Tác dụng chống oxy hóa, hạ acid uric máu và lợi tiểu của cao chiết diệp hạ châu - râu mèo trên thực nghiệm

Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 17 * Phụ bản của Số 1 * 2013<br /> <br /> Nghiên cứu Y học<br /> <br /> TÁC DỤNG CHỐNG OXY HÓA, HẠ ACID URIC MÁU VÀ LỢI TIỂU<br /> CỦA CAO CHIẾT DIỆP HẠ CHÂU – RÂU MÈO TRÊN THỰC NGHIỆM<br /> Đỗ Thị Quỳnh Nga*, Nguyễn Phương Dung*<br /> <br /> TÓM TẮT<br /> Mục tiêu nghiên cứu: Cho tới nay, đã có một số công trình nghiên cứu chứng minh tác dụng hạ acid uric<br /> máu (do ức chế xanthine oxidase) và lợi tiểu của Diệp hạ châu đắng (Phyllanthus amarus Schum et Thonn), cũng<br /> như tác dụng tăng thải acid uric qua nước tiểu và chống oxy hóa của Râu mèo (Orthosiphon stamineus Benth.).<br /> Xanthin oxydase là một chất oxy hóa xúc tác trong quá trình tạo ra acid uric máu. Đề tài này được thực hiện với<br /> mục đích tìm hiểu tác dụng chống oxy hóa, ức chế xanthine oxydase của cao chiết từ Diệp hạ châu và Râu mèo<br /> trên chuột nhắt trắng.<br /> Đối tượng – Phương pháp nghiên cứu: Cao đặc Diệp hạ châu đắng do Trung tâm dược liệu Miền trung<br /> sản xuất. Cao khô Râu mèo do công ty dược phẩm BV Pharma cung cấp. Nghiên cứu in vitro: Khảo sát hoạt tính<br /> ức chế xanthin oxidase (XO) của cao Diệp hạ châu, cao Râu mèo và cao phối hợp Diệp hạ châu – Râu mèo với các<br /> tỷ lệ phối hợp khác nhau. Xác định khả năng ức chế peroxy hóa lipid của mẫu nghiên cứu qua việc xác định hàm<br /> lượng malonyl diadehyd (MDA). Nghiên cứu in vivo: Tác dụng hạ acid uric máu: Các cao thử được cho uống<br /> dự phòng 5 ngày trước khi gây mô hình gây tăng acid uric cấp trên chuột nhắt trắng bằng kali oxonat (tiêm phúc<br /> mô 300 mg/kg). Ở mô hình gây tăng acid uric mạn bằng cách tiêm cách nhật liều kali oxonat giảm dần (từ 300<br /> mg/kg xuống 150 mg/kg), các cao thử được cho uống liên tục trong 14 ngày. Dùng Allopurinol 300mg làm đối<br /> chiếu dương. Tác dụng lợi tiểu: Cho chuột uống 1 liều duy nhất các cao thử sau khi nhịn đói và không được uống<br /> nước trong vòng 18 giờ trước đó. Dùng Furosemide 40mg làm đối chiếu dương.<br /> Kết quả: Cao chiết phối hợp Diệp hạ châu – Râu mèo ở tỷ lệ phối hợp 4:1 có hoạt tính ức chế XO với IC50 là<br /> 43,83µg/ml. Tỷ lệ phối hợp 1 phần cao đặc Diệp hạ châu và 1 phần cao khô Râu mèo cho hiệu quả chống oxy hóa<br /> tối ưu nhất, ở nồng độ 50µg/ml là 66,79% tương đương với hoạt tính của Trolox ở nồng độ 5mM (63,49%). Cao<br /> chiết phối hợp Diệp hạ châu – Râu mèo liều [100mg DHC + 25mg RM]/kg vừa có tác dụng lợi tiểu vừa thể hiện<br /> khả năng hạ acid uric máu cả khi sử dụng với mục đích dự phòng và khi điều trị tăng acid uric kéo dài tương tự<br /> như Allopurinol.<br /> Kết luận: Cao chiết phối hợp Diệp hạ châu – Râu mèo có hoạt tính ức chế XO, hạ acid uric máu, có tác dụng<br /> chống oxy hóa và lợi tiểu trên thực nghiệm. Kết quả này làm cơ sở cho các nghiên cứu ứng dụng cao chiết phối<br /> hợp này trong điều trị tăng acid uric máu và các rối loạn khác do chất oxy hóa gây ra.<br /> Từ khóa: Diệp hạ châu đắng, Râu mèo, ức chế xanthine oxidase, chất oxy hóa, tác dụng chống oxy hóa.<br /> <br /> ABSTRACT<br /> THE ANTIOXIDATIVE EFFECT OF PHYLLANTHUS AMARUS – ORTHOSIPHON STAMINEUS<br /> EXTRACT IN VITRO<br /> Do Thi Quynh Nga, Nguyen Phuong Dung<br /> * Y Hoc TP. Ho Chi Minh * Vol. 18 - Supplement of No 1 – 2014: 227 - 234<br /> Objectives: There have been researches proven the hypouricemic and diuretic effect of Phyllanthus amarus,<br /> the diuretic effect and uric excretion of Orthosiphon stamineus. Xanthine oxidase is an oxidant that catalyses in<br /> * Khoa Y học cổ truyền, Đại học Y Dược TP. Hồ Chí Minh<br /> Tác giả liên lạc: ThS. Đỗ Thị Quỳnh Nga<br /> ĐT: 0984128211<br /> <br /> Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền<br /> <br /> Email: dtquynhngath@hotmail.com.vn<br /> <br /> 227<br /> <br /> Nghiên cứu Y học<br /> <br /> Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 17 * Phụ bản của Số 1 * 2013<br /> <br /> uric acid producing process. Our study is done with the aim of surveying antioxidative effect of coordinated<br /> extract from Phyllanthus amarus and Orthosiphon stemineus in vitro.<br /> Methods: Aqueous extract of Phyllanthus amarus was produced by The Central of Research and<br /> Manufacture Mien Trung. Dry extract of Orthosiphon stamineuswas provided by BV Pharma Company. In vitro<br /> study: Surveying the xanthine oxidase (XO) inhibitory activity of extract from Phyl, extract from Orth and<br /> coordinated extract from Phyl and Orth. Surveying the inhibition of lipid peroxidation through measuring<br /> malonyl diadehyde (MDA) content. In vivo study: - Hyperuricemic reductive activity: Mice had been<br /> administered with coordinated herbal extract for 5 days before making acute model. The acute model of<br /> hyperuricemia was created by abdominal injection with potassium oxonate in mice (dose: 300mg/kg). In the<br /> chronic model, which was created by abdominal injection every other day with potassium oxonate in cutting down<br /> doses (from 300mg/kg to 150mg/kg), mice were administered continuously for 14 days with herbal extracts.<br /> Allopurinol was used as a positive reference. - Diuretic effect: Mice had not been served any food or water for 18<br /> hours before administering the only 1 dose of each herbal extracts. Furosemide was used as a positive reference.<br /> Results: The in vitro study confirmed that coordinated extract in 4:1 ratio has XO inhibitory activity with<br /> IC50at 43.83 µg/ml. In vitro studies showed that coordinated extract at dose of (100mg Phyl + 25mg Orth)/kg has<br /> diuretic effect as well as hypouricemic activity in both purpose of prevention and treatment. These effects are as<br /> similar as those by furosemide and allopurinol. The in vitro study confirmed that coordinated extract in 4:1 ratio<br /> has XO inhibitory activity with IC50 at 43.83 µg/ml. Coordinated extract in 1:1 ratio has optimal inhibitory effect,<br /> at 50µg/ml concentrationise quivalent to 66.79% of Troloxactivityat a concentration 5mM (63.49%).<br /> Conclusion: The coordinated extract of Phyllanthus amarus and Orthosiphon stamineus has XO inhibitory<br /> activity, antioxidative effect invitro. These results will be the basis for researches and applications in the treatment<br /> of hyperuricemia and other disorders caused by oxidants.<br /> Keywords: Phyllanthus amarus Schum et Thonn, Orthosiphon stamineusBenth., xanthine oxidase<br /> inhibitory activity, oxidant, antioxidative effect.<br /> 47,2% ở các dân số khác nhau và có xu hướng<br /> ĐẶT VẤN ĐỀ<br /> ngày càng gia tăng. Trong đó, trên 90% là tăng<br /> Gốc tự do là sản phẩm của quá trình oxy<br /> acid uric máu đơn thuần không có triệu chứng<br /> hóa các chất trong cơ thể. Tuổi càng cao thêm<br /> lâm sàng. Trước đây, khi nói tới tăng acid uric<br /> vào đó là thói quen lạm dụng độc chất (thuốc<br /> máu thường người ta chỉ nghĩ tới bệnh Gout, tuy<br /> lá, cà phê, dược phẩm...), dinh dưỡng sai lầm<br /> nhiên hiện nay đã có nhiều công trình nghiên<br /> làm cho lượng gốc tự do trong cơ thể càng<br /> cứu bệnh lý quan trọng khác như: tăng huyết áp,<br /> tăng lên nhiều.<br /> bệnh mạch máu não, bệnh lý chuyển hóa, bệnh<br /> Khi có sự tăng quá nhiều gốc tự do sẽ gây ra<br /> thận, tiền sản giật<br /> tình trạng viêm nhiễm ở các cơ quan, các bệnh lý<br /> Diệp hạ châu và Râu mèo là hai cây thuốc<br /> như tim mạch, bệnh thần kinh, đục thuỷ tinh<br /> nam đã được chứng minh là có tác dụng chống<br /> thể, thoái hóa hoàng điểm ở mắt, tăng nguy cơ<br /> oxy hoá rất cao và có khả năng ức chế Xanthin<br /> các bệnh ung thư và nhất là sớm xuất hiện hiện<br /> oxydase độc lập. Đề tài này được thực hiện với<br /> tượng lão hoá.<br /> mục đích tìm hiểu tác dụng chống oxy hóa, ức<br /> Một trong những gốc tự do thường gặp là<br /> Xanthin oxydase – một gốc tự do chịu trách<br /> nhiệm một khâu trong quá trình tạo ra acid uric<br /> máu. Mà tăng acid uric máu là một dạng rối loạn<br /> chuyển hóa thường gặp, chiếm tỉ lệ từ 2,6 –<br /> <br /> 228<br /> <br /> chế xanthine oxydase của cao chiết từ Diệp hạ<br /> châu và Râu mèo để làm cơ sở cho những<br /> nghiên cứu chế phẩm tiếp theo.<br /> <br /> Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền<br /> <br /> Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 17 * Phụ bản của Số 1 * 2013<br /> <br /> Nghiên cứu Y học<br /> <br /> ĐỐI TƯỢNG-PHƯƠNGPHÁP NGHIÊNCỨU<br /> <br /> đo được sẽ giảm.<br /> <br /> Đối tượng nghiên cứu<br /> <br /> Quy trình thử hoạt tính ức chế xanthine<br /> oxidasetheo bảng sau:<br /> <br /> Cao đặc Diệp hạ châu được chiết xuất từ lá<br /> cây Diệp hạ châu đắng (Phyllanthus amarus<br /> Schum.<br /> et<br /> Thonn.),<br /> họ<br /> Thầu<br /> dầu<br /> (Euphorbiaceae), trồng theo tiêu chuẩn VietGAP.<br /> Cao được chiết bằng thiết bị chiết đa năng tại<br /> Trung tâm dược liệu Miền trung.<br /> Cao khô Râu mèo được chiết xuất từ cây Râu<br /> mèo (Orthosiphon aristatus (Blume.) Miq.), họ<br /> Hoa môi (Lamiaceae), do công ty dược phẩm BV<br /> Pharma cung cấp.<br /> <br /> Động vật nghiên cứu<br /> Chuột nhắt trắng đực chủng Swiss albino,<br /> khỏe mạnh, 5 – 6 tuần tuổi, trọng lượng 20 ± 2<br /> g, được cung cấp bởi Viện Pasteur TP. HCM<br /> và được để ổn định ít nhất một tuần trước khi<br /> thử nghiệm.<br /> <br /> Thuốc thử nghiệm<br /> Thuốc đối chiếu: Allopurinol 300 mg (công<br /> ty Domesco, Việt Nam, số đăng ký VNB-4166-05,<br /> số lô 010111, hạn sử dụng 170114). Viên nén<br /> Furosemide 40mg (công ty Mekophar, Việt Nam,<br /> hạn dùng 20/06/14).<br /> <br /> Mẫu trắng được tiến hành tương tự nhưng<br /> thay enzym và mẫu thử bằng đệm.Mẫu chứng<br /> có dịch enzym nhưng không có mẫu thử mà<br /> thay bằng đệm. Đo mật độ quang ở bước sóng<br /> 290 nm liên tục mỗi 3 phút trong 30 phút tính từ<br /> lúc cho xanthine vào cuvet.<br /> Khả năng chống oxy hóa được tính dựa trên<br /> phần trăm ức chế (%I) xác định theo công thức:<br /> I% = (1 – Ac/As) x 100<br /> <br /> Hoá chất: xanthine (Sigma, USA); xanthine<br /> oxidase (Sigma); oxonat kali (Sigma Aldrich,<br /> USA); kit định lượng acid uric (uric acid<br /> liquicolor, Human ltd.Co., Đức); nước cất, NaCl<br /> 0,9%, EDTA; đệm phosphat 50 mM, pH = 7,5; đệm<br /> EDTA phosphat 50 mM, pH = 7,5.<br /> <br /> Với: Ac là giá trịmật độ quang của dung dịch<br /> không có mẫu thử (control). As là giá trị mật độ<br /> quang của dung dịch có chứa mẫu thử (sample).<br /> <br /> Phương pháp nghiên cứu(4)<br /> <br /> ức chế (%I). Lấy trung bình 3 giá trị %I từ đó<br /> <br /> Phương pháp nghiên cứu in vitro xác định hoạt<br /> tính ức chế xanthine oxidase.<br /> Xanthin oxidase (XO) có tác dụng xúc tác<br /> phản ứng oxy hóa xanthin thành uric acid, đồng<br /> thời hình thành gốc tự do. Ta sử dụng phương<br /> pháp trắc quang để khảo sát khả năng ức chế<br /> enzym XO của các mẫu thử thông qua mật độ<br /> quang của sản phẩm acid uric hình thành. Acid<br /> uric có bước sóng hấp thu cực đại tại 290nm.<br /> Chất có khả năng ức chế XO càng cao càng ức<br /> chế sự hình thành uric acid, do đó mật độ quang<br /> <br /> Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền<br /> <br /> Mỗi nồng độ được tiến hành 3 lần, ứng với<br /> mỗi nồng độ ta tính được 3 giá trị phần trăm<br /> ta sẽ xác định được giá trị phần trăm ức chế<br /> ứng với từng nồng độ khảo sát. Mỗi mẫu thử<br /> được pha thành bốn nồng độ khác nhau: 100;<br /> 50; 25; 10µM. Nếu hoạt tính của mẫu thử ức<br /> chế trên 50% ở 10µM thì sẽ được thử tiếp ở các<br /> nồng độ nhỏ hơn 5; 2; 1; 0,5; 0,2µM để tìm ra<br /> giá trị IC50. Giá trị IC50 µg/ml (nồng độ có khả<br /> năng ức chế 50%) của mẫu được tính dựa trên<br /> đồ thị hồi quy tương quan giữa nồng độ (Cpư)<br /> và khả năng ức chế (I%).<br /> <br /> 229<br /> <br /> Nghiên cứu Y học<br /> <br /> Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 17 * Phụ bản của Số 1 * 2013<br /> <br /> Khả năng ức chế peroxy hóa lipid(1,1).<br /> Xác định khả năng ức chế peroxy hóa lipid<br /> của mẫu nghiên cứu qua việc xác định hàm<br /> lượng MDA, là sản phẩm của quá trình peroxy<br /> hóa lipid màng tế bào. MDA có khả năng phản<br /> ứng với acid thiobarbituric để tạo thành phức<br /> hợp trimethin có đỉnh hấp thu cực đại ở λ =<br /> 532 nm.<br /> 0,1ml mẫu thử ở các nồng độ thử nghiệm<br /> được cho phản ứng với 0,5 ml dịch đồng thể não<br /> và đệm phosphate 50 mM vừa đủ 2 ml. Ủ hỗn<br /> hợp phản ứng ở 370C trong 15 phút và dừng<br /> phản ứng bằng 1 ml acid tricloacetic 10%. Sau<br /> khi ly tâm lấy dịch trong cho phản ứng với 1 ml<br /> acid thiobarbituric 0,8% trong 15 phút ở nhiệt độ<br /> 1000C, làm lạnh và tiến hành đo quang ở bước<br /> sóng λ = 532 nm.<br /> Trolox (Calbiochem Ltd. Co.), đồng phân của<br /> vitamin E được dùng làm chất đối chiếu.<br /> Công thức tính phần trăm (%) hoạt tính<br /> chống oxy hóa (HTCO):<br /> <br /> (ODC − ODT )<br /> ×100<br /> OD<br /> C<br /> HTCO (%) =<br /> ODC: Mật độ quang mẫu đối chứng<br /> (DMSO).<br /> ODT: Mật độ quang mẫu thử.<br /> Các số liệu kết quả thử nghiệm được biểu thị<br /> bằng trị số trung bình của 2 lần đo khác nhau.<br /> Cách tính IC50 : Vẽ đồ thị biểu diễn tỷ lệ %<br /> khả năng dập tắt gốc tự do của chất cần thử<br /> nghiệm bằng phần mềm Excel. Từ đồ thị, nội<br /> suy ra giá trị nồng độ dập tắt gốc tự do IC50 bằng<br /> cách tính phương trình hồi quy tuyến tính có<br /> dạng y = ax + b và thế y = 50 để suy ra IC50.<br /> <br /> Phương pháp nghiên cứu tác dụng hạ acid uric<br /> thực nghiệm(3,5).<br /> Nghiên cứu tác dụng hạ acid uric dự phòng trên mô<br /> hình tăng acid uric cấp.<br /> Chuột nhắt trắng được chia ngẫu nhiên<br /> thành 8 lô, mỗi lô 6 con. Cho chuột uống nước<br /> <br /> 230<br /> <br /> cất hoặc thuốc nghiên cứu với thể tích 0,1<br /> ml/10g chuột.<br /> -Lô chứng trắng (lô BT): uống nước cất.<br /> -Lô chứng bệnh lý (lô MH): uống nước cất.<br /> -Lô đối chiếu (Lô A): uống Allopurinol 10<br /> mg/kg thể trọng.<br /> -Lô DHC: uống cao chiết Diệp hạ châu 200<br /> mg/kg thể trọng.<br /> -Lô RM: uống cao chiết Râu mèo 200 mg/kg<br /> thể trọng.<br /> -Lô 4DHC:1RM(1): uống cao chiết phối hợp<br /> DHC (100 mg/kg) và Râu mèo (25 mg/kg).<br /> -Lô 4DHC:1RM(2): uống cao chiết phối hợp<br /> DHC (200 mg/kg) và Râu mèo (50 mg/kg).<br /> -Lô 4DHC:1RM(4): uống cao chiết phối hợp<br /> DHC (400 mg/kg) và Râu mèo (100 mg/kg).<br /> Áp dụng mô hình gây tăng cấp acid uric<br /> bằng kali oxonat, chuột được uống nước cất hoặc<br /> thuốc thử nghiệm vào một giờ nhất định trong<br /> vòng 5 ngày trước khi làm thử nghiệm. Trước<br /> khi dùng nước cất hoặc thuốc thử nghiệm 1,5<br /> giờ, chuột không được ăn nhưng được uống<br /> nước bình thường. Ngày thứ 5, chuột ở lô chứng<br /> trắng được tiêm màng bụng với nước cất<br /> 0,1ml/10g thể trọng, các lô còn lại được tiêm kali<br /> oxonat 0,1ml/10g với liều 300 mg/kg thể trọng<br /> một giờ trước khi uống thuốc lần cuối. Sau khi<br /> uống thuốc 1 giờ, lấy máu đuôi chuột để định<br /> lượng nồng độ acid uric huyết thanh.<br /> Nghiên cứu tác dụng hạ acid uric trên mô hình tăng<br /> acid uric kéo dài 14 ngày.<br /> Chuột được chia thành 6 lô (mỗi lô 6 – 8 con).<br /> Cho chuột uống nước cất hoặc thuốc nghiên cứu<br /> với thể tích 0,2 ml/10g chuột, tối đa là 0,5 ml cho<br /> mỗi chuột.<br /> -Lô chứng trắng (lô BT): uống nước cất.<br /> -Lô chứng bệnh lý (lô MH): uống nước cất.<br /> -Lô A (đối chiếu): uống Allopurinol 10<br /> mg/kg thể trọng.<br /> -Lô DHC: uống cao chiết Diệp hạ châu 200<br /> mg/kg thể trọng.<br /> <br /> Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền<br /> <br /> Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 17 * Phụ bản của Số 1 * 2013<br /> <br /> Nghiên cứu Y học<br /> <br /> -Lô RM: uống cao Râu mèo 200 mg/kg thể<br /> trọng.<br /> -Lô 4DHC:1RM(1): uống cao chiết phối hợp<br /> DHC (100 mg/kg) và Râu mèo (25 mg/kg).<br /> -Lô A được cho uống Allopurinol 10<br /> mg/kg vào ngày thứ 7 và liên tục trong những<br /> ngày sau đó.<br /> <br /> DHC (100 mg/kg) và Râu mèo (25 mg/kg)<br /> -Lô F: uống Furosemid 40mg/kg liều<br /> 10mg/kg thể trọng<br /> <br /> Các lô còn lại được uống nước cất hoặc thuốc<br /> thử nghiệm vào một giờ nhất định trong ngày<br /> liên tục trong 14 ngày.<br /> <br /> Phương pháp xử lý số liệu thống kê thực<br /> nghiệm<br /> Dùng phần mềm Stata 10.0 để tính các giá trị<br /> thống kê mô tả: số trung bình, độ lệch chuẩn<br /> <br /> Lô BT được tiêm phúc mô nước cất 0,1ml/10g<br /> chuột, còn tất cả các lô còn lại được tiêm phúc<br /> mô kali oxonat cách ngày, bắt đầu từ liều 300<br /> mg/kg (ngày 1), giảm dần xuống 250 mg/kg<br /> (ngày 3), 200 mg/kg (ngày 5) và duy trì ở liều 150<br /> mg/kg (ngày 7, 9, 11, 13).<br /> Lấy máu đuôi chuột ở các thời điểm ngày 7<br /> và 14 để định lượng acid uric trong huyết thanh.<br /> <br /> Nghiên cứu tác dụng lợi tiểu(6).<br /> Trước khi làm thử ngiệm, không cho chuột<br /> ăn và uống nước trong vòng 18 giờ. Sau đó,<br /> chuột nhắt trắng được chia ngẫu nhiên thành 5<br /> lô, mỗi lô 6 con. Cho chuột uống nước cất hoặc<br /> thuốc nghiên cứu với thể tích 0,2 ml/10g chuột.<br /> -Lô BT: uống nước cất<br /> -Lô DHC: uống cao đặc Diệp hạ châu<br /> 200mg/kg thể trọng<br /> -Lô RM: uống cao khô Râu mèo liều<br /> 200mg/kg thể trọng<br /> -Lô 4DHC:1RM: uống cao chiết phối hợp<br /> Bảng 1: Kết quả thử hoạt tính ức chế xanthin oxidase.<br /> Tên mẫu<br /> <br /> 1<br /> 2<br /> 3<br /> 4<br /> <br /> 4DHC:1RM<br /> 3DHC:1RM<br /> 2DHC:1RM<br /> DHC<br /> <br /> 100 (µg/mL)<br /> 71,0 ± 1,5<br /> 61,2 ± 2,9<br /> 63,3 ± 1,8<br /> 69,05 ± 0,80<br /> <br /> 5<br /> <br /> RM<br /> <br /> 57,2 ± 2,2<br /> <br /> 30,7 ± 1,3<br /> <br /> 43,80 ± 0,97<br /> 40,97 ± 1,8<br /> 32,8 ± 1,5<br /> 32,0 ± 2,2<br /> 30,38 ± 0,39<br /> 30,09 ± 0,61<br /> <br /> 35,04 ± 0,81<br /> 20,95 ± 0,82<br /> 15,3 ± 2,0<br /> 24,2 ± 2,5<br /> 18,7 ± 2,1<br /> 17,1 ± 2,7<br /> <br /> 1DHC:2RM<br /> 1DHC:3RM<br /> 3DHC:2RM<br /> 2DHC:5RM<br /> 1DHC:4RM<br /> 1DHC:1RM<br /> Allopurinol<br /> <br /> Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền<br /> <br /> Ứng dụng phép kiểm t – Student độc lập để<br /> so sánh 2 số trung bình của 2 lô khác nhau trong<br /> cùng một thời điểm.<br /> Ứng dụng phép kiểm Anova 1 yếu tố để<br /> đánh giá sự khác biệt về trị số acid uric của các lô<br /> thử nghiệm trong cùng một thời điểm.<br /> <br /> KẾT QUẢ<br /> Tác dụng ức chế Xanthin oxidase của các<br /> tỷ lệ phối hợp Diệp hạ châu – Râu mèo<br /> khác nhau<br /> Thuốc đối chiếu Allopurinol có khả năng<br /> ức chế XO ở nồng độ rất thấp và cho kết quả<br /> IC50 = 0,063 µg/ml. Cả 9 công thức phối hợp<br /> đều thể hiện tác dụng ức chế XO, thứ tự khả<br /> năng ức chế giảm dần là: 4DHC:1RM ><br /> 3DHC:1RM > 2DHC:1RM > 1DHC:2RM ><br /> 1DHC:3RM > 2DHC:5RM > 1DHC:4RM ><br /> 1DHC:1RM.<br /> <br /> Phần trăm ức chế<br /> 50 (µg/mL)<br /> 25 (µg/mL)<br /> 52,2 ± 3,5<br /> 43,23 ± 0,45<br /> 41,6 ± 1,4<br /> 21,84 ± 0,78<br /> 34,61 ± 0,99<br /> 24,1 ± 1,4<br /> 48,6 ± 1,9<br /> 33,9 ± 2,6<br /> <br /> STT<br /> <br /> 6<br /> 7<br /> 8<br /> 9<br /> 10<br /> 11<br /> <br /> Sau khi uống nước cất hoặc thuốc nghiên<br /> cứu, chuột không được ăn uống gì thêm.<br /> Hứng và đo lượng nước tiểu chuột sau 1 giờ, 4<br /> giờ và 24 giờ.<br /> <br /> 10 (µg/mL)<br /> 16,7 ± 2,7<br /> 8,76 ± 0,59<br /> 9,6 ± 4,3<br /> 19,7 ± 1,9<br /> <br /> IC50<br /> (µg/mL)<br /> 43,83<br /> 71,36<br /> 76,81<br /> 84,46<br /> <br /> 5,9 ± 2,2<br /> <br /> 2,31 ± 0,81<br /> <br /> 87,65<br /> <br /> 19,0 ± 3,0<br /> 6,6 ± 1,6<br /> 2,9 ± 2,3<br /> 18,9 ± 1,6<br /> 9,8 ± 1,9<br /> 6,1 ± 3,5<br /> <br /> 9,4 ± 1,9<br /> 5,2 ± 2,3<br /> 3,6 ± 2,9<br /> -<br /> <br /> > 100<br /> > 100<br /> > 100<br /> > 100<br /> > 100<br /> > 100<br /> 0,063<br /> <br /> 231<br /> <br />