Tìm hiểu phân typ HIV lưu hành ở Tây Nguyên

Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 14 * Phụ bản của Số 2 * 2010<br /> <br /> Nghiên cứu Y học<br /> <br /> TÌM HIỂU PHÂN TYP HIV LƯU HÀNH Ở TÂY NGUYÊN<br /> *<br /> <br /> Lê Văn Tuấn , Bạch Thị Như Quỳnh**, Đinh Duy Kháng**, Nguyễn Thị Hoa**, Lê Phương Hằng**<br /> <br /> TÓM TẮT<br /> Đặt vấn ñề: Đại dịch HIV/AIDS ñang lây lan nhanh trên toàn cầu với số trường hợp nhiễm HIV theo báo<br /> cáo của UNAIDS và WHO trong năm 2007 là 33,2 triệu người. Hiểu ñược sự lưu hành của các phân typ HIV<br /> cũng như các thể tái tổ hợp (CRF) của chúng ở mỗi vùng ñịa lý khác nhau có ý nghĩa quan trọng cho việc giám<br /> sát, nghiên cứu, phòng chống sự lây lan của ñại dịch HIV/AIDS.<br /> Mục tiêu nghiên cứu: Xác ñịnh phân typ HIV lưu hành ở Tây Nguyên.<br /> Phương pháp nghiên cứu: Mô tả cắt ngang. 73 mẫu máu bệnh nhân ñã ñược chẩn ñoán dương tính với HIV<br /> theo 3 phương cách của Bộ Y tế tại các tỉnh của Tây Nguyên ( Đắc Lắc, Đắc Nông, Gia Lai và Kon Tum) trong 2<br /> năm 2008-2009. Tách chiết DNA sử dụng bộ kit tách chiết của Bioneer. Nhân bản gen mã hóa cho protein P24<br /> bằng PCR lồng. Xác ñịnh phân typ HIV<br /> Kết quả nghiên cứu: Qua việc sử dụng kỹ thuật PCR ñể tìm hiểu phân typ HIV ở Tây Nguyên, chúng tôi ñã<br /> xác ñịnh ñược có 2 phân typ lưu hành ở khu vực này là CRF01_AE và B, với các tỷ lệ như sau: - Phân typ<br /> CRF01_AE chiếm 97,26 %. - Phân typ B chiếm 2,74%. Chưa phát hiện ñược ñối tượng nghiên cứu nào nhiễm<br /> ñồng thời 2 phân typ CRF_AE và phân typ B.<br /> Kết luận: Phân typ HIV lưu hành ở khu vực Tây Nguyên gồm phân typ CRF01_AE và phân typ B, trong ñó<br /> phân typ CRF01_AE là phân typ chiếm ña số.<br /> Từ khoá: HIV/AIDS, phân type HIV, Tây Nguyên, kỹ thuật PCR, phân typ CRF01_AE, phân typ B<br /> ABSTRACT<br /> INVESTIGATION ON CIRCULATION OF HIV SUBTYPES IN TAY NGUYEN<br /> Le Van Tuan, Bach Thi Nhu Quynh, Đinh Duy Khang, Nguyen Thi Hoa, Le Phuong Hang<br /> * Y Hoc TP. Ho Chi Minh * Vol. 14 - Supplement of No 2 – 2010: 254 - 258<br /> Background: HIV/AIDS epidemic is spreading rapidly in the world with HIV infected cases reported by<br /> UNAIDS and WHO are 33.2 millions. Knowing the circulation of HIV subtypes and circulating recombinant<br /> forms (CRFs) in different geographic regions is very important for surveillance, research and prevention of<br /> HIV/AIDS epidemic.<br /> Objectives: Identification on circulation of subtypes of HIV in Tay Nguyen.<br /> Method: cross-sectional study. 73 blood samples are collected from HIV seropositive CSWs, IDUs and<br /> volunteers in 4 provinces of Tay Nguyen (DakLak, DakNong, GiaLai and KonTum) between 2008 and 2009.<br /> Genomic DNA was extracted from full blood after collection according to manufacturer guide of Genomic DNA<br /> extraction Kit. Amplification of the HIV p24-encoding gene was conducted to identify HIV subtypes in a<br /> laboratory by Nested PCR.<br /> Results: Using PCR technique for investigation on HIV subtypes in Tay Nguyen, we have identified 2 HIV<br /> subtypes which are CRF01_AE and B: CRF01_AE subtype is 97.26%. B subtype is 2.74%. We have not yet<br /> detected any HIV infected case of both subtypes CRF01_AE and B.<br /> Conclusion: HIV subtypes circulated in Tay Nguyen are CRF01_AE and B. CRF01_AE subtype is<br /> predominant in this region (97,26).<br /> Keywords: HIV/AIDS, subtypes of HIV, Tay Nguyen, PCR techniqe, CRF01_AE subtype, B subtype.<br /> <br /> *<br /> <br /> **<br /> Viện Vệ sinh Dịch tễ Tây Nguyên<br /> Viện Công nghệ Sinh học, Hà Nội<br /> Địa chỉ liên lạc: Lê Văn Tuấn<br /> ĐT: 0935404695 Email: levantuan_tihe@yahoo.com<br /> <br /> Hội nghị Khoa học Kỹ thuật Viện Y Tế Công Cộng năm 2009 - 2010<br /> <br /> 254<br /> <br /> Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 14 * Phụ bản của Số 2 * 2010<br /> Giới tính<br /> Nam<br /> Nữ<br /> Tổng<br /> <br /> ĐẶT VẤN ĐỀ<br /> Theo báo cáo của Ủy ban phòng chống AIDS của<br /> Liên Hiệp Quốc (UNAIDS) và Tổ chức Y tế thế giới<br /> (WHO), ñến tháng 12/2007 trên thế giới có 33,2 triệu<br /> người nhiễm HIV, con số lớn nhất từ trước tới nay(15).<br /> Trong ñó tổng số người chết do AIDS ñã lên tới 16,3<br /> triệu người từ khi có dịch xuất hiện, riêng năm 2007<br /> là 2,1 triệu. Tại Việt Nam, từ khi ca nhiễm ñầu tiên<br /> ñược thông báo vào năm 1990 ở thành phố Hồ Chí<br /> Minh, số lượng người nhiễm HIV ñang ngày càng<br /> tăng lên(2). Tính ñến ngày 31/3/2009, toàn quốc có<br /> 144.483 người nhiễm HIV, 30.996 người ñã chuyển<br /> sang giai ñoạn AIDS còn sống, 42.447 người ñã tử<br /> vong vì AIDS(1).<br /> Xác ñịnh các phân typ HIV hành cũng như các<br /> thể tái tổ hợp (CRF) của chúng ở mỗi vùng ñịa lý<br /> khác nhau góp phần quan trọng trong việc giám sát,<br /> nghiên cứu và phòng chống sự lây lan của ñại dịch<br /> HIV/AIDS.<br /> <br /> Mục tiêu nghiên cứu<br /> Xác ñịnh phân typ HIV lưu hành ở Tây Nguyên.<br /> <br /> ĐỐI TƯỢNG- PHƯƠNG PHÁPNGHIÊN CỨU<br /> <br /> Nghiên cứu Y học<br /> n<br /> 57<br /> 16<br /> 73<br /> <br /> %<br /> 78<br /> 22<br /> 100<br /> <br /> Như vậy trong tổng số 73 ñối tượng nghiên cứu<br /> thì nam chiếm tỷ lệ ña số 78%, nữ chỉ chiếm tỷ lệ<br /> 22%.<br /> <br /> Dân tộc<br /> Bảng 2: Phân bố ñối tượng nghiên cứu theo dân tộc<br /> Dân tộc<br /> Kinh<br /> Khác<br /> Tổng<br /> <br /> n<br /> 70<br /> 3<br /> 73<br /> <br /> %<br /> 95,9<br /> 4,1<br /> 100<br /> <br /> Tuổi<br /> <br /> Bảng 3: Phân bố ñối tượng nghiên cứu theo<br /> nhóm tuổi<br /> Nhóm tuổi<br /> < 13<br /> 13- 19<br /> 20-29<br /> 30-39<br /> 40-49<br /> >50<br /> Không rõ<br /> Tổng<br /> <br /> n<br /> 0<br /> 1<br /> 28<br /> 28<br /> 5<br /> 0<br /> 11<br /> 73<br /> <br /> %<br /> 0<br /> 1,35<br /> 38,35<br /> 38,35<br /> 6,85<br /> 0<br /> 15,10<br /> 100<br /> <br /> Trong nhóm ñối tượng nghiên cứu thì nhóm<br /> <br /> Đối tượng nghiên cứu<br /> <br /> tuổi từ 30-39 và 20-29 là cao nhất, chiếm 36% và<br /> <br /> Các mẫu máu thu thập trên những người nhiễm<br /> HIV tại Tây Nguyên trong 2 năm 2008 - 2009, ñã<br /> ñược chẩn ñoán nhiễm HIV theo 3 phương cách của<br /> Bộ Y tế quy ñịnh (2 lần ELISA dương tính và 1 lần<br /> Western blot dương tính hoặc 3 lần ELISA dương<br /> tính với 3 loại test kít khác nhau).<br /> <br /> 34%. Không có ñối tượng nào dưới 13 và trên 50<br /> <br /> Phương pháp nghiên cứu<br /> Mô tả cắt ngang có phân tích<br /> Tách chiết DNA tổng số<br /> Khuếch ñại ñoạn gen mã hóa protein P24 bằng kỹ<br /> thuật PCR lồng.<br /> Xác ñịnh phân typ HIV.<br /> <br /> Phương pháp xử lý số liệu<br /> Thống kê mô tả với các tỷ lệ.<br /> <br /> KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU<br /> Đặc ñiểm của ñối tượng nghiên cứu<br /> Giới tính<br /> Bảng 1: Phân bố ñối tượng nghiên cứu theo giới tính<br /> <br /> tuổi.<br /> <br /> Phân nhóm ñối tượng nghiên cứu theo nguy<br /> cơ<br /> Bảng 4: Phân nhóm ñối tượng nghiên cứu theo nguy<br /> cơ<br /> Nhóm<br /> Tiêm chích ma túy (TCMT)<br /> Mại dâm (MD)<br /> Phụ nữ mang thai<br /> Nghi AIDS<br /> Tự nguyện<br /> Tổng<br /> <br /> n<br /> 50<br /> 8<br /> 1<br /> 1<br /> 13<br /> 73<br /> <br /> %<br /> 68,50<br /> 10,96<br /> 1,37<br /> 1,37<br /> 17,80<br /> 100<br /> <br /> Số lượng nhóm nguy cơ bao gồm 42 ñối tượng<br /> TCMT và 08 ñối tượng MD của tỉnh Đắc Lắc, cộng<br /> thêm 08 ñối tượng TCMT tỉnh Gia Lai và KonTum; 1<br /> phụ nữ mang thai từ tỉnh KonTum; 1 bệnh nhân nghi<br /> AIDS; 13 ñối tượng tự nguyện của tỉnh Đắc Nông và<br /> KonTum.<br /> Trong tổng số 73 ñối tượng nghiên cứu thì ña số<br /> là ñối tượng TCMT, chiếm tỷ lệ 68,50%; tiếp ñến là<br /> ñối tượng tự nguyện chiếm tỷ lệ 17,80% và ñối tượng<br /> <br /> Hội nghị Khoa học Kỹ thuật Viện Y Tế Công Cộng năm 2009 - 2010<br /> <br /> 255<br /> <br /> Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 14 * Phụ bản của Số 2 * 2010<br /> MD là 10,96%; có 1 người là phụ nữ mang thai và 1<br /> bệnh nhân nghi AIDS, ñều chiếm 1,37%.<br /> <br /> Phân typ HIV lưu hành<br /> Bảng 5: Các phân typ HIV lưu hành ở các trại giam<br /> tỉnh Đắc Lắc<br /> Phân typ CRF01_AE<br /> <br /> B<br /> <br /> Đồng nhiễm<br /> (CRF01_AE +<br /> <br /> Chưa<br /> xác<br /> <br /> n=73<br /> %<br /> <br /> 71<br /> 97.26<br /> <br /> Nghiên cứu Y học<br /> <br /> 2<br /> 2.74<br /> <br /> B)<br /> 0<br /> 0<br /> <br /> ñịnh<br /> 0<br /> 0<br /> <br /> Như vậy, trong số các phân typ HIV lưu hành,<br /> chủ yếu là phân typ CRF01_AE, chiếm ñến 97,26%.<br /> Phân typ B chỉ chiếm tỷ lệ rất nhỏ (2,74%).<br /> <br /> Phân bố các phân typ HIV theo nguy cơ<br /> Bảng 6: Phân bố các phân typ HIV theo nguy cơ<br /> Phân typ<br /> CRF01_AE (n=71)<br /> B (n=2)<br /> <br /> Tiêm chích ma túy<br /> (TCMT)<br /> 48 (67,60%)<br /> 2 (100%)<br /> <br /> Mại dâm (MD)<br /> <br /> Nghi AIDS<br /> <br /> Tự nguyện<br /> <br /> Phụ nữ mang thai<br /> <br /> Tổng<br /> <br /> 8 (11,27%)<br /> 0<br /> <br /> 1 (1,41%)<br /> 0<br /> <br /> 13 (18,31%)<br /> 0<br /> <br /> 1 (1,41%)<br /> 0<br /> <br /> 71 (100%)<br /> 2 (100%)<br /> <br /> Hội nghị Khoa học Kỹ thuật Viện Y Tế Công Cộng năm 2009 - 2010<br /> <br /> 256<br /> <br /> Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 14 * Phụ bản của Số 2 * 2010<br /> <br /> Nghiên cứu Y học<br /> <br /> Nhận xét: - Phân typ HIV trên các ñối tượng nghiên cứu chủ yếu là phân typ CRF01_AE. Có 2<br /> ñối tượng TCMT nhiễm phân typ B. - Chưa phát hiện bệnh nhân nào nhiễm ñồng thời phân typ<br /> CRF01_AE và phân typ B ở Tây Nguyên.<br /> <br /> BÀN LUẬN<br /> Ở nước ta, nhiễm HIV lây truyền theo 2 ñường chính là TCMT và MD. Những năm trước ñây,<br /> các thông báo vẫn nói tới sự lây truyền qua con ñường TCMT là chủ yếu(15). Tính ñến 3/2009, 78,6%<br /> những người nhiễm HIV là ñối tượng TCMT, 4% là MD(1). Trong nghiên cứu của chúng tôi, ñối<br /> tượng TCMT là 68,50%, và tỷ lệ bệnh nhân là MD hoặc có tiền sử quan hệ tình dục với gái MD là<br /> 10,96%. Trong thực tế con số này có thể cao hơn, bởi lẽ trong nhóm TCMT có nhiều người có quan<br /> hệ với gái MD mà chưa khai thác ñược và những người ñến xét nghiệm HIV tự nguyện bị nhiễm HIV<br /> có thể họ là gái MD, là ñối tượng TCMT hoặc từng quan hệ với gái MD mà chúng ta không biết. Phải<br /> chăng chính con ñường lây truyền qua quan hệ tình dục khác giới là con ñường lây xuất hiện ñầu tiên<br /> ở Tây nguyên.<br /> Một số tác giả ñã thông báo về các phân typ HIV ở khu vực Ðông Nam Á như: Subbarao S. và<br /> cộng sự năm 1998 ñã phân lập ñược 2 phân typ B và phân typ CRF01_AE ở Thái Lan(12). Taylor năm<br /> 2008 cho thấy phần lớn các chủng HIV phân lập từ những người tình dục khác giới ở Miền Nam Thái<br /> Lan ñều thuộc phân typ CRF01_AE(13). Một nghiên cứu khác của Subbarao cũng cho cho thấy ở Miền<br /> Nam Thái Lan có ñến 80% trường hợp nhiễm là phân typ CRF01_AE, và trên 90% là phân typ<br /> CRF01_AE lưu hành ở Miền Bắc Thái Lan trên cả ñối tượng TCMT và MD(12). Ở Campuchia,<br /> Shigeru K. và cộng sự cho thấy phân typ HIV ở ñây ñều thuộc phân typ CRF01_AE(11). Đánh giá sơ<br /> bộ cho thấy các nước lân cận với nước ta có tỷ lệ nhiễm HIV cao ñều có tỷ lệ phân typ CRF01_AE<br /> lưu hành là chủ yếu, sau ñó ñến phân typ B. Như vậy, dịch HIV ở Việt Nam có thể là chủng HIV từ<br /> các nước lân cận truyền sang do sự giao lưu buôn bán và khách du lịch. Theo kết quả nghiên cứu dịch<br /> tễ học phân tử của Nguyen TH và cộng sự năm 1997 chỉ ra rằng phân typ HIV ở Việt Nam là phân<br /> typ CRF01_AE(9) và phân typ này khá giống (84,4-99,1%) với phân typ CRF01_AE ở Thái Lan và<br /> Campuchia(5,9). Mặt khác, nghiên cứu của Nerurkar V.R. và cộng sự năm 1996 tại một số vùng ở Miền<br /> Nam Việt Nam cho thấy, chủng HIV ở ñây tương tự chủng HIV từ Thái Lan và phân typ CRF01_AE<br /> lưu hành chủ yếu ở khu vực này(8). Điều này có thể lý giải là phân typ CRF01_AE ở Việt Nam liên<br /> quan ñến quá trình xâm nhập và lây nhiễm phân typ CRF01_AE từ Thái Lan tới Campuchia và sau ñó<br /> lây sang Miền Nam Việt Nam(6,7).<br /> Về phân typ HIV ở khu vực Tây Nguyên, kết quả của chúng tôi cho thấy phân typ CRF01_AE<br /> cũng chiếm tỷ lệ cao (97,26%), phân typ B chiếm tỷ lệ rất ít (2,74%). Kết quả của chúng tôi cũng<br /> tương tự với kết quả nghiên cứu của một số tác giả khác khi xác ñịnh phân typ HIV lưu hành ở các<br /> vùng khác nhau của Việt Nam như: Menu E và cộng sự, Nerurkar V.R. năm 1996 cho thấy phân typ<br /> HIV ở Miền Nam chủ yếu là phân typ CRF01_AE(7,8).<br /> Nghiên cứu của Trần Thị Thanh Hà ở Hà Nội năm 2004 cũng chỉ ra phân typ HIV lưu hành chủ<br /> yếu ở ñây là phân typ CRF01_AE(14). Tuy nhiên, phân tích chủng HIV phân typ CRF01_AE trên ñối<br /> tượng TCMT ở Miền Bắc Việt Nam thì phân typ CRF01_AE ở ñây có mối quan hệ gần về chủng loại<br /> phát sinh với phâp typ CRF01_AE của tỉnh Quảng Tây, Miền Nam Trung Quốc. Điều này chỉ ra mối<br /> quan hệ giữa chủng HIV ñang lưu hành trên những ñối tượng TCMT ở Miền Bắc Việt Nam với chủng<br /> HIV Miền Nam Trung Quốc(3,4).<br /> Đồng nhiễm giữa các phân typ HIV là vấn ñề quan trọng, ñặc biệt ở nhóm ñối tượng TCMT.<br /> Nghiên cứu của Nguyễn Thị Bích Yến năm 1997 khi nghiên cứu các phân typ HIV ở Miền Nam Việt<br /> Nam phát hiện có sự lưu hành ñồng thời hai phân typ CRF01_AE và phân typ B trên cùng một ñối<br /> tượng nghiên cứu và cho rằng ñây là dấu hiệu cho thấy khả năng một trận dịch HIV mới sắp xảy ra và<br /> một phân typ virus mới nổi lên ở nước ta(10). Tuy nhiên, trong nghiên cứu của chúng tôi, trong tổng số<br /> 73 ñối tượng nghiên cứu không phát hiện trường hợp nào có sự ñồng nhiễm giữa hai phân typ<br /> CRF01_AE và phân typ B.<br /> <br /> KẾT LUẬN<br /> Hội nghị Khoa học Kỹ thuật Viện Y Tế Công Cộng năm 2009 - 2010<br /> <br /> 257<br /> <br /> Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 14 * Phụ bản của Số 2 * 2010<br /> <br /> Nghiên cứu Y học<br /> <br /> 1. Phân typ HIV lưu hành ở trại giam tỉnh Đắc Lắc trong 2 năm 2008-2009: 100% là phân typ<br /> HIV CRF01_AE<br /> 2. Phân typ HIV lưu hành ở Tây Nguyên:<br /> - Phân typ CRF01_AE chiếm 97,26 %<br /> - Phân typ B chiếm 2,74%<br /> 3. Chưa phát hiện ñược ñối tượng nghiên cứu nào nhiễm ñồng thời 2 phân typ CRF_AE và<br /> B.<br /> <br /> TÀI LIỆU THAM KHẢO<br /> 1.<br /> 2.<br /> 3.<br /> <br /> 4.<br /> <br /> 5.<br /> 6.<br /> 7.<br /> 8.<br /> 9.<br /> 10.<br /> 11.<br /> 12.<br /> 13.<br /> 14.<br /> 15.<br /> <br /> Bộ<br /> Y<br /> tế<br /> (2009),<br /> Báo<br /> cáo<br /> tình<br /> hình<br /> nhiễm<br /> HIV<br /> quý<br /> I/2009<br /> http://www.vaac.gov.vn/index.php?option=com_content&task=view&id=482&Itemid=36.<br /> Christian H, Jürgen K, Bernd S. K (2007), Chuyên khảo HIV, Nhà xuất bản Flying.<br /> Kayoko K, Teiichiro S, Shigeru K, et al (1999), Genetic Similarity of HIV Type 1 Subtype E in a Recent Outbreak among Injecting Drug<br /> Users in Northern Vietnam to Strains in Guangxi Province of Southern China, AIDS Research and Human Retroviruses, 15(13): 11571168.<br /> Kayoko K, Shigeru K, Kazushi M, et al (2001), Closely Related HIV-1 CRF01_AE Variant among Injecting Drug Users in Northern<br /> Vietnam: Evidence of HIV Spread across the Vietnam–China Border, AIDS Research and Human Retroviruses, Volume 17 (2), pP.<br /> 113–123.<br /> Korber B, Kuiken C, Foley B, et al (1998), A compilation and analysis of nucleic acid and amino acid sequences, Human retroviruses<br /> and AIDS.<br /> Liao H, Tee K.K, Hase S, Uenishi R, Li XJ, Kusagawa S, Pham HT, Nguyen TH, Pybus OG, Takebe Y (2009), Phylodynamic analysis<br /> of the dissemination of HIV-1 CRF01_AE in Vietnam, Virology 391, 51-56.<br /> Menu E, Truong TX, Lafon ME, et al (1996), HIV type 1 Thai subtype E is predominant in South Vietnam, AIDS Res Hum<br /> Retroviruses, 12(7):629-33.<br /> Nerurkar VR, Nguyen HT, Dashwood WM, et al (1996), HIV type 1 subtype E in commercial sex workers and injection drug users in<br /> southern Vietnam, AIDS Res Hum Retroviruses, 12(9): 841-3.<br /> Nguyen HT, Nerurkar Vivek R, Woodward Cora L, et al (1997), Molecular Epidemiology of Human Immunodeficiency Virus Type 1<br /> Infection In Vietnam.<br /> Nguyễn Thị Bích Yến, Nguyễn Thị Ngọc Lan, Phạm Duy Linh (1997), Một số kết quả bước ñầu về ñặc ñiểm Subtype HIV-1 ở Miền<br /> Nam Việt Nam, http://home.ykhoa.net/NCKH/bn02.htm.<br /> Shigeru K, Sato H, Kato K (1999), HIV Type 1 env Subtype E in Cambodia. AIDS research and human retroviruses, volume 15 (1), pP.<br /> 91- 94.<br /> Subbarao S, Limpakarnjanarat K, Mastro TD, et al (1998), HIV type 1 in Thailand, 1994-1995: persistence of two subtypes with low<br /> genetic diversity, AIDS Res Hum Retroviruses, 14(4):319-27.<br /> Taylor BS, Sobieszczyk ME, McCutchan FE, Hammer SM (2008), The challenge of HIV-1 subtype diversity, N. Engl.J. Med.,<br /> 358:1590-1602.<br /> Tran TTH, Maljkovic I, Swartling S, Phung DC, Chiodi F, Leitner T (2004), HIV-1 CRF01_AE in intravenous Drug Users in Hanoi,<br /> Vietnam, AIDS Research and Human Retroviruses, 20(3): 341-345.<br /> UNAIDS/WHO (2007), Cập nhật tình hình dịch AIDS tháng 12/2007 http://unaids.org.vn/defaultv.htm<br /> <br /> Hội nghị Khoa học Kỹ thuật Viện Y Tế Công Cộng năm 2009 - 2010<br /> <br /> 258<br /> <br />