Xây dựng tiêu chuẩn cơ sở để kiểm nghiệm dược liệu Kim anh tử (Fructus rosa Laevigata Michx. ) họ hoa hồng (Rosaceae)

Chia sẻ: ViNaruto2711 ViNaruto2711 | Ngày: | Loại File: PDF | Số trang:5

Thêm vào BST

Báo xấu

49
lượt xem 4
download

Download Vui lòng tải xuống để xem tài liệu đầy đủ

Nghiên cứu được thực hiện với mục tiêu: Đề xuất được các chỉ tiêu chất lượng, phương pháp thử và xác định mức chất lượng cho mỗi chỉ tiêu kiểm nghiệm dược liệu Kim anh tử. Mẫu nghiên cứu được thu hái tại huyện Trùng Khánh, tỉnh Cao Bằng và chế biến theo phương pháp cổ truyền.

Chủ đề:

Bình luận(0) Đăng nhập để gửi bình luận!

Lưu

Nội dung Text: Xây dựng tiêu chuẩn cơ sở để kiểm nghiệm dược liệu Kim anh tử (Fructus rosa Laevigata Michx. ) họ hoa hồng (Rosaceae)

Hoàng Thị Cúc và Đtg Tạp chí KHOA HỌC & CÔNG NGHỆ 188(12/1): 33 - 37 XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN CƠ SỞ ĐỂ KIỂM NGHIỆM DƯỢC LIỆU KIM ANH TỬ (FRUCTUS ROSA LAEVIGATA MICHX. ) HỌ HOA HỒNG (ROSACEAE) Hoàng Thị Cúc*, Vũ Tú Uyên, Nguyễn Thị Thu Huyền Trường Đại học Y Dược - ĐH Thái Nguyên TÓM TẮT Xây dựng tiêu chuẩn cơ sở để kiểm nghiệm dược liệu giúp đơn vị sở hữu tiêu chuẩn có căn cứ để kiểm định nguyên liệu đầu vào đồng thời công bố chất lượng đầu ra của sản phẩm. Cây Kim anh là dược liệu từ lâu đã được sử dụng trong Y học cổ truyền để chữa bệnh, có vùng phân bố tự nhiên lớn ở huyện Trùng Khánh, tỉnh Cao Bằng. Nghiên cứu được thực hiện với mục tiêu: Đề xuất được các chỉ tiêu chất lượng, phương pháp thử và xác định mức chất lượng cho mỗi chỉ tiêu kiểm nghiệm dược liệu Kim anh tử. Mẫu nghiên cứu được thu hái tại huyện Trùng Khánh, tỉnh Cao Bằng và chế biến theo phương pháp cổ truyền. Bằng phương pháp qui định trong Dược điển Việt Nam IV và phương pháp nghiên cứu đặc điểm vi học, thành phần hóa thực vật của dược liệu chúng tôi đã xây dựng được tiêu chuẩn cơ sở của Dược liệu Kim anh tử với 7 chỉ tiêu chất lượng chính. Trong đó: Có 05 chỉ tiêu có mức chất lượng tương đương Dược điển Việt Nam IV, chỉ tiêu hàm lượng chất chiết được bằng ethanol trong dựơc liệu và đặc điểm vi học bột dược liệu do cơ sở đề xuất thêm cũng cho kết quả rõ ràng và mức chất lượng ổn định. Từ khóa: Tiêu chuẩn cơ sở; Kim anh tử; chỉ tiêu; mức chất lượng; phương pháp thử ĐẶT VẤN ĐỀ* Trong sản xuất thuốc Đông dược để thuốc có hiệu lực, an toàn và chất lượng ổn định thì toàn bộ quy trình sản xuất phải được tiêu chuẩn hóa. Tiêu chuẩn hóa nguyên liệu đầu vào là khâu cơ bản nhất, đối với dược liệu có nguồn gốc tự nhiên thì việc tiêu chuẩn hóa phải bắt đầu từ quy trình thu hái cây thuốc hoang dã trong tự nhiên. Ngày nay, cùng với sự phát triển của y học cổ truyền, các loại thuốc có nguồn gốc từ thiên nhiên đang được nghiên cứu đưa vào sản xuất và sử dụng với mục đích hỗ trợ trong bảo vệ, nâng cao sức khỏe. Quả Kim anh (Fructus Rosa laevigata Michx.) từ lâu đã được sử dụng trong Y học cổ truyền làm thuốc chữa bệnh với nhiều mục đích sử dụng khác nhau như: Chữa di tinh, di niệu, đái són, đái rắt, bạch đới, tiêu chảy lâu ngày không khỏi, ra mồ hôi quá nhiều, ho mạn tính, chữa phong thấp, tê bại, đau nhức tay chân…[1]. Để làm cơ sở cho việc thu mua, chế biến và phát triển vùng nguyên liệu dược liệu Kim anh và làm cơ sở cho việc phát triển một số sản phẩm điều trị từ dược liệu kim anh đề tài “Xây dựng tiêu chuẩn cơ sở * Tel: 0912735760, Email: hoangcuctn@gmail.com để kiểm nghiệm dược liệu Kim anh tử (fructus Rosa Laevigata Michx.) họ Hoa hồng (Rosaceae)” được thực hiện với mục tiêu: Đề xuất được các chỉ tiêu chất lượng, phương pháp thử và xác định mức chất lượng cho mỗi chỉ tiêu kiểm nghiệm dược liệu Kim anh tử thu hái tại huyện Trùng Khánh, tỉnh Cao Bằng. ĐỐI TƯỢNG - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tượng nghiên cứu Mẫu nghiên cứu: Quả Kim anh thu hái khi vỏ đã chuyển sang màu vàng, được thu hái tại huyện Trùng Khánh, tỉnh Cao Bằng tháng 11/2017. Chế biến theo phương pháp cổ truyền theo qui định của Bộ Y tế [3]. Phương tiện nghiên cứu Hóa chất: Ethanol (TQ), cloroform (TQ), anhydrid acetic (TQ), methanol (TQ), HCl (TQ), H2SO4(TQ), dicloromethan (TQ), ethyl acetat (TQ), methanol (TQ), acid formic (TQ)… Thuốc thử: TT Mayer, TT Dragendoff, TT Buchardat, Acid picric, TT Baljet, TT Fehling A, TT Fehling B. đạt tiêu chuẩn tinh khiết phân tích. Thiết bị nghiên cứu: Cân kỹ thuật Precisa, cân phân tích Mettler Toledo, kính hiển vi 33 Hoàng Thị Cúc và Đtg Tạp chí KHOA HỌC & CÔNG NGHỆ Primostar, đèn soi tử ngoại VL - 6.LC, bản mỏng Silicagel GF254, máy ảnh kỹ thuật số Canon Power Shot SX260 HS, tủ sấy Memmert 100l, nồi cách thủy Memmert… Phương pháp nghiên cứu Phương pháp đề xuất các chỉ tiêu đánh giá chất lượng dược liệu Căn cứ đề xuất các chỉ tiêu: Dược điển Việt Nam IV và tuân thủ nguyên tắc “Tiêu chuẩn cơ sở phải có mức chất lượng tương đương hoặc cao hơn tiêu chuẩn Dược điển”. Các chỉ tiêu đề xuất: Tính chất cảm quan, đặc điểm vi học bột, mất khối lượng do làm khô, hàm lượng chất chiết được, tỷ lệ tạp chất, định tính [2]. Xác định chỉ tiêu tính chất cảm quan: Quan sát hình thái, mầu sắc, mùi vị mẫu. Mẫu dược liệu phải có những đặc điểm phù hợp với yêu cầu Dược điển Việt Nam IV [2]. Xác định chỉ tiêu đặc điểm vi học bột dược liệu: Sử dụng phương pháp Kiểm nghiệm dược liệu bằng phương pháp vi học. Dược liệu kim anh đã được chế biến đúng cách, tán thành bột mịn, làm tiêu bản bột, quan sát các đặc điểm vi học của bột dược liệu dưới kính hiển vi [4]. Chụp ảnh, mô tả các đặc điểm của bột dược liệu, nhận biết và chỉ được các đặc điểm vi phẫu, các đặc điểm của bột dược liệu 188(12/1): 33 - 37 Xác định chỉ tiêu độ ẩm, hàm lượng chất chiết được, tỷ lệ tạp chất: Tiến hành theo phương pháp qui định của Dược điển Việt Nam IV [2]. Xác định chỉ tiêu định tính: Thực hiện các phản ứng hóa học đặc hiệu để khẳng định sự hiện diện của các nhóm hợp chất hóa thực vật trong chế phẩm [2], [4]. Hợp chất glycosid tim: Phản ứng Liberman, phản ứng Baljet, phản ứng Keller-Kiliani; Hợp chất flavonoid: Phản ứng Cyanidin, phản ứng tăng màu; Hợp chất saponin: Phản ứng tạo bọt, phản ứng Lieberman – Buchardart; hợp chất tannin: Phản ứng tạo màu với thuốc thử FeCl3, phản ứng với thuốc thử gelatin; phản ứng với thuốc thử Pb(CH3COO)2 10%. Đường khử: Phản ứng với thuốc thử Fehling; Acid hữu cơ: Thuốc thử Na2CO3 khan. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ BÀN LUẬN Tính chất cảm quan Mô tả hình thái quả: Quả Kim anh được thu hái khi bắt đầu chuyển sang màu vàng. Quả có hình trứng dài 1,5 – 3 cm, đường kính nơi phình to nhất khoảng 1,3- 1,8 cm, mặt ngoài có lông dạng gai cứng, khi chín màu vàng nâu, vàng da cam hoặc đỏ nhạt, có đài tồn tại khô xác, bên trong chứa nhiều hạt (quả bế) thon, dẹt, có góc đóng, màu vàng nâu nhạt, rất cứng, có nhiều lông tơ. Hình 1. Hình thái quả Kim anh khi thu hái (a), và sau khi bổ đôi (b) Mô tả vị dược liệu: quả Kim anh được thu hái khi bắt đầu chuyển sang màu vàng xanh. Sau khi thu hái cạo bỏ gai cứng, bổ dọc quả, nạo sạch hạt và lông phía trong, phơi hoặc sấy đến độ ẩm qui định. Dược liệu sau khi làm khô có mặt ngoài màu da cam, nâu đỏ hoặc nâu sẫm bóng, hơi nhăn nheo, có vết của gai đã rụng. Đầu trên mang vết tích của lá đài và nhị. Đầu dưới còn sót lại một đoạn cuống ngắn. Phần lớn đã được nạo sạch hạt (quả bế) và lông. Mép cắt thường hay quăn gập lại. Vị hơi ngọt, chát, mùi thơm nhẹ. 34 Hoàng Thị Cúc và Đtg Tạp chí KHOA HỌC & CÔNG NGHỆ 188(12/1): 33 - 37 Hình 2. Mẫu dược liệu Kim anh tử sau chế biến (c) và bột Kim anh tử sau khi nghiền mịn (d) Đặc điểm vi học bột dược liệu Bột dược liệu Kim anh tử có màu vàng, mùi thơm. Hình 3. Đặc điểm vi học bột kim anh tử Các đặc điểm quan sát được dưới kính hiển vi của bột dược liệu gồm: Mô mềm (1); lông (2); mảng biểu bì vỏ quả (3,5); sợi (4); mạch và mảng mạch (6,7,12); tế bào thành dày và đám tế bào thành dày (8,9,10); tinh thể calcioxalat hình khối. Định tính dược liệu bằng các phản ứng đặc hiệu 35 Hoàng Thị Cúc và Đtg Tạp chí KHOA HỌC & CÔNG NGHỆ 188(12/1): 33 - 37 Đường khử Bảng 1. Kết quả định tính bằng thuốc thử đặc hiệu Thuốc thử- Phản ứng Hiện trượng Phản ứng Keller - Kiliani Ở mặt phân cách giữa 2 lớp thuốc thử xuất hiện 1 vòng màu đỏ nâu Phản ứng Liebermann Vòng ngăn cách, sát phía dưới vòng có màu hồng hoặc tím Phản ứng Baljet Không có màu da cam đậm hơn so với ống chứng Phản ứng tăng màu trong Dung dịch tăng màu với TT môi trường kiềm NaOH 10% Phản ứng Cyanidin Dung dịch có màu từ hồng tới đỏ Phản ứng định tính TT HCl 10%, TT NaOH 10% anthocyanosid Phản ứng tạo bọt Cột bọt bền trong vòng 15 Phản ứng Lieberman - Mặt phân cách giữa 2 lớp chất Buchardart lỏng có màu hồng đến tía TT FeCl3 5% Dung dịch phải chuyển sang màu xanh đậm Dung dịch gelatin 1% Có tủa bông trắng Thuốc thử Pb(CH3COO)2 10% Có tủa bông xuất hiện Thuốc thử Fehling Có tủa đỏ gạch Acid hữu cơ Na2CO3 Có bọt khí nổi lên ++ Hợp chất polyuronid TT cồn 95% Có tủa bông ++ Hợp chất Glycosid tim Flavonoid Saponin Tanin Kết quả ++ ++ Nhận định Có glycosid tim ++ Có flavonoid ++ ++ ++ Có saponin triterpenoid ++ Có tanin ++ +++ ++ Có đường khử Có acid hữu cơ Có polyuronid Nhận xét: Kết quả định tính bột dược liệu Kim anh tử với các thuốc thử đặc hiệu cho thấy trong dược liệu có chứa: Glycoside tim, saponin, flavonoid, tannin, đường khử, acid hữu cơ, polyuronid. Kết qủa thử độ ẩm, tỷ lệ tạp chất, hàm lượng chất chiết được Bảng 2. Kết quả đánh giá một số chỉ tiêu khác Chỉ tiêu Độ ẩm (%) Hàm lượng chất chiết được trong ethanol Tỷ lệ quả chưa nạo sach hạt và lông Tỷ lệ tạp chất khác Số lần lặp lại thí nghiệm 5 5 1 1 Trung bình 11,66 ±0,33 30,16 ± 0,45 2,72% 0,45% Qui định của DĐ VN4 ≤15% Chưa có qui định ≤ 3% ≤ 1% Nhận xét: Mẫu nghiên cứu có các chỉ tiêu: Độ ẩm, tỷ lệ tạp chất khác, tỷ lệ quả chưa nạo sạch hạt và lông đạt mức cao hơn so với qui định của Dược điển Việt Nam IV. Hàm lượng chất chiết được trong ethanol của mẫu nghiên cứu đạt 30,16 ± 0,45. vạch, tế bào mô cứng, tinh thể calci oxalat BÀN LUẬN hình khối. Từ những kết quả thực nghiệm thu được trong + Độ ẩm: Không quá 12%. quá trình nghiên cứu, chúng tôi đề xuất tiêu + Tỷ lệ quả chưa nạo sach hạt và lông: Không chuẩn cơ sở của dược liệu Kim anh tử (Rosae quá 3%. laevigata Michx.) gồm các chỉ tiêu và mức đạt như sau: + Tạp chất khác: Không quá 1% + Lượng chất chiết được: Không được ít + Tính chất: Dược liệu phải có đầy đủ các đặc hơn 28%. điểm đặc trưng của Kim anh tử. + Định tính: Dịch chiết dược liệu phải cho + Đặc điểm vi học bột: Tế bào mô mềm, sợi phản ứng đặc trưng của glycosid tim, bó sợi, lông, mảnh biểu bì vỏ quả, mảnh mạch 36 Hoàng Thị Cúc và Đtg Tạp chí KHOA HỌC & CÔNG NGHỆ flavonoid, saponin, đường khử, tanin, acid hữu cơ, polyuronid. Những kết quả thu được từ nghiên cứu này góp phần cho việc tiêu chuẩn hóa và kiểm nghiệm tiêu chuẩn chất lượng chế phẩm, phục vụ cho các nghiên cứu triển khai tiếp theo. KẾT LUẬN Từ những kết quả thu được của đề tài chúng tôi có một số kết luận sau: - Dược liệu Kim anh tử có mặt ngoài màu bóng màu da cam, nâu đỏ hoặc nâu sẫm, có vết của gai đã rụng. Đầu trên mang vết tích của lá đài và nhị. Đầu dưới còn sót lại một đoạn cuống ngắn. Phần lớn đã được nạo sạch hạt (quả bế) và lông. Mép cắt thường hay quăn gập lại. Vị hơi ngọt, chát, mùi thơm nhẹ. Bột dược liệu Kim anh tử có màu vàng, mùi thơm. - Chế phẩm đạt các yêu cầu về tính chất, độ ẩm, tỷ lệ quả chưa nạo sạch hạt và lông, tạp chất, lượng chất chiết được trong ethanol. 188(12/1): 33 - 37 - Dịch chiết dược liệu có chứa các hợp chất glycoside tim, flavonoid, saponin, đường khử, tanin, acid hữu cơ, polyuronid. Những kết quả thu được từ nghiên cứu này góp phần cho việc tiêu chuẩn hóa và kiểm nghiệm tiêu chuẩn chất lượng chế phẩm, phục vụ cho các nghiên cứu triển khai tiếp theo và có triển vọng đóng góp với cộng đồng một lựa chọn mới trong điều trị. TÀI LIỆU THAM KHẢO 1. Đỗ Huy Bích và cs (2006), Cây thuốc và động vật làm thuốc ở Viêt Nam, tập II, Nxb Khoa học và Kỹ thuật, tr. 103 - 105. 2. Bộ Y tế (2009), Dược điển Việt Nam IV, Nxb Y học, tr. PL110, 182, 221. 3. Bộ Y tế (2017), Thông tư hướng dẫn phương pháp chế biến vị thuốc cổ truyền, Số: 30/2007/TT-BYT ban hành ngày 11/7/2017, tr. 63-64. 4. Trần Hùng (2006), Giáo trình phương pháp nghiên cứu dược liệu, Đại học Y dược TP. HCM. ABSTRACT BUILDING STANDARDS FOR TESTING MEDICINAL PLANTS FRUIT ROSA LAEVIGATA MICHX. (ROSACEAE) Hoang Thi Cuc*, Vu Tu Uyen, Nguyen Thi Thu Huyen University of Medicine and Pharmacy - TNU Establishment of standards for testing pharmaceutical ingredients helps standard owners have grounds to test input materials and publish quality output of products. Rosa laevigata Michx. is a medicinal herb that has long been used in traditional medicine for healing, with a large natural distribution area in Trung Khanh district, Cao Bang province. The research was carried out with the objective of: Proposing quality criteria, testing methods and determining the quality level for each criterion of testing medicinal anhydride. The sample was collected in Trung Khanh district, Cao Bang province and processed according to the traditional method. By the method prescribed in the Vietnam Standard IV and the method of studying the micro-characteristics, chemical composition of medicinal plants, we have developed the basic criteria of Rosa laevigata Michx. with 7 standards main volume. In particular, there are 05 indicators with the quality level equivalent to Vietnamese standard IV, the content of ethanol extracts in the material and the characteristics of micro-powder of pharmaceutical powder proposed by the establishment also give clear results. Keywords: basic standards, needles, norms, quality levels, test methods Ngày nhận bài: 27/8/2018; Ngày phản biện: 10/9/2018; Ngày duyệt đăng: 12/10/2018 * Tel: 0912735760, Email: hoangcuctn@gmail.com 37