intTypePromotion=1
zunia.vn Tuyển sinh 2024 dành cho Gen-Z zunia.vn zunia.vn
ADSENSE

Thử nghiệm huyết thanh học

Chia sẻ: PHAM TRONG | Ngày: | Loại File: PDF | Số trang:0

69
lượt xem
5
download
 
  Download Vui lòng tải xuống để xem tài liệu đầy đủ

Tài liệu Thử nghiệm huyết thanh học thuộc giáo trình Các kỹ thuật xét nghiệm vi sinh lâm sàng các bệnh phẩm khác nhau nhằm: giúp học viên biết mục đích của cá thử nghiệm huyết thanh học, nhờ đó phân tích được ý nghĩa hữu dụng lâm sàng của các thử nghiệm huyết thanh học.

Chủ đề:
Lưu

Nội dung Text: Thử nghiệm huyết thanh học

  1. Kyõ thuaät xeùt nghieäm vi sinh laâm saøng caùc beänh phaåm khaùc nhau THÖÛ NGHIEÄM HUYEÁT THANH HOÏC Muïc tieâu · Bieát ñöôïc muïc ñích cuûa caùc thöû nghieäm huyeát thanh hoïc, nhôø ñoù phaân tích ñöôïc yù nghóa höõu duïng laâm saøng cuûa caùc thöû nghieäm huyeát thanh hoïc. · Bieát ñöôïc caùc caùch bieän luaän keát quaû caùc xeùt nghieäm huyeát thanh hoïc, nhôø ñoù coù theå theâm caùc bình luaän ñi keøm keát quaû xeùt nghieäm ñeå laâm saøng phaân tích vaø söû duïng ñuùng keát quaû xeùt nghieäm trong chaån ñoaùn phaùt hieän taùc nhaân gaây beänh. Muïc ñích cuûa thöû nghieäm huyeát thanh hoïc Thöû nghieäm huyeát thanh hoïc coù muïc ñích tìm khaùng theå ñaëc hieäu moät loaïi khaùng nguyeân cuûa vi sinh vaät gaây beänh coù trong huyeát thanh beänh nhaân, nhôø ñoù coù theå giaùn tieáp xaùc ñònh ñöôïc taùc nhaân vi sinh vaät gaây beänh. Ví duï: Thöû nghieäm Widal chaån ñoaùn beänh thöông haøn, thöû nghieäm tìm HBsAb ñeå xaùc ñònh beänh nhaân coù khaùng theå ñaëc hieäu vieâm gan B. Bieän luaän keát quaû moät thöû nghieäm huyeát thanh hoïc Vì muïc ñích laø tìm khaùng theå ñaëc hieäu khaùng nguyeân vi sinh vaät neân thöû nghieäm huyeát thanh hoïc khoâng phaûi laø thöû nghieäm tröïc tieáp phaùt hieän taùc nhaân vi sinh vaät gaây beänh. Do vaäy, bieän luaän thöû nghieäm huyeát thanh hoïc phaûi döïa vaøo giaù trò ñònh löôïng cuûa keát quaû thöû nghieäm. Keát quaû ñònh löôïng cuûa moät thöû nghieäm huyeát thanh hoïc thöôøng ñöôïc hieån thò baèng hieäu giaù khaùng theå ñaëc hieäu, töùc laø ñoä pha loaõng cao nhaát cuûa huyeát thanh beänh nhaân maø thöû nghieäm vaãn coøn döông tính (ví duï trong thöû nghieäm Widal, keát quaû cho bieát TO laø 1/100, coù nghóa laø huyeát thanh beänh nhaân pha loaõng 1/100 vaãn coøn tuï ñöôïc vôùi khaùng nguyeân O cuûa S. typhi thöû nghieäm). Hieän nay, vôùi moät soá boä thöû nghieäm ELISA, keát quaû ñònh löôïng thöôøng ñöôïc hieån thò baèng giaù trò OD neáu thöïc hieän thöû nghieäm treân moät ñoä pha loaõng huyeát thanh beänh nhaân. Coù nhieàu caùch bieän luaän keát quaû cuûa thöû nghieäm huyeát thanh hoïc döïa vaøo giaù trò ñònh löôïng ñeå nhôø ñoù coù theå phaùt hieän ñöôïc taùc nhaân vi sinh vaät gaây beänh: 1. Döïa vaøo huyeát thanh keùp ü Thöû nghieäm treân huyeát thanh laáy 2 laàn caùch nhau 7-14 ngaøy. 147
  2. Kyõ thuaät xeùt nghieäm vi sinh laâm saøng caùc beänh phaåm khaùc nhau ü Keát quaû [+] khi hieäu giaù huyeát thanh laàn 2 cao ³ 4 laàn hieäu giaù huyeát thanh laáy laàn 1. Ñoái vôùi caùc keát quaû ñònh löôïng hieån thò baèng giaù trò OD thì caùc nhaø saûn xuaát thöôøng ñöa ra moät coâng thöùc tính toaùn ñeå cho bieát nhö theá naøo laø coù söï gia taêng coù yù nghóa giaù trò ñònh löôïng cuûa huyeát thanh laàn 2 so vôùi huyeát thanh laàn 1. ü Phöông phaùp huyeát thanh keùp thöôøng ít höõu duïng laâm saøng do maát thôøi gian tính, nhöng raát coù yù nghiaõ ñeå chaån ñoaùn xaùc ñònh 2. Döïa vaøo hieäu giaù khaùng theå ñaëc hieäu thuoäc lôùp IgM ü Coù theå chæ caàn thöû nghieäm treân huyeát thanh laáy 1 laàn vaø xaùc ñònh khaùng theå ñaëc hieäu laø thuoäc lôùp IgM, laø lôùp globulin mieãn dòch chæ xuaát hieän trong giai ñoïan sôùm cuûa beänh, toàn taïi khi coù hieän dieän taùc nhaân vi sinh vaät gaây beänh trong cô theå, vaø bieán maát nhanh sau khi heát beänh-khoâng coøn hieän dieän vi sinh vaät gaây beänh trong cô theå. ü Keát quaû ñöôïc coi laø [+], töùc laø coù söï hieän dieän taùc nhaân vi sinh vaät gaây beänh trong cô theå khi hieäu giaù khaùng theå hay giaù trò OD cuûa keát quaû thöû nghieäm cao hôn hieäu giaù hay giaù trò OD caét, töùc laø hieäu giaù hay giaù trò OD trung bình cuûa ngöôøi bình thöôøng. ü Xeùt nghieäm phaùt hieän khaùng theå ñaëc hieäu thuoäc lôùp IgM raát höõu duïng laâm saøng do khoâng maát thôøi gian tính, vaø raát coù yù nghiaõ ñeå chaån ñoaùn phaùt hieän taùc nhaân vi sinh vaät gaây beänh maø khoâng caàn phaûi thöû nghieäm treân huyeát thanh laáy laàn 2. Tuy nhieân, chæ coù caùc thöû nghieäm mieãn dòch nhö ELISA, IFA (mieãn dòch huyønh quang), RIA (mieãn dòch phoùng xaï) môùi coù theå xaùc ñònh ñöôïc khaùng theå ñaëc hieäu laø thuoäc lôùp naøo. 3. Döïa vaøo hieäu giaù khaùng theå ñaëc hieäu so vôùi giaù trò caét ü Phaûi xaùc ñònh hieäu giaù hay giaù trò OD caét cuûa quaàn theå baèng moät ñieàu tra huyeát thanh dòch teã hoïc. ü So saùnh hieäu giaù hay giaù trò OD cuûa huyeát thanh thöû nghieäm vôùi hieäu giaù hay giaù trò OD caét cuaû quaàn theå; Neáu hieäu giaù huyeát thanh thöû nghieäm cao ³ 4 laàn hieäu giaù caét, hay OD huyeát thanh thöû nghieäm cao hôn k x OD giaù trò caét (k laø trò soá do nhaø saûn xuaát boä thöû nghieäm qui ñònh) thì coù theå cho keát quaû [+] töùc laø cho chaån ñoaùn xaùc ñònh taùc nhaân vi sinh vaät gaây beänh. ü Keát quaû naày khaù höõu duïng laâm saøng do khoâng maát thôøi gian tính, tuy nhieân chæ coù yù nghiaõ vöøa phaûi ñeå chaån ñoaùn xaùc ñònh. 148
  3. Kyõ thuaät xeùt nghieäm vi sinh laâm saøng caùc beänh phaåm khaùc nhau Caâu hoûi oân taäp 1. Cho bieát muïc ñích cuûa thöû nghieäm huyeát thanh hoïc. 2. Thöû nghieäm huyeát thanh hoïc treân huyeát thanh keùp laø nhö theá naøo? Taïi sao phaøi laøm thöû nghieäm huyeát thanh hoïc treân huyeát thanh keùp? Laøm theá naøo ñeå bieän luaän keát quaû? 3. Thöû nghieäm huyeát thanh hoïc tìm khaùng theå thuoäc lôùp IgM ñaëc hieäu khaùng nguyeân vi sinh vaät gaây beänh coù yù nghóa nhö theá naøo trong chaån ñoaùn phaùt hieän taùc nhaân gaây beänh? 4. Coù khi naøo chuùng ta chæ caàn döïa vaøo keát quaû cuûa thöû nghieäm huyeát thanh hoïc treân huyeát thanh beänh nhaân chæ laáy coù moät laàn maø vaãn coù theå chaån ñoaùn ñöôïc taùc nhaân gaây beänh, khoâng caàn phaûi xaùc ñònh khaùng theå ñaëc hieäu tìm ñöôïc laø thuoäc lôùp IgM? THÖÛ NGHIEÄM HOAÙ MIEÃN DÒCH HOÏC Muïc tieâu · Bieát ñöôïc muïc ñích cuûa caùc thöû nghieäm hoaù mieãn dòch hoïc, nhôø ñoù phaân tích ñöôïc yù nghóa höõu duïng laâm saøng cuûa caùc thöû nghieäm hoùa mieãn dòch hoïc. · Bieát ñöôïc caùc caùch bieän luaän keát quaû caùc xeùt nghieäm hoaù mieãn dòch hoïc, nhôø ñoù coù theå theâm caùc bình luaän ñi keøm keát quaû xeùt nghieäm ñeå laâm saøng phaân tích vaø söû duïng ñuùng keát quaû xeùt nghieäm trong chaån ñoaùn phaùt hieän taùc nhaân gaây beänh. Muïc ñích thöû nghieäm hoaù mieãn dòch hoïc Muïc ñích caùc thöû nghieäm hoaù mieãn dòch hoïc laø phaùt hieän khaùng nguyeân cuûa taùc nhaân vi sinh vaät trong beänh phaåm, nhôø ñoù coù theå chaån ñoaùn xaùc ñònh ñöôïc moät caùch töông ñoái tröïc tieáp taùc nhaân vi sinh vaät gaây beänh. Ví duï thöû nghieäm phaùt hieän khaùng nguyeân hoaø tan caùc vi khuaån thöôøng gaây vieâm maøng naõo muû baèng boä thuoác thöû tuï latex coù teân Meningitex laø moät thöû 149
  4. Kyõ thuaät xeùt nghieäm vi sinh laâm saøng caùc beänh phaåm khaùc nhau nghieäm hoaù mieãn dòch; thöû nghieäm phaùt hieän khaùng nguyeân beà maët virus vieâm gan B (tìm HBsAg) trong huyeát thanh ñeå phaùt hieän tình traïng nhieãm vieâm gan sieâu vi B laø thöû nghieäm hoaù mieãn dòch hoïc maëc duø beänh phaåm ñeå thöû laø huyeát thanh beänh nhaân; hay thöû nghieäm tuï treân kính vi khuaån Shigella spp. phaân laäp ñöôïc vôùi khaùng huyeát thanh ñaëc hieäu ñeå ñònh nhoùm A , B, C, vaø D cuõng laø thöû nghieäm hoaù mieãn dòch hoïc; hay thöû nghieäm mieãn dòch huyønh quang tröïc tieáp phaùt hieän Chlamydia trachomatis trong pheát coå töû cung laø thöû nghieäm hoaù mieãn dòch. Caùc loaïi thöû nghieäm hoaù mieãn dòch Tuyø thuoäc vaøo khaùng nguyeân ñöôïc phaùt hieän, coù hai loaïi thöû nghieäm hoaù mieãn dòch, ñoù laø: 1. Phaùt hieän khaùng nguyeân hoøa tan Thöôøng, caùc thöû nghieäm nhö tuï latex, ELISA, CCIE (Counter Current Immuno- Electrophoresis = ñieän di mieãn dòch ñoái löu), laø caùc thöû nghieäm hay ñöôïc duøng ñeå phaùt hieän khaùng nguyeân hoøa tan coù trong beänh phaåm. Ñoái vôùi tuï latex, thöôøng caùc nhaø nghieân cöùu hay saûn xuaát gaén khaùng theå ñaëc hieäu khaùng nguyeân leân treân caùc haït latex baèng polystyrene, nhôø vaäy khi gaëp khaùng nguyeân ñaëc hieäu thì caùc haït latex seõ tuï laïi vaø keát quaû seõ thaáy ñöôïc raát deã daøng baèng maét thöôøng. Ñoái vôùi thöû nghieäm ELISA, caùc nhaø nghieân cöùu hay saûn xuaát thöôøng phuû khaùng theå ñaëc hieäu khaùng nguyeân treân caùc gieáng ELISA baèng polystyrene nhôø vaäy seõ toùm baét ñöôïc khaùng nguyeân trong beänh phaåm (goïi laø kyõ thuaät ELISA toùm baét khaùng nguyeân). Ñoái vôùi thöû nghieäm CCIE, caùc nhaø nghieân cöùu hay saûn xuaát thöôøng cho khaùng theå ñaëc hieäu khaùng nguyeân vaøo moät gieáng vaø beänh phaåm vaøo moät gieáng ñoái dieän treân thaïch dieän di, sau ñoù ñieän di ñeå khaùng theå di chuyeån veà phía cöïc aâm höôùng veà gieáng chöùa beänh phaåm vaø khaùng nguyeân trong beänh phaåm seõ di chuyeån veà phía cöïc döông höôùng veà gieáng chöùa khaùng theå; nhôø vaäy söï gaëp gôû khaùng nguyeân-khaùng theå seõ hình thaønh moät vaïch keát tuûa thaáy ñöôïc treân thaïch giöõa hai gieáng. Thöû nghieäm phaùt hieän khaùng nguyeân hoøa tan caùc vi khuaån thöôøng gaây vieâm maøng naõo muû nhö N. meningitidis, H. influenzae, vaø S. pneumoniae baèng phaûn öùng tuï latex vôùi thuoác thöû MENINGITEX; hay thöû nghieäm phaùt hieän Rotavirus trong phaân baèng kyõ thuaät CCIE; hoaëc thöû nghieäm phaùt hieän HBsAg baèng kyõ thuaät ELISA toùm baét khaùng nguyeân laø nhöõng minh hoïa ba phöông phaùp noùi treân duøng phaùt hieän khaùng nguyeân hoaø tan. 150
  5. Kyõ thuaät xeùt nghieäm vi sinh laâm saøng caùc beänh phaåm khaùc nhau 2. Phaùt hieän khaùng nguyeân höõu hình Thöôøng, caùc thöû nghieäm nhö mieãn dòch huyønh quang tröïc tieáp (Direct-Immuno- Fluorescent), hay nhuoäm khaùng theå gaén men peroxidase (Immuno-Peroxidase-Staining), laø caùc thöû nghieäm hay ñöôïc duøng nhaát. Trong thöû nghieäm mieãn dòch huyønh quang, beänh phaåm ñöôïc pheát treân lame kính hieån vi, sau khi ñeå khoâ ñöôïc coá ñònh baèng acetone. Nhoû khaùng theå ñaëc hieäu khaùng nguyeân vi sinh vaät muoán tìm vaø ñaõ gaén huyønh quang (thöôøng laø FITC = Fluorescent Thio Cyanate) leân pheát beänh phaåm naøy, sau ñoù soi döôùi kính hieån vi huyønh quang. Neáu trong beänh phaåm coù vi sinh vaät muoán tìm thì vi sinh vaät naøy seõ bò baùm khaùng theå ñaëc hieäu gaén huyønh quang, do vaäy seõ bò phaùt huyønh quang vaø ngöôøi laøm xeùt nghieäm seõ deã daøng thaáy ñöôïc hình aûnh caùc vi sinh vaät bò phaùt huyønh quang naøy treân moät neàn toái khoâng phaùt huyønh quang Thöû nghieäm nhuoäm khaùng theå gaén men cuõng coù nhöõng böôùc thöïc hieän gioáng nhö nhuoäm khaùng theå huyønh quang, nhöng khoâng caàn phaûi quan saùt pheát beänh phaåm qua kính huyønh quang maø chæ caàn qua kính hieån vi quang hoïc thöôøng. Neáu pheát beänh phaåm coù chöùa khaùng nguyeân vi sinh vaät muoán tìm thì seõ bò khaùng theå gaén men baùm vaøo vaø seõ bò sinh maøu keát tuûa do taùc ñoäng cuûa men treân ñaøi chaát sinh maøu. Thöû nghieäm nhuoäm mieãn dòch huyønh quang tröïc tieáp phaùt hieän vi khuaån Chlamydia trachomatis trong caùc queät coå töû cung, phaùt hieän caùc vi khuaån khoâng ñieån hình trong maãu ñaøm laø nhöõng thöû nghieäm hieän nay thöôøng ñöôïc duøng ñeå chaån ñoaùn phaùt hieän caùc taùc nhaân gaây beänh noùi treân vì phöông phaùp nuoâi caáy khoù coù theå thöïc hieän ñöôïc taïi caùc phoøng thí nghieäm laâm saøng. Bieän luaän keát quaû moät thöû nghieäm hoaù mieãn dòch hoïc Vì muïc ñích laø phaùt hieän coù hay khoâng khaùng nguyeân vi sinh vaät gaây beänh trong beänh phaåm neân thöû nghieäm hoaù mieãn dòch hoïc thöôøng chæ caàn laø thöû nghieäm ñònh tính, xaùc ñònh coù (döông) hay khoâng coù (aâm), maø khoâng caàn giaù trò ñònh löôïng. Vì vaäy khi traû lôøi keát quaû thöû nghieäm hoaù mieãm dòch, ngöôøi laøm xeùt nghieäm khoâng caàn thieát phaûi traû lôøi con soá ñònh löôïng. Maëc duø hieän nay vôùi nhieàu thöû nghieäm hoùa mieãn dòch döïa treân phaûn öùng ELISA, keát quaû phaûi ñoïc baèng maùy quang phoå vôùi giaù trò OD, nhöng giaù trò OD naøy chæ caàn cho ngöôøi laøm xeùt nghieäm ñeå so vôùi OD neàn nhôø ñoù bieát ñöôïc keát quaû maãu beänh phaåm laø [+] hay [-]. Khi traû lôøi 151
  6. Kyõ thuaät xeùt nghieäm vi sinh laâm saøng caùc beänh phaåm khaùc nhau keát quaû cho laâm saøng, khoâng caàn thieát phaûi ñöa keát quaû giaù trò OD cuûa thöû nghieäm vì neáu laøm vaäy coù ñoâi khi laøm roái trí laâm saøng hay coù khi laâm saøng hieåu nhaàm trò soá OD caøng lôùn thì nhieãm truøng caøng naëng so vôùi keát quaû coù trò soá OD nhoû hôn. Caâu hoûi oân taäp 1. Cho bieát muïc ñích cuûa thöû nghieäm hoaù mieãn dòch hoïc. 2. Caùc thöû nghieäm naøo thöôøng ñöôïc duøng ñeå phaùt hieän khaùng nguyeân hoaø tan vaø khaùng nguyeân höõu hình caùc vi sinh vaät gaây beänh coù trong beänh phaåm? Noùi qua nguyeân taéc cuûa caùc thöû nghieäm naøy vaø cho caùc ví duï minh hoïa. 3. Haõy cho bieát coù khi naøo thöû nghieäm hoaù mieãn dòch cho chuùng ta keát quaû coù giaù trò ñònh löôïng khoâng? Neáu coù, ngöôøi laøm xeùt nghieäm coù caàn thieát phaûi traû lôøi cho laâm saøng keát quaû thöû nghieäm hoùa mieãn dòch hoïc vôùi keát quaû ñònh löôïng ñi keøm theo hay khoâng? Taïi sao caàn? taïi sao khoâng caàn? Hình 42: Hình quan saùt qua kính hieån vi huyønh quang pheát queät coå töû cung nhuoäm khaùng theå huyønh quang ñaëc hieäu C. trachomatis (traùi) vaø pheát ñaøm nhuoäm khaùng theå huyønh quang ñaëc hieäu Legionella pneumophila (phaûi) 152
  7. Kyõ thuaät xeùt nghieäm vi sinh laâm saøng caùc beänh phaåm khaùc nhau Saûn phaåm lieân quan: TYPHELISAM - Boä thuoác thöû ELISA phaùt hieän vaø ñònh löôïng khaùng theå IgM ñaëc hieäu Salmonella typhi ñeå chaån ñoaùn phaùt hieän sôùm thöông haøn. Nguyeân taéc hoaït ñoäng Boä thuoác thöû hoaït ñoäng baèng nguyeân taéc cuûa phaûn öùng ELISA giaùn tieáp phaùt hieän khaùng theå: khaùng nguyeân S. typhi ñaõ gaén trong caùc gieáng nhöïa polystyrene toùm baét caùc khaùng theå ñaëc hieäu coù trong huyeát thanh ngöôøi, vaø sau ñoù phaùt hieän khaùng theå ñaëc hieäu baùm treân khaùng nguyeân vaø xaùc ñònh khaùng theå naøy thuoäc lôùp IgM baèng coäng hôïp khaùng IgM ngöôøi ñaùnh daáu men peroxidase. Saøn phaåm naøy laø keát quaû nghieân cöùu cuûa CN. Phaïm Thaùi Bình döôùi söï höôùng daãn cuûa TS. BS. Phaïm Huøng Vaân vôùi söï taøi trôï cuûa chöông trình vöôøn öôm cuûa Thaønh Ñoaøn vaø cuûa coâng ty Nam Khoa. Trình baøy Coù caùc thaønh phaàn sau ñaây, taát caû giöõ ôû 4oC 1. R1: Baûn nhöïa polystyrene laøm ELISA, vôùi 12 thanh rôøi, moãi thanh coù 8 gieáng, caùc gieáng naày ñaõ ñöôïc phuû khaùng nguyeân trích töø S. typhi. 2. R2: dung dòch röûa PBS-T, 100ml x 5. 3. R3: dung dòch pha loaõng PBS-T-BSA, 60ml x 1. 4. R4: coäng hôïp laø khaùng theå khaùng IgM ngöôøi gaén men peroxidase (HRPO), 12ml. 5. R5a: Cô chaát TMB, 0.65ml x 1 tube 6. R5b: Peroxide UPR, 0.65ml x 1 7. R5c: dung dòch ñeäm cô chaát, 12ml x 1. 8. R6: dung dòch ngöng phaûn öùng, 12ml x 1 9. R7a: Huyeát thanh chöùng (+), 1.5ml x 1 10. R7b: Huyeát thanh chöùng (-), 1.5ml x 1 11. R7c: Huyeát thanh chuaån, 1.5ml x 1 153
  8. Kyõ thuaät xeùt nghieäm vi sinh laâm saøng caùc beänh phaåm khaùc nhau Tieán haønh phaûn öùng 1. Pha loaõng caùc huyeát thanh thöû nghieäm 1/160 trong caùc tube eppendorf (10ml huyeát thanh cho vaøo 1590ml R2). Cho vaøo caùc gieáng, moãi gieáng 100ml caùc huyeát thanh ñaõ pha loaõng naøy. Để 1 giếng cho 100ml chứng [+], 1 giếng cho 100ml chứng [-], vaø 1 gieáng cho 100ml chöùng chuaån. UÛ 37oC trong 30 phuùt. 2. Röûa gieáng 4 laàn vôùi R2, ngaâm 1 phuùt ôû laàn röûa cuoái. Löu yù phaûi giuû saïch sau moãi laàn ñoå boû dung dòch röûa. 3. Cho vaøo caùc gieáng 100ml coäng hôïp, gaõi nheï ñaùy gieáng ñeå troän ñeàu. UÛ 37oC trong 30 phuùt. 4. Röûa gieáng 4 laàn vôùi R2, ngaâm 1 phuùt ôû laàn röûa cuoái. Löu yù phaûi giuû saïch sau moãi laân ñoå boû dung dòch röûa. 5. Pha 1ml cô chaát trong moät tube Eppendorf baèng caùch huùt 0.9ml R5c cho vaøo tube roài theâm vaø 50ml R5a vaø 50ml R5b. Laéc troän thaät ñeàu. Dung dòch naøy chæ pha sau khi xong böôùc 4. 6. Cho vaøo caùc gieáng, moãi gieáng 100ml cô chaát vöøa chuaån bò xong. Giöõ trong toái trong 15 phuùt. Ñoïc keát quaû baèng maùy ñoïc ELISA ôû böôùc soùng 450nm. Ñoïc keát quaû 1. Xaùc ñònh giaù trò OD450 cuûa ñieåm caét baèng caùch laáy gía trò OD450 cuûa chöùng chuaån ño ñöôïc (OF) nhaân vôùi giaù trò OD450 cuûa chöùng chuaån (CF) ghi trong taøi lieäu höôùng daãn keøm theo boä thöû nghieäm. 2. Xaùc ñònh caùc chæ soá khaùng theå cuûa huyeát thanh chöùng [+], chöùng [-], vaø caùc huyeát thanh thöû nghieäm baèng caùch laáy giaù trò OD450 ño ñöôïc treân caùc maãu chia cho giaù trò OD450 cuûa ñieåm caét. 3. Bieän luaän nhö sau: · Chæ soá khaùng theå cuûa huyeát thanh chöùng [+] phaûi > 1.05, cuûa huyeát thanh chöùng [-] phaûi < 0.95 · Caùc maãu huyeát thanh thöû coù chæ soá khaùng theå > 1.05 laø döông tính, < 0.95 laø aâm tính. · Caùc maãu huyeát thanh thöû coù chæ soá khaùng theå töø 0.95 ñeán 1.05 thì coù theå döông tính vaø cuõng coù theå laø aâm tính. Caàn phaûi laøm laïi treân maãu laáy sau ñoù moät tuaàn môùi quyeát ñònh ñöôïc. 154
ADSENSE

CÓ THỂ BẠN MUỐN DOWNLOAD

 

Đồng bộ tài khoản
2=>2