1 36 g/ .<br /> Những òng ch u ịnh ư ng ca ề<br /> c a ch i u g c HT TVT1 T<br /> àG (H nh ). c t qu ịnh ư ng<br /> hu ư c ư ng ự như u nghi n cứu<br /> c a m t s tác gi ti n hành trên i ư ng<br /> vi khu n n i sinh cây mía (Ngô H ng<br /> Thanh và ctv., 2014; Hoàng Minh Tâm và<br /> Cao Ngọc Đi p, 2014; Hoang Minh Tam<br /> và Cao Ngoc Diep, 2014) và m t s cây<br /> tr ng h c như à u nành (Glycine max<br /> .) à ng (Zea mays L.) (Cassán và ctv.,<br /> 2009; Szilagyi-Zecchin và ctv., 2014). Hình 4. Phản ứng màu với thuốc thử của<br /> Th ng ua c c c ch c ịnh ạm, hòa tan một số dòng vi khuẩn nổi trội khi đo<br /> phosphate và t ng h nhiều i lượng lân hòa tan vào 5 DAI<br /> khu n n i inh h hi n h n ng húc (day after inoculation)<br /> y ng rưởng thực v ở c c ài<br /> Pachycereus pringlei, Chlorella vulgaris,<br /> <br /> 112<br />  3.4. Kết quả giải trình tự một phần 4. Kết luận<br /> đoạn gen 16S rRNA của dòng vi khuẩn Có 75 dòng vi khu n n i sinh phân l p<br /> HTR8 ư c t rễ và thân cây mía tr ng tại t nh<br /> Dòng HTR8 có ngu n g c t rễ cây T y Ninh. Tr ng òng i hu n HTR8<br /> mía tr ng tại Hưng Thu n, huy n Tr ng c ư ng ạm c ịnh ư ng lân hòa tan và<br /> Bàng th hi n t t c 3 ặc nh n u r n ư ng IAA sinh ra cao nh . n cứ vào các<br /> ư c tuy n chọn ti p tục nh n di n bằng k t qu gi i trình tự ạn gen 16S rRNA và<br /> hư ng h inh học phân tử. K t qu ò òng ư ng ng, có th xem HTR8<br /> gi i trình tự m t ph n ạn gen 16S rRNA như i hu n Labrys portucalensis(gi<br /> à ò òng ư ng ng c r ng c ở ịnh). Dòng vi khu n này có tiề n ng ứng<br /> dữ li u c a NCBI cho th y dòng HTR8 có dụng như t vi khu n ch h ch ng<br /> sự ư ng ng 96% v i ch ng vi khu n rưởng thực v t cho cây mía.<br /> Labrys portucalensis F11 (Hình 5). Labrys<br /> portucalensis là m t Proteobacteria có hình TÀI LIỆU THAM KHẢO<br /> que và thu c nhóm Gram âm phù h p v i A. Tài liệu tham khảo tiếng Việt<br /> k t qu kh o sát hình thái và nhu m Gram<br /> 1. Cao Ngọc Đi p và Nguyễn Ái Chi (2009),<br /> c a dòng HTR8. “Phân l à ặc tính vi khu n n i sinh cây<br /> khóm (Ananas comosus L.) tr ng r n t<br /> phèn huy n B n Lức, t nh Long An” Tuyển<br /> tập hội nghị Công nghệ sinh học phía Nam<br /> năm 2009, tại thành ph H Chí Minh t ngày<br /> 23-2 h ng 1 n 2 9.<br /> 2. Cao Ngọc Đi p (2011), Sách chuyên khảo Vi<br /> khuẩn nội sinh thực vật, Nxb Đại Học C n<br /> Th n Th .<br /> 3. Nguyễn Thị Thu Hà, Hà Thanh Toàn và Cao<br /> Ngọc Đi p (2009), “Phân l à ặc tính c a<br /> vi khu n n i sinh ở m t s loại cỏ ch n nu i”<br /> Hình 5. Kết quả dò tìm dòng tương đồng Tạp chí Công nghệ Sinh học 7(2): 241-250.<br /> trình tự một phần gen 16S rRNA của 4. Nguyễn Đức ư ng, Phan Thị Huyền à<br /> dòng HTR8 Nguyễn Ánh Tuy t (2003), Thí nghiệm công<br /> nghệ sinh học (t p 2): Thí nghiệm vi sinh vật<br /> Nhiều loài m i trong chi Labrys học, Nxb Đại học Qu c gia, Tp. H Chí Minh.<br /> ư c phân l p t rễ cây tr ng ở nhiều nư c<br /> 5. Hoàng Minh Tâm và Cao Ngọc Đi p (2014),<br /> (Islam và ctv., 2007; Nguyen và ctv.,<br /> “X c ịnh ặc tính và nh n di n vi khu n n i<br /> 2015). M i y Inui-Kishi và ctv. (2012) sinh Gluconacetobacter diazotrophicus trong<br /> ề c p về kh n ng hòa an h ha cây mía ở hai t nh B n Tre và Long An” Tạp<br /> và t ng h p IAA khá t t c a m t dòng chí Nông nghiệp và Phát triển nông thôn 24:<br /> trong t ng s 60 dòng vi khu n à nh 68-74.<br /> c gi ư c phân l p t vùng rễ cây 6. Ngô H ng Thanh, Hoàng Minh Tâm và Cao<br /> mía tr ng tại Brazil òng này ư ng ng Ngọc Đi p (2014), “X c ịnh tính vi khu n<br /> r nh ự 16S r N v i i hu n Labrys n i sinh trong cây mía tr ng ở t nh B n Tre và<br /> Long An” Tạp chí Nông nghiệp và Phát triển<br /> portucalensis. Nông thôn. 2:41-48.<br /> <br /> 113<br /> 7. Tr n inh Thư c Nguyễn Đức H àng han 15. Inui-Kishi R.N., Kishi L.T., Picch S.C.,<br /> Thị hư ng Trang à hạ Thị H ng Tư i Barbosa J.C., Lemos M.T.O., Marcondes J.,<br /> (2001), Thực tập vi sinh vật học, Nxb Ðại học and de Macedo Lemos E.G. (2012),<br /> Qu c gia, Tp. H Chí Minh. “ h h ru u i izing an<br /> production activities inplant growth<br /> 8. hạ V n T n à Trư ng H T c (2 ),<br /> promoting rhizobacteria from brazilian soils<br /> hân n vi sinh trong n ng nghiệp N<br /> un r ugarcan cu i a i n” ARPN Journal<br /> N ng nghi Hà N i.<br /> of Engineering and Applied Sciences 7(11):<br /> 9. T ng cục th ng kê Vi t Nam (2015), (https:// 1446- 1454.<br /> www.gso.gov.vn/Default.aspx?tabid=217)<br /> 16. Islam M.S., Kawasaki H., Nakagawa Y.<br /> B. Tài liệu tham khảo tiếng Anh , Hattori T., Seki T. (2007), Labrys<br /> 10. Cassán F., Perrig D., Sgroy V., Masciarelli okinawensis sp. nov. and Labrys<br /> O., Penna C., and Luna V. (2009), miyagiensis sp. nov., budding bacteria<br /> “Azospirillum brasilense Az39 and isolated from rhizosphere habitats in Japan,<br /> Bradyrhizobium japonicum E109, and emended descriptions of the genus<br /> inoculated singly or in combination, Labrys and Labrys monachus. Int J Syst<br /> promote seed germination and early Evol Microbiol, 57: 552-557.<br /> seedling growth in corn (Zea mays L.) and 17. Nautiyal C.S. (1999), “ n ffici n<br /> soy bean (Glycine max .)” Eur. J. Soil microbiological growth medium for<br /> Biol, 45:28-35. screening phosphate solubilizing<br /> 11. Cavalcante V.A., and Döbereiner J. (1988), icr rgani ” FEMS Microbiology<br /> “ n w aci -tolerant nitrogen-fixing Letters. 170: 265-270.<br /> ac riu a cia wi h ugarcan ” Plan 18. Nguyen N.L., Kim Y.J., Hoang V.A., Kang<br /> and Soil 108: 23-31. J.P., Wang C., Zhang J., Kang C.H., and<br /> 12. Dang Thi Ngoc Thanh and Cao Ngoc Diep Yang D.C. (2015), Labrys soli sp. nov.,<br /> (2 1 ) “ a i n charac riza i n an isolated from the rhizosphere of Korean<br /> identification of endophytic bacteria inmaize ginseng. Int J Syst Evol Microbiol. (Published<br /> (Zea mays L.) cultivated on acrisols of the online:Aug 5. DOI: 10.1099/ijsem.0.000512)<br /> Southea f Vi na ” American Journal of 19. Park M., Kim C., Yang J., Lee H., Shin W.,<br /> Life Sciences. 2(4): 224-233. (Published Ki S. an Sa T. (2 ) “ a i n an<br /> online: Aug. 30, 2014. DOI: 0.11648/j.ajls. characterization of diazotrophic growth<br /> 20140204.16). promoting bacteria from rhizosphere of<br /> 13. De-Bashan L.E., Antoun H., and Bashan Y. agricu ura cr f K r a”<br /> (2 ) “n n f in -3-acetic acid Microbiological Research. 160: 127-133.<br /> produced by the growth-promoting 20. Perin L., Martínez-Aguilar L., Castro-<br /> bacterium Azospirillum ” in r ing González R., Estrada-de los Santos P.,<br /> growth of Chlorella vulgaris. J. Phycol.44: Cabellos-Avelar T., Guedes H.V., Reis<br /> 938-947. V.M., and Caballero-Mellado J. (2006),<br /> 14. Hoang Minh Tam and Cao Ngoc Diep (2014), “ iaz r hic Burkholderia species<br /> “ a i n charac riza i n an i n ification associated with field-grown maize and<br /> of endophytic bacteria in sugarcane ugarcan ” Appl. Environ. Microbiol. 72:<br /> (Saccharum spp. L.) cultivated on soils of the 3103-3110.<br /> ng Nai r inc S u h a f Vi na ” 21. Puentea M.E., Li C.Y., Bashan Y. (2009),<br /> American Journal of Life Sciences. 2(6): 361- “En hy ic ac ria in cac i can<br /> 368. (Published online: Dec. 18, 2014. DOI: improve the development of cactus see ing ”<br /> 10.11648/j.ajls.20140206.16) Environmental and Experimental Botany. 66:<br /> 402-408.<br /> <br /> 114<br /> 22. Rosenblueth M., and Martínez-Romero E. Glienke C., and Galli-Terasawa L.V. (2014),<br /> (2 6) “ ac ria n hy an h ir “Identification and characterization of<br /> in rac i n wi h h ” Molecular Plant- endophytic bacteria from corn (Zea mays L.)<br /> Microbe Interactions.19:827-837. roots with biotechnological potential in<br /> agriculture” AMB Express 4(26).<br /> 23. Ryan R.P., Germanie K., Franks A., Ryan<br /> (Published online: 7 May, DOI: 10.1186/<br /> D.J., and Dowling D.N. (2008),<br /> s13568-014-0026-y).<br /> “ ac ria n hy : r c n n<br /> an a ica i n ” FEMS Microbiol. Lett. 25. Von Gravenitz A., and Bucher C. (1983),<br /> 278:1-9. Accuracy of the KOH and Vancomycin Tests<br /> in Determining the Gram Reaction of Non-<br /> 24. Szilagyi-Zecchin V.J., Ikeda A.C., Hungria<br /> En r ac ria ” J Clin Microbiol.<br /> M. , Adamoski D., Kava-Cordeiro V.,<br /> 16(4):983-985.<br /> <br /> <br /> Ngày nh n bài: 12/01/2016 Biên t p xong: 15/02/2016 Duy t ng: 2 / 2/2016<br /> <br /> <br /> <br /> <br /> 115<br />