XÁC ĐỊNH ĐỘ SỐNG CỦA VẮC XIN BCG

Chia sẻ: Nguyen Uyen | Ngày: | Loại File: PDF | Số trang:7

Thêm vào BST

Báo xấu

95
lượt xem 9
download

Download Vui lòng tải xuống để xem tài liệu đầy đủ

Kiểm tra độ sống 1.1 Các vật liệu Dung dịch Sauton loãng 1/4 được sử dụng để pha loãng vắc xin BCG. Formatted: Space Before: 6 pt, After: 1.2 line, Line spacing: Double Deleted: . Deleted: vacxin Môi trường nuôi cấy: Lowenstein Jensen. Deleted: Vacxin Vắc xin BCG mẫu thử và mẫu chuẩn Formatted: Font: 13 pt, Dutch (Netherlands) Deleted: vacxin 1.2 Hoàn nguyên và pha loãng vắc xin Formatted: Font: 13 pt Formatted: Font: 13 pt, Dutch (Netherlands) Deleted: Vacxin Vắc xin BCG được xác định độ sống theo phương pháp sau: Hoàn nguyên ít nhất 5...

Chủ đề:

Bình luận(0) Đăng nhập để gửi bình luận!

Lưu

Nội dung Text: XÁC ĐỊNH ĐỘ SỐNG CỦA VẮC XIN BCG

Formatted: Left: 1.2", Right: 0.9", Top: 0.9", Bottom: 0.9", Width: 8.27", Height: 11.69" Deleted: P hụ lục 14.1¶ Formatted: Font: 13 pt Deleted: VACXIN 15.1. XÁC ĐỊNH ĐỘ SỐNG CỦA VẮC XIN BCG Formatted: Justified, Space Before: 6 pt, After: 1.2 line, Line spacing: Double Deleted: Ố Deleted: DƯỢC ĐIỂN VIỆT NAM 2007 Trang 1/ 3¶ 1. Kiểm tra độ sống Deleted: ¶ Formatted: Space Before: 6 pt, After: 1.2 line, Line spacing: Double 1.1 Các vật liệu Deleted: . Deleted: vacxin Dung dịch Sauton loãng 1/4 được sử dụng để pha loãng vắc xin BCG. Môi trường nuôi cấy: Lowenstein Jensen. Deleted: Vacxin Vắc xin BCG mẫu thử và mẫu chuẩn Formatted: Font: 13 pt, Dutch (Netherlands) Deleted: vacxin 1.2 Hoàn nguyên và pha loãng vắc xin Formatted: Font: 13 pt Formatted: Font: 13 pt, Dutch (Netherlands) Vắc xin BCG được xác định độ sống theo phương pháp sau: Deleted: Vacxin Formatted: Font: 13 pt Deleted: ¶ Hoàn nguyên ít nhất 5 mg vắc xin BCG vào 5 ml dung dịch Sauton loãng 1/4 vô Deleted: vacxin Deleted: vacxin khuẩn để tạo hỗn dịch cơ bản chứa 1 mg vắc xin BCG/1ml. Sau khi hoàn nguyên, hỗn dịch này phải được giữ ở 4oC trong thời gian tối thiểu 15 phút, sau đó pha theo Deleted: ¶ ¶ công thức sau: Formatted: Justified, Space Before: 6 pt, After: 1.2 line, Line spacing: Double 1. 1ml hỗn dịch cơ bản 99 ml dung dịch Sauton loãng 1/4 = 1/100 + (I) 2. 1ml hỗn dịch pha loãng I 99 ml dung dịch Sauton loãng 1/4 = + 1/10.000 (II) 3. 4 ml hỗn dịch pha loãng II 4 ml dung dịch Sauton loãng 1/4 = + 1/ 20.000 (III) Deleted: 3¶
Deleted: DƯỢC ĐIỂN VIỆT NAM 2007 Trang 1/ 3¶ 4. 2ml hỗn dịch pha loãng II 6 ml dung dịch Sauton loãng 1/4 = + 1/ 40.000 (IV) 5. 2ml hỗn dịch pha loãng II 14 ml đung dịch Sauton loãng 1/4 = + 1/ 80.000 (V) 6. 2ml hỗn dịch pha loãng II 30 ml dung dịch Sauton loãng 1/4 = + /160.000 (VI) Formatted: Space Before: 6 pt, After: 1.2 line, Line spacing: Double 1.3 Nuôi cấy Formatted: Indent: First line: 0", Space Before: 6 pt, After: 1.2 line, Lắc đều hỗn dịch mỗi độ pha trong 20 giây, cấy vào môi trường Lowenstein - Jensen Line spacing: Double 0,1 ml/ống theo trình tự sau: Formatted: Space Before: 6 pt, After: 1.2 line, Line spacing: Double Deleted: m 2 độ pha đầu: Mỗi độ pha loãng cấy lên 5 ống môi trường - Độ pha thứ 3 cấy lên 10 ống môi tr ường Lowenstein - Jensen. - Deleted: vacxin Đối với vắc xin tươi (trước khi đông khô): Cấy lên các ống môi trường Lowenstein - Deleted: c Formatted: Indent: First line: 0", Space Before: 6 pt, After: 1.2 line, Jensen huyền dịch vắc xin BCG từ 3 độ pha loãng cuối IV, V,VI. Line spacing: Double Deleted: vacxin Deleted: vacxin Đối với vắc xin BCG đông khô giữ ở 4 oC: Cấy huyền dịch vắc xin BCG từ 3 độ pha Deleted: c Deleted: vacxin loãng III, IV, V. Deleted: vacxin Đối với vắc xin BCG đông khô ủ ở 37 oC: Cấy huyền dịch vắc xin BCG từ 3 độ pha Deleted: c Deleted: vacxin loãng II, III, IV. Deleted: vacxin Các ống môi trường đã được cấy huyền dịch vắc xin BCG ở các độ pha khác nhau như trên sẽ được láng đều, để khô bề mặt và ủ ở 37oC /28 ngày. Deleted: 3¶
Formatted: Space Before: 6 pt, After: 1.2 line, Line spacing: Double Deleted: DƯỢC ĐIỂN VIỆT NAM 1.4 Đếm độ sống 2007 Trang 1/ 3¶ Deleted: o Các ống môi trường được cấy huyền dịch BCG và ủ ở 37 C sẽ được đưa ra đếm số khuẩn lạc mọc tr ên từng ống sau 21 ngày và 28 ngày. 1.5 Tính kết quả Deleted: vacxin Số đơn vị sống trong 1 ml vắc xin được tính theo 1 trong 4 công thức sau: Công thức tính Điều kiện xác định Comment [T1]: Formatted: Font: Times New Roman, 13 pt 1. 2  X1  X2  2X3 Formatted: Font: 13 pt Deleted: d1 1 d1 1      X1  X 2  1.   X 1  X 2  2X 3 1. v2 v2 Formatted: Right: 0", Space Before: 6 pt, After: 1.2 line, Line spacing: Double . X1 d2 2. .   v 2.   X1  X 2  2 X 3 2. X 1  X 2  2 X 3  2  X 2  2 X 3 Formatted: Space Before: 6 pt, After: 1.2 line, Line spacing: Double Formatted: Space Before: 6 pt, After: 1.2 line, Line spacing: Double Formatted: Space Before: 6 pt, After: 1.2 line, Line spacing: Double . X 2 d3 3. . v 2  X2  2 X3 3. X 2  2 X 3  2  2 X 3 Deleted: 3¶
Deleted: DƯỢC ĐIỂN VIỆT NAM 2007 Trang 1/ 3¶ Formatted: Space Before: 6 pt, After: 1.2 line, Line spacing: Double d3  X3 4. v Formatted: Justified, Space Before: 6 pt, After: 1.2 line, Line spacing: 4.. 2X3  2 Double Formatted: Justified, Space Before: 6 pt, After: 1.2 line, Line spacing: Double X 1 : Số khuẩn lạc trung bình mọc tr ên các ống môi trường Lowenstein - Jensen khi cấy huyền dịch BCG ở độ pha thứ 1 Formatted: Space Before: 6 pt, After: 1.2 line, Line spacing: Double X 2 : S ố khuẩn lạc trung bình mọc tr ên các ống môi trường Lowenstein - Jensen khi cấy huyền dịch BCG ở độ pha thứ 2 X 3 : S ố khuẩn lạc trung bình mọc tr ên các ống môi trường Lowenstein - Jensen khi cấy huyền dịch BCG ở độ pha thứ 3 Deleted: vacxin d - Độ pha loãng huyền dịch vắc xin BCG v - Thể tích hỗn dịch cấy tr ên một ống môi trường Lowenstein - Jensen. Hằng số  tương đương với số lượng tối ưu khuẩn lạc có thể đếm được tr ên một ống môi trường Lowenstein - Jensen. Deleted: vacxin Kết quả độ sống của mỗi loạt vắc xin BCG có thể được tính theo chương trình phần mềm Whoprogram /BCG/Biofarma. Deleted: vacxin Tại nhà sản xuất, tiến hành kiểm tra độ sống ở tất cả các loạt vắc xin thành phẩm (bao gồm cả độ sống trước đông khô, sau đông khô và sau khi ủ ổn định nhiệt). Deleted: 3¶
Deleted: DƯỢC ĐIỂN VIỆT NAM 2007 Trang 1/ 3¶ Những loạt vắc xin BCG có độ sống không đảm bảo với giới hạn cho phép ở Deleted: vacxin lần kiểm tra thứ nhất phải nhắc lại thử nghiệm: - Nếu thử nghiệm độ sống lần 1 không đạt yêu cầu nhưng thử nghiệm có giá trị (valid test), phải nhắc lại thử nghiệm với số lượng mẫu và số ống môi trường Lowenstein Jensen gấp đôi so với lần 1. - Nếu thử nghiệm độ sống lần 1 không đạt yêu cầu nhưng thử nghiệm không có giá trị (invalid test) thì chỉ cần nhắc lại thử nghiệm với số lượng mẫu và số ống môi trường bằng lần 1. Deleted: vacxin Nếu lần thử nghiệm nhắc lại, độ sống vẫn không đạt thì phải huỷ bỏ loạt vắc xin BCG đó. Deleted: vacxin Kiểm tra độ sống của vắc xin BCG phải tiến hành song song với vắc xin BCG Deleted: vacxin mẫu chuẩn để kiểm tra chất lượng môi trường dùng cho thử nghiệm độ sống. Độ Deleted: vacxin sống của vắc xin BCG mẫu chuẩn trong mỗi thử nghiệm phải ổn định và nằm trong Deleted: ¶ ¶ giới hạn giá trị trung bình ± 2SD. 1.6 Tiêu chu ẩn chấp thuận Formatted: Indent: First line: 0", Space Before: 6 pt, After: 1.2 line, Đối với vắc xin BCG phòng bệnh lao, giới hạn độ sống cho phép là từ 1 triệu đến 6 Line spacing: Double Deleted: vacxin triệu đơn vị sống trong 1 mg vắc xin BCG (1.106 – 6.106 đvs/mg vaccxin BCG). Deleted: vacxin Formatted: Space After: 1.2 line, Line spacing: Double, Widow/Orphan control 2. Kiểm tra tính ổn định nhiệt Formatted: Indent: First line: 0", Space Before: 6 pt, After: 1.2 line, o Số đơn vị sống của vắc xin BCG sau khi ủ ở 37 C/28 ngày phải đạt ít nhất là 20% so Line spacing: Double Deleted: vacxin o với mẫu ủ ở 4 C /28 ngày . Deleted: Deleted: 3¶
Formatted: Space Before: 6 pt, After: 1.2 line, Line spacing: Double Deleted: DƯỢC ĐIỂN VIỆT NAM 2.1 Các vật liệu 2007 Trang 1/ 3¶ Deleted: Dung dịch Sauton loãng 1/4 được sử dụng để pha loãng vắc xin BCG. Deleted: vacxin Deleted: Môi trường nuôi cấy: Lowenstein Jensen. Deleted: Vacxin Vắc xin BCG mẫu thử và mẫu chuẩn Deleted: Trước khi kiểm tra tính ổn định nhiệt, vắc xin BCG đông khô mẫu thử phải được ủ ở Deleted: vacxin các nhiệt độ khác nhau trong 28 ngày như dưới đây: Deleted: - Dạng 1mg/ống: ủ 10 ống ở 4 oC/28 ngày và 10 ống ở 37 oC/28 ngày. Deleted: Deleted: ¶ ¶ - Dạng 0,5mg/ống: ủ 20 ống ở 4 oC/28 ngày và 20 ống ở 37 oC/28 ngày. Deleted: ¶ ¶ Formatted: Justified, Indent: First line: 0", Space Before: 6 pt, After: 1.2 line, Line spacing: Double Deleted: ¶ 2.2 Tiến hành Formatted: Space Before: 6 pt, After: 1.2 line, Line spacing: Double Deleted: vacxin Kiểm tra tính ổn định nhiệt của vắc xin BCG bằng cách đếm độ sống của loạt vắc Deleted: vacxin Deleted: m xin này sau khi ủ ở 4oC và 37oC/28 ngày. Quy trình đếm độ sống được thực hiện như Deleted: 4.9.2 Deleted: ¶ ở Mục 1. Tính tỷ lệ % số đơn vị sống BCG mọc ở 37 oC so với ở 4 oC. ¶ Formatted: Justified, Space Before: 6 pt, After: 1.2 line, Line spacing: Double Số ĐVS/ mg vắc xin BCG ở 37 oC/28 ngày Deleted: vacxin Deleted: 4 Deleted: Tỷ lệ % ổn định nhiệt x 100 = Formatted: Space Before: 6 pt, After: 1.2 line, Line spacing: Double (%) Deleted: vacxin Deleted: 37 Deleted: ¶ Số ĐVS/ mg vắc xin BCG ở 4 oC/28 ngày ¶ Formatted: Justified, Space Before: 6 pt, After: 1.2 line, Line spacing: Double ĐVS: đơn vị sống Deleted: 3¶
Deleted: DƯỢC ĐIỂN VIỆT NAM 2007 Trang 1/ 3¶ Những loạt vắc xin BCG có tỷ lệ % ổn định nhiệt không đạt yêu cầu ở lần kiểm tra Deleted: vacxin Formatted: Space Before: 6 pt, thứ nhất phải nhắc lại thử nghiệm: After: 1.2 line, Line spacing: Double - Nếu thử nghiệm tỷ lệ % ổn định nhiệt lần 1 không đạt yêu cầu nhưng thử nghiệm có giá trị (valid test), phải nhắc lại thử nghiệm với số lượng mẫu và số ống môi trường Lowenstein Jensen gấp đôi so với lần 1. - Nếu thử nghiệm tỷ lệ % ổn định nhiệt lần 1 không đạt yêu cầu nhưng thử nghiệm không có giá trị (invalid test) thì chỉ cần nhắc lại thử nghiệm với số lượng mẫu và số ống môi trường bằng lần 1. Nếu lần thử nghiệm nhắc lại, tỷ lệ % ổn định nhiệt vẫn không đạt thì phải huỷ Deleted: vacxin bỏ loạt vắc xin BCG đó. Deleted: vacxin Kiểm tra tỷ lệ % ổn định nhiệt của vắc xin BCG phải tiến hành song song với vắc xin Deleted: vacxin BCG mẫu chuẩn để kiểm tra chất lượng môi trường dùng cho thử nghiệm độ sống. Deleted: vacxin Độ sống của vắc xin BCG mẫu chuẩn trong mỗi thử nghiệm phải ổn định và nằm Deleted: ¶ ¶ trong giới hạn giá trị trung bình ± 2SD. 2.3 Tiêu chu ẩn chấp thuận Formatted: Justified, Indent: First line: 0", Space Before: 6 pt, After: Tỷ lệ % số đơn vị sống BCG mọc ở 37 oC so với ở 4 oC phải không được thấp hơn 1.2 line, Line spacing: Double Formatted: Font: 13 pt, Not Bold 20 %. Deleted: ¶ Formatted: Font: 13 pt Deleted: ¶ Formatted: Font: 13 pt, Dutch (Netherlands) Deleted: 3¶