Phát hiện thiếu hụt G6PD và phân tích các dạng đột biến gen của nó ở một số tr-ờng hợp thuộc các dân tộc Kinh, Mường, Racley và Tày ở Hà Nội, Hoà Bình, và Khánh Hoà

Chia sẻ: Sunshine_6 Sunshine_6 | Ngày: | Loại File: PDF | Số trang:7

Thêm vào BST

Báo xấu

89
lượt xem 7
download

Download Vui lòng tải xuống để xem tài liệu đầy đủ

Thiếu hụt G6PD là bệnh lý enzym di truyền hồng cầu hay gặp nhất ở ng-ời, bệnh .nh h-ởng đến trên 400 triệu ng-ời trên toàn thế giới. Trên 100 dạng đột biến gen mà hầu hết là đột biến điểm đã đ-ợc công bố. Đến nay, nghiên cứu về các dạng đột biến của thiếu hụt G6PD ng-ời Việt Nam mới chỉ là bắt đầu. Trong nghiên cứu này 119 ng-ời trong tổng số 2871 ng-ời thuộc các dân tộc Kinh quanh Hà Nội, M-ờng Hoà Bình, Racley và Tày Khánh Hoà đã đ-ợc phát hiện có thiếu hụt...

Chủ đề:

Bình luận(0) Đăng nhập để gửi bình luận!

Lưu

Nội dung Text: Phát hiện thiếu hụt G6PD và phân tích các dạng đột biến gen của nó ở một số tr-ờng hợp thuộc các dân tộc Kinh, Mường, Racley và Tày ở Hà Nội, Hoà Bình, và Khánh Hoà

TCNCYH 23 (3) 2003 Ph¸t hiÖn thiÕu hôt G6PD vµ ph©n tÝch c¸c d¹ng ®ét biÕn gen cña nã ë mét sè tr−êng hîp thuéc c¸c d©n téc Kinh, M−êng, Racley vµ Tµy ë Hµ Néi, Hoµ B×nh, vµ Kh¸nh Hoµ TrÇn ThÞ ChÝnh1, NguyÔn ThÞ Ngäc Dao2, Kaoru Nishiyama3, Taku Shirakawa3, T¹ ThÞ TÜnh4, NguyÔn Tr−êng Giang2, Huúnh DiÔm Thuý1, Qu¸ch Xu©n Hinh5, §oµn H¹nh Nh©n4, Hoµng H¹nh Phóc6, Vò TriÖu An1 1 §¹i Häc Y Hµ Néi, 2ViÖn C«ng nghÖ sinh häc - Trung t©m KHTN vµ CNQG, 3§¹i häc Tæng hîp Kobe, NhËt B¶n, 4ViÖn Sèt rÐt - Ký sinh trïng - C«n trïng trung −¬ng, 5ViÖn Qu©n Y 10, 6 ViÖn Nhi trung −¬ng ThiÕu hôt G6PD lµ bÖnh lý enzym di truyÒn hång cÇu hay gÆp nhÊt ë ng−êi, bÖnh ¶nh h−ëng ®Õn trªn 400 triÖu ng−êi trªn toµn thÕ giíi. Trªn 100 d¹ng ®ét biÕn gen mµ hÇu hÕt lµ ®ét biÕn ®iÓm ®· ®−îc c«ng bè. §Õn nay, nghiªn cøu vÒ c¸c d¹ng ®ét biÕn cña thiÕu hôt G6PD ng−êi ViÖt Nam míi chØ lµ b¾t ®Çu. Trong nghiªn cøu nµy 119 ng−êi trong tæng sè 2871 ng−êi thuéc c¸c d©n téc Kinh quanh Hµ Néi, M−êng Hoµ B×nh, Racley vµ Tµy Kh¸nh Hoµ ®· ®−îc ph¸t hiÖn cã thiÕu hôt G6PD. 37 mÉu DNA cña 32 ng−êi thiÕu hôt G6PD vµ 5 ng−êi b×nh th−êng ®· ®−îc ph©n tÝch gen. 7 d¹ng ®ét biÕn cña 30 tr−êng hîp thiÕu hôt G6PD ®· t×m thÊy, ®ã lµ Viangchan, Chatham, Chinese-5, Union, Canton, Kaiping vµ Silent. D¹ng ®ét biÕn Union vµ Chinese-5 chØ t×m thÊy ë nhãm ng−êi M−êng, trong ®ã Union gÆp tíi 8/18 tr−êng hîp ®−îc ph©n tÝch. Còng ë nhãm ®©n téc nµy, cã hai gia ®×nh, trong ®ã bè vµ mÑ ®Òu mang gen bÖnh [ch−a lÊy ®−îc m¸u cña con] vµ 1 gia ®×nh, mÑ vµ con trai ®Òu bÞ bÖnh d¹ng Canton. I. §Æt vÊn ®Ò cña NST X (Xq.28), gen chøa 13 exon vµ dµi kho¶ng 20 Kb, exon 1 kh«ng m· ho¸ [5,8]. ThiÕu hôt Glucose 6 Phosphate Cïng víi sù ph¸t triÓn cña sinh häc ph©n tö th× Dehydrogenase (G6PD) lµ bÖnh lý enzym hång c¬ së gen häc cña thiÕu hôt G6PD, c¸c d¹ng cÇu hay gÆp nhÊt ë ng−êi [3], sè ng−êi thiÕu ®ét biÕn gen cña nã ®· vµ vÉn ®ang ®−îc hôt G6PD trªn toµn thÕ giíi cã kho¶ng trªn 400 nghiªn cøu. Mçi d¹ng ®ét biÕn g©y ra nh÷ng triÖu [3,4,5]. BÖnh th−êng g©y ra t×nh tr¹ng bÖnh c¶nh vµ møc ®é nÆng nhÑ kh¸c nhau tr−íc thiÕu m¸u tan huyÕt sau sö dông mét vµi lo¹i sù tÊn c«ng cña thuèc vµ c¸c chÊt oxy ho¸ thuèc, thøc ¨n hay nhiÔm khuÈn [3]. ThiÕu hôt [1,3]. Theo y v¨n thÕ giíi tû lÖ thiÕu hôt G6PD G6PD lµ bÖnh di truyÒn qua nhiÔm s¾c thÓ còng nh− c¸c d¹ng ®ét biÕn gen cña nã cã sù [NST] giíi tÝnh. Locus gen qui ®Þnh cÊu tróc kh¸c nhau gi÷a c¸c d©n téc vµ vïng ®Þa lý. cña G6PD n»m trªn nh¸nh dµi vïng 2 b¨ng 8 Ch©u ¸, trong ®ã cã ViÖt Nam, ®−îc xÕp vµo 99
TCNCYH 23 (3) 2003 khu vùc cã tû lÖ thiÕu hôt G6PD cao (0,5 - S&S 903, lÊy m¸u tÜnh m¹ch chèng ®«ng b»ng 20%) [2,3,4,5]. ë n−íc ta, tõ nh÷ng n¨m 70 EDTA. ®Õn nay ®· cã nhiÒu c«ng bè vÒ tû lÖ thiÕu hôt - Ph¸t hiÖn vµ ®¸nh gi¸ møc ®é thiÕu hôt: G6PD cña mét sè d©n téc vµ ®Þa ph−¬ng, ®Æc Kü thuËt huúnh quang ®Þnh tÝnh – KÝt cña h·ng biÖt ë nh÷ng vïng cã sèt rÐt l−u hµnh [1,2]. Sigma; kü thuËt t¹o vïng Formazan b¸n ®Þnh Tuy nhiªn nh÷ng nghiªn cøu vÒ ®ét biÕn gen l−îng – KÝt cña h·ng Sigma; kü thuËt ®Þnh míi chØ lµ b¾t ®Çu. Trong nghiªn cøu nµy l−îng ho¹t tÝnh enzym – KÝt cña h·ng chóng t«i tiÕn hµnh ph¸t hiÖn thiÕu hôt G6PD Boehringer Mannheim. vµ ph©n tÝch c¸c d¹ng ®ét biÕn gen cña nã ë mét sè tr−êng hîp bÖnh lý thuéc c¸c d©n téc - Ph©n tÝch gen: DNA t¸ch tõ m¸u toµn Kinh, M−êng, Racley vµ Tµy ë quanh Hµ Néi, phÇn, chèng ®«ng b»ng EDTA theo qui tr×nh vµ c¸c tØnh Hoµ B×nh, Kh¸nh Hoµ - ViÖt Nam. chuÈn dïng phenol vµ chloroforn. Ph¶n øng PCR dïng c¸c cÆp måi thÝch hîp cho 12 exon II. §èi t−îng vµ ph−¬ng ph¸p kh¸c nhau cña G6PD, s¶n phÈm thu ®−îc sÏ lµ nghiªn cøu khu«n cho ph¶n øng PCR ®Æc hiÖu tiÕp theo ®Ó 1. §èi t−îng nghiªn cøu: ph¸t hiÖn nhanh c¸c ®iÓm ®ét biÕn - MPTP [Multiplex PCR using Tandem Primers] theo 1819 ng−êi Kinh trong ®ã 840 trÎ s¬ sinh m« t¶ cña Shiratawa vµ CS [7], kÝt cña h·ng Hµ Néi vµ 979 bÖnh nh©n vµo kh¸m t¹i ViÖn Sigma. Thùc hiÖn PCS lÇn mét 6 b−íc 40 chu Qu©n Y 108 Hµ Néi, 250 ng−êi M−êng Hoµ kú, lÇn 2 MPTP 6 b−íc 30 chu kú trªn m¸y B×nh, 720 ng−êi Racley vµ 82 ng−êi Tµy PCR Beckman 9700. §äc t×nh tù DNA trªn Kh¸nh Hoµ. m¸y ph©n tÝch tù ®éng Model 310 cña h·ng 2. Ph−¬ng ph¸p nghiªn cøu: ABI Prism. KÕt qu¶ ®−îc xö lý b»ng ch−¬ng tr×nh tù ®éng so s¸nh víi d÷ liÖu DNA chuÈn - M¸u lÊy tõ gãt ch©n (trÎ s¬ sinh), ®Çu (GENETYX MAC). ngãn tay (ng−êi lín) vµo giÊy Whatman 1 hoÆc - VÞ trÝ sè 1 lµ chøng ©m - VÞ trÝ sè 2 lµ chøng d−¬ng 100
TCNCYH 23 (3) 2003 - VÞ trÝ sè 25, 26, 27 lµ d−¬ng tÝnh [+] - VÞ trÝ sè 6 ®−îc x¸c ®Þnh lµ d−¬ng tÝnh [++] - VÞ trÝ 10, 12, 18 lµ d−¬ng tÝnh [+++] ¶nh 1: Minh ho¹ kÕt qu¶ x¸c ®Þnh thiÕu hôt G6PD b»ng kü thuËt t¹o vßng Fomazan 1 2 3 4 5 6 7 8 9 200bp 229bp 150bp 146bp 100bp 94bp ¶nh 2: §iÖn di s¶n phÈm cña ph¶n øng MPTP - V¹ch 1: Marker 50 - V¹ch 2, 3: Ng−êi b×nh th−êng - V¹ch 4, 5, 6: Nh÷ng tr−êng hîp kh«ng cã ®ét biÕn ë exon 9 - V¹ch 7: Tr−êng hîp cã ®ét biÕn [thiÕu 1 vÖt] ë exon 9- D¹ng Viangchan - V¹ch 8: ChuÈn cã ®ét biÕn d¹ng Viangchan ë exon 9 [thiÕu 1 vÖt] - V¹ch 9: N−íc cÊt III. KÕt qu¶ B¶ng 1: Ph¸t hiÖn thiÕu G6PD ë c¸c d©n téc trong nhãm nghiªn cøu ThiÕu hôt G6PD D©n téc §Þa ®iÓm n n % Kinh Hµ Néi 1819 19 1,04 M−êng Hoµ B×nh 250 65 26,0 Racley Kh¸nh Hoµ 720 21 2,92 Tµy Kh¸nh Hoµ 82 14 17,07 Tæng 2871 119 4,14 101
TCNCYH 23 (3) 2003 B¶ng 2: C¸c d¹ng ®ét biÕn gen G6PD gÆp ë c¸c d©n téc trong nhãm nghiªn cøu Tªn d¹ng ®ét biÕn VÞ trÝ biÕn ®æi Acid amin t−¬ng øng Exon Nucleotid Viangchan 9 871 G A 291 Val Met Chatham 9 1003 G A 335 Ala Thr Chinese - 5 9 1024 C T 342 Leu Phe Union 11 1360 C T 454 Arg Cys Canton 12 1376 G C 459 Arg Leu Kaiping 12 1388 G A 463 Arg His Silent 11 1311 C T TAC - TAT: Tyrosin B¶ng 3: C¸c d¹ng ®ét biÕn gen G6PD gÆp ë tõng d©n téc D¹ng ®ét Viangchan Chatham+ biÕn Chinese-5 Union Canton Kaiping Silent Tæng Viang+Sil Silent D©n téc Kinh 0/2 1 2 1 6 M−êng 2/1 1 8 3 3 18 Racley 0/1 1 2 Tµy 0/1 2 1 4 Tæng 2/5 = 7 1 1 8 8 2 3 30 IV. Bµn luËn ngoµi nh÷ng khay nhùa vµ mét sè dông cô th«ng th−êng cña phßng thÝ nghiÖm [6]. Dùa Trong nghiªn cøu nµy, ®Ó ph¸t hiÖn thiÕu vµo ®−êng kÝnh vµ ®Ëm ®é mµu xanh vßng hôt G6PD chóng t«i sö dông kü thuËt t¹o vßng Formazan ta cã thÓ ®¸nh gi¸ møc ®é thiÕu hôt Formazan b¸n ®Þnh l−îng, kü thuËt huúnh G6PD. quang ®Þnh tÝnh vµ mét sè tr−êng hîp cã ®Þnh l−îng ho¹t tÝnh enzym b»ng kü thuËt quang phæ KÕt qu¶ sµng läc 2871 ng−êi trong ®ã gåm hÊp thô. Ph¶n øng t¹o vßng Formazan lµ kü 1819 ng−êi Kinh Hµ Néi vµ c¸c vïng l©n cËn thuËt lÇn ®Çu tiªn ®−îc sö dông t¹i ViÖt Nam. (bÖnh nh©n ®Õn kh¸m t¹i ViÖn qu©n y 108), Nã ®−îc nhiÒu nhµ khoa häc ë nhiÒu n−íc trªn 250 ng−êi M−êng Hoµ B×nh, 720 ng−êi Racley thÕ giíi ®¸nh gi¸ cao bëi tÝnh ®¬n gi¶n, rÎ tiÒn, vµ 82 ng−êi Tµy ë Kh¸nh Hoµ, chóng t«i ph¸t dÔ thùc hiÖn thÝch hîp cho sµng läc trong céng hiÖn ®−îc 119 ng−êi bÞ thiÕu hôt G6PD, tû lÖ ®ång, kh«ng ®ßi hái trang thiÕt bÞ g× nhiÒu chung trong quÇn thÓ lµ 4,14%. T¸ch riªng tõng d©n téc, chóng t«i thÊy tû lÖ thiÕu hôt 102
TCNCYH 23 (3) 2003 G6PD cña ng−êi M−êng Hoµ B×nh lµ cao nhÊt nhau. Viangchan ®ét biÕn ë exon 9, nucleotid ë 26% tiÕp ®ã lµ Tµy 17,07% råi Racley Kh¸nh vÞ trÝ 871 G A lµm thay ®æi acid amin trªn Hoµ 2,92% vµ thÊp nhÊt lµ ng−êi Kinh quanh enzym ë vÞ trÝ 291 Val Met vµ Silent, ®ét Hµ Néi 1,04% (B¶ng 1) nh− thÕ tÇn suÊt thiÕu biÕn ë exon 11, vÞ trÝ 1311 C T. HiÖn t−îng hôt G6PD cã sù kh¸c nhau gi÷a c¸c d©n téc, nµy còng t−¬ng tù nh− tr−êng hîp ®ét biÕn còng gièng nh− nhËn xÐt cña nhiÒu t¸c gi¶ kh¸c d¹ng Chatham cña mét ng−êi Kinh ®ã lµ [2,3,4]. Trong sè 119 tr−êng hîp thiÕu hôt Chatham vµ Silent, còng cã hai vÞ trÝ ®ét biÕn. G6PD cña c¶ 4 d©n téc chóng t«i ®· tiÕn hµnh Song nh− ®· nãi ë trªn d¹ng Silent kh«ng lµm ph©n tÝch gen 32 tr−êng hîp cïng víi 5 tr−êng thay ®æi thø tù acid amin trong cÊu tróc enzym hîp ng−êi b×nh th−êng. B¶ng 3 lµ kÕt qu¶ thu do vËy mµ kh«ng lµm trÇm träng thªm møc ®é ®−îc cña ph©n tÝch gen 30 tr−êng hîp bÖnh lý, thiÕu hôt ho¹t tÝnh enzym. trong ®ã cã 6 Kinh, 18 M−êng, 2 Racley vµ 4 Khai th¸c thªm tõ 18 tr−êng hîp bÖnh lý ë Tµy. KÕt qu¶ ph©n tÝch gen cho thÊy tÊt c¶ cã 7 nhãm ng−êi M−êng ®−îc ph©n tÝch gen, chóng d¹ng ®ét biÕn kh¸c nhau [B¶ng 2]. Chóng t«i t«i gÆp hai gia ®×nh, trong ®ã c¶ vî vµ chång kh«ng ph¸t hiÖn ®−îc d¹ng nµo míi ch−a ®−îc ®Òu mang gen bÖnh. RÊt tiÕc chóng t«i kh«ng nãi tíi trong tæng sè 100 d¹ng ®· ®−îc c«ng bè lÊy ®−îc m¸u cña nh÷ng ng−êi con ®Ó ph©n [9]. Trong 7 d¹ng ®ét biÕn ®· t×m thÊy [b¶ng 2] tÝch gen. Mét gia ®×nh kh¸c, bè b×nh th−êng mÑ th× cã 1 d¹ng ®ét biÕn gen nh−ng kh«ng ¶nh vµ con trai cïng mang gen bÖnh d¹ng Canton. h−ëng ®Õn sù m· ho¸ acid amin trong cÊu tróc Nh− thÕ, trong tr−êng hîp nµy ng−êi con trai ®· G6PD, ®ã lµ d¹ng Silent. VÞ trÝ biÕn ®æi lµ nhËn gen X mang bÖnh tõ mÑ. V× nam giíi chØ nucleotid sè 1311 ë exon 11 (C T), ®iÓm ®ét cã 1 NST X nªn nÕu bÞ bÖnh th−êng lµ nÆng. biÕn nµy n»m trong vÞ trÝ cuèi ë codon cña Cô thÓ ch¸u bÐ nµy, ho¹t tÝnh enzym ®o ®−îc Tyrosine (TAC TAT) nªn kh«ng lµm biÕn chØ cã 9,0 mU/109hång cÇu, trong khi cña mÑ ®æi thø tù acid amin. 6 d¹ng biÕn ®æi kh¸c ®Òu lµ 39,4 mU/106 hång cÇu [b×nh th−êng lµ 131 ± lµ nh÷ng d¹ng hay gÆp ë c¸c d©n téc ch©u ¸ 13 mU/109hång cÇu]. nh− NhËt, Trung Quèc, Ên ®é, Lµo, Philippin …[3]. Vµ cïng ®Òu lµ ®ét biÕn ®iÓm, kh«ng cã Mét ®Æc biÖt kh¸c trong nhãm ng−êi tr−êng hîp nµo mÊt 1 hoÆc vµi nucleotid. M−êng, mét tr−êng hîp n÷ bÞ bÖnh d¹ng Union nh−ng cã ho¹t tÝnh enzym rÊt thÊp 5,0 B¶ng 3 cho thÊy c¸c d¹ng ®ét biÕn gÆp ë mU/109HC, chóng t«i ®· ®äc tr×nh tù gen. KÕt tõng d©n téc Kinh, M−êng, Racley vµ Tµy. qu¶ ®óng nh− dù ®o¸n, tr−êng hîp nµy mang NhËn xÐt vÒ d¹ng ®ét biÕn gÆp ë c¸c d©n téc gen bÖnh ®ång hîp tö. §iÒu nµy cã nghÜa ng−êi nµy chóng t«i thÊy, nhãm ng−êi M−êng sè con ®· nhËn hai gen bÖnh cña c¶ bè vµ mÑ, mét tr−êng hîp ®−îc ph©n tÝch nhiÒu nhÊt [18 hiÖn t−îng rÊt hiÕm gÆp trong y v¨n [10]. Còng tr−êng hîp] nh−ng kh«ng tr−êng hîp nµo cã trong nhãm nµy cã hai tr−êng hîp ho¹t tÝnh d¹ng Chatham vµ Kaiping nh− cña ng−êi Kinh, enzym rÊt thÊp nh−ng chóng t«i ch−a t×m ra ng−îc l¹i M−êng lµ nhãm duy nhÊt gÆp d¹ng ®−îc ®iÓm ®ét biÕn nµo trong c¶ 12 exon. Union vµ Chinese-5. Riªng d¹ng Union gÆp ®Õn 8/18 tr−êng hîp. D¹ng Canton vµ Víi nh÷ng kÕt qu¶ thu ®−îc chóng t«i cã Viangchan c¶ 4 nhãm ®Òu cã. Song cã ®iÓm nhËn xÐt, tû lÖ mang gen bÖnh nµy ë ng−êi ViÖt ®Æc biÖt lµ 7 tr−êng hîp ®ét biÕn d¹ng Nam kh«ng thÊp vµ cã sù kh¸c nhau gi÷a c¸c Viangchan th× cã tíi 5/7 tr−êng hîp cã kÌm víi d©n téc vµ ®Þa ph−¬ng. Tû lÖ thiÕu hôt G6PD ®ét biÕn d¹ng Silent. Nh− thÕ lµ ë nh÷ng cña ng−êi M−êng Hoµ B×nh lµ cao h¬n h¼n, tr−êng hîp nµy cã 2 ®ét biÕn cña 2 d¹ng kh¸c ph¶i ch¨ng lµ do kh¸c biÖt HLA hoÆc mét t×nh tr¹ng Ýt giao l−u, kÕt h«n gÇn dßng hä, vÒ vÊn 103
TCNCYH 23 (3) 2003 ®Ò nµy trong mét nghiªn cøu kh¸c t×m hiÓu enzyme activity of glucose-6-phosphate HLA vµ thiÕu G6PD gi÷a ng−êi M−êng vµ dehydrogenase and the membrane lipid Kinh chóng t«i nhËn thÊy nhãm ng−êi M−êng peoxidation of human and experimental cã tíi 8/18 tr−êng hîp thiÕu G6PD d¹ng Union, animals ethrocytes: Revue Pharmacentique – trong ®ã 7/8 tr−êng hîp HLA líp II lµ numerol. 1998: p37 – 44. DQB1*0502 trong khi alen nµy kh«ng cã ë ng−êi Kinh vµ ng−êi Kinh còng ch−a t×m thÊy 2. §oµn H¹nh Nh©n vµ céng sù : §iÒu tra thiÕu G6PD d¹ng Union. §©y lµ vÊn ®Ò rÊt cã ý thiÕu men G6PD hång cÇu ë mét sè d©n téc nghÜa khoa häc, chóng t«i sÏ tiÕp tôc t×m hiÓu. sèng trong vïng sèt rÐt l−u hµnh t¹i miÒn B¾c Nh− thÕ trong ph¹m vi nghiªn cøu nµy víi ViÖt Nam. 1991 – 1996. Kû yÕu c«ng tr×nh nh÷ng kÕt qu¶ ph©n tÝch gen tuy ch−a nhiÒu nghiªn cøu khoa häc ViÖn Sèt rÐt - Ký sinh nh−ng víi nh÷ng g× cã ®−îc, Ýt nhiÒu còng cho trïng vµ C«n trïng , TËp 1: 203 – 209. chóng ta c¸i nh×n nµo ®ã vÒ sù ph©n bè vµ ®Æc 3. Beutler E: G6PD deficiency blood. 1994, ®iÓm c¸c d¹ng ®ét biÕn gen g©y thiÕu hôt 84 (11): 3613 – 3636. G6PD gÆp ë c¸c d©n téc Kinh, M−êng, Racley vµ Tµy ë c¸c ®Þa ®iÓm nghiªn cøu cña ViÖt 4. Iwai K; Hiromo A et al: Distribution of Nam. glucose-6-phosphate dehydrogenase mutations in Southeast Asia. Human Genet. 2001, 108: V. KÕt luËn 445 449. 1. §· ph¸t hiÖn ®−îc 119 tr−êng hîp thiÕu 5. Percico MG, et al.: Isolation of human hôt G6PD trong tæng sè 2871 ng−êi thuéc c¸c glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PD) d©n téc Kinh, M−êng, Racley vµ Tµy ë Hµ Néi cDNA clones. Primary structure of the protein vµ quanh Hµ Néi, ë c¸c tØnh Hoµ B×nh, Kh¸nh and unsual 5’ non-coding region. 1986, Hoµ. Nucleic acids Res 14: 2511. 2. B»ng kü thuËt PCR vµ MPTP vµ ph©n tÝch tr×nh tù gen ®· ph¸t hiÖn ®−îc 7 d¹ng ®ét biÕn 6. Pujades A; Le Lewis M, et al.: Evaluation of the blu formazan spot test for ®iÓm kh¸c nhau g©y thiÕu hôt G6PD tõ 30 screening glucose-6-phosphate dehydrogenase tr−êng hîp bÖnh lý ®−îc ph©n tÝch. deficiency: International Journal of 3. Nhãm ng−êi M−êng cã tû lÖ thiÕu hôt Hematology. 1999: 234 – 236. G6PD rÊt cao [26%], d¹ng ®ét biÕn hay gÆp ®ã lµ Union [8/18 tr−êng hîp]. Cã hai gia ®×nh 7. Shirakawa T; Nishiyama K, et al.: A trong ®ã bè vµ mÑ ®Òu mang gen bÖnh, mét gia complehensive method to scan for point ®×nh, mÑ vµ con trai cïng bÞ bÖnh d¹ng Canton. mutation of the glucose-6- phosphatedehydrogenase gene. 1997, Japan J. Lêi c¸m ¬n: Human Genet 42: 417 – 423. Chóng t«i xin ch©n thµnh c¶m ¬n GS. TS 8. Takizawa T, et al.: Human glucose-6- NguyÔn Thu Nh¹n, TS. NguyÔn ThÞ Hoµn ViÖn phosphate dehydrogenase: Primary structure Nhi khoa Trung −¬ng ®· gióp ®ì trong viÖc tæ and cDNA cloning. 1986; Proc. Natl. Acad. chøc lÊy m¸u trÎ s¬ sinh ë Hµ Néi. Sci. USA. 83: 4157. Tµi liÖu tham kh¶o 9. Vulliamy T, Luzzatto L, et al.: 1. NguyÔn H÷u ChÊn, NguyÔn ThÞ Hµ, Phan Hematologically important mutations: glucose- ThÞ Lý: Effects of oxidizing agent on the 6-phosphate dehydrogenase. 1997, Blood cell Mol Dis 23: 302 – 13. 104
TCNCYH 23 (3) 2003 10. Vulliamy T, et al.: Independent origin glucose-6-phosphate dehydrogenase gene. of single and double mutations in the human 1996, Human mutation 8: 311 – 318. Summary Detecting G6PD deficiency and analyzing variants of DNA mutation of some individuals with G6PD deficiency from Kinh, Muong, Racley, Tay ethnic groups living Hanoi, Hoabinh and Khanhhoa provinces G6PD deficiency is one of the most frequent hereditary enzymopathy in human, affecting more than 400 millions people worldwide. Over 100 mutations, most of which are single nucleotide substitution have been reported. Up to now investigation on the variants of mutation of Vietnamese have just been carried out. In this study, 119 G6PD deficient individuals of 2871 people belong to Kinh, Muong, Racley and Tay ethnic groups living around Hanoi, and Hoabinh, Khanhhoa provinces were dectected. 37 DNA samples of the G6PD deficient individuals [32 cases] and normal people [5 cases] have been analysed. 7 mutation variants of 30 G6PD deficient individuals have been identified, including Viangchan, Chatham, Chinese-5, Union, Canton, Kaiping and Silent. The G6PD Union and Chinese-5 were only found in the Muong ethnic, in which G6PD Union was the most predominant mutation of this ethnic [8/18 cases]. In addition, there were three Muong-families, two of which G6PD mutations in both the father and the mother were found. In the family left, we identified Canton mutation in both the mother and the son. 105