intTypePromotion=1
zunia.vn Tuyển sinh 2024 dành cho Gen-Z zunia.vn zunia.vn
ADSENSE
 » 
 » 

Bài giảng Chương 4: Các thử nghiệp Sinh Hóa

Chia sẻ: Nguyen Thanh Hai | Ngày: | Loại File: PPT | Số trang:73

Thêm vào BST
Báo xấu
101
lượt xem 5
download
 
  Download Vui lòng tải xuống để xem tài liệu đầy đủ

Bài giảng Chương 4: Các thử nghiệp Sinh Hóa trình bày. Mục đích: Thử nghiệm khả năng sữ dụng các nguồn CH của các VSV và Nguyên tắc: VSV sử dụng CH, tạo acid, giảm pH môi trường,... Mời các bạn cùng tham khảo.

Chủ đề:

Bình luận(0) Đăng nhập để gửi bình luận!

Lưu

Nội dung Text: Bài giảng Chương 4: Các thử nghiệp Sinh Hóa

  1. Chương 4 Các thử nghiệm sinh hóa GV: Nguyễn Văn Hạnh
  2. Phân lập khuẩn lạc thuần khiết là cần thiết cho định danh VSV Việc định danh dựa chủ yếu vào đặc điểm kiểu hình đặc biệt là các phản ứng sinh hóa. Có 3 cách sử dụng các thử nghiệm sinh hóa để định danh VSV: ◦Cách truyền thống ◦Sử dụng các bộ KIT ◦Sử dụng các thiết bị tự động
  3. Thử nghiệm khả năng lên men Mục đích: thử nghiệm khả năng sữ dụng các  nguồn CH của các VSV Nguyên tắc: VSV sử dụng CH  tao acid   giảm pH môi trường Các loại carbonhydrate ◦Monocarbonhydrate: glucose, xylose, rhamnose … ◦Dicarbonhydrate: sucrose, lactose … ◦Polycarbonhydrate: tinh bột, cellulose ◦Các loại đường khử: đường mono chứa chức –CHO ◦Các loại đường rượu: chứa chức ­OH
  4. Phenol Red Carbohydrate Broth Trang 104 Hấp ở 115oC trong 15 phút
  5. Thử nghiệm khả năng lên men  Môi trường: Phenolred  broth base bổ sung 0,5­1%  đường cần thử nghiệm  VSV sử dụng được nguồn  đường trong môi trường sẽ  làm giảm pH  thay đổi  màu chất chỉ thị phenolred  Phản ứng (+): môi trường  chuyển vàng  Phản ứng (­): môi trường có  màu đỏ 
  6. Thử nghiệm Citrate Mục đích: Xác định khả năng vi sinh vật sử  dụng nguồn citrat như là nguồn cacbon duy  nhất. Cở sở sinh hóa: ◦VSV sử dụng citrate, sinh ra CO2 làm kiềm  hóa MT ◦VSV sử dụng muối ammonium là nguồn  đạm duy nhất tạo ra NH3 làm kiềm hóa MT
  7. Thử nghiệm Citrate Môi trường Simmon citrate agar (tr. 105) Ammonium dihydrogen phosphate 1.0g Dipotassium hydrogen phosphate 1.0g NaCl 5g Sodium citrate 2g MgSO4 0,2g Bromothymol blue 0,08g Agar 13g
  8. Thử nghiệm Citrate Chú ý ­ Cấy lượng sinh khối vừa đủ   ­ Có đối chứng trắng đi kèm Đối chứng trắng Pứ âm tính Pứ dương tính
  9. Thử nghiệm Urease Mục đích: phát hiện VSV có mang enzym  urease Cơ sở sinh hoá: (NH2)2CO + H2O  2 NH3 + CO2  tăng pH môi trường  đỏ phenol (vàng –  đỏ) Môi trường sử dụng: ◦Urea Broth (Rustigian – Stuart) ◦Christensen Urea (môi trường thạch nghiêng)
  10. Môi trường Urea Broth
  11. Thử nghiệm Urease Thực hiện ◦Chuẩn bị môi trường ◦Cấy VSV vào 5ml môi  trường ◦ủ 37oC/24 giờ ◦Quan sát
  12. Thử nghiệm khả năng sinh H2S Mục đích: phát hiện khả năng sinh H2S Cơ sở sinh hóa: desulfohydrase Acid amin chứa S H2S thiosulfate reductase Thiosulfate H2S  H2S sinh ra được nhận biết bởi ion sắt, chì   tạo kết tủa màu đen (FeS, PbS)
  13. Thử nghiệm khả năng sinh H2S Để phân biệt các loài thuộc họ  Enterobacteriaceae và giống Proteus Môi trường sử dụng: ◦KIA, TSI (thạch nghiêng) ◦SIM, PIA (thạch sâu) ◦BSA (thạch đĩa) Cấy vsv lên môi trường  Ủ (37oC, 24 – 48h)
  14. Thử nghiệm khả năng sinh H2S Đọc kết quả: (+) Xuất hiện màu đen trong  môi trường (-) Không xuất hiện màu  đen trong môi trường ĐC (+)
  15. Thử nghiệm khả năng sinh H2S Pancreatic digest of 20.0 g casein (casitone) Peptic digest of animal 6.1 g tissue (beef extract) Ferrous ammonium 0.2 g sulfate Sodium thiosulfate 0.2 g Agar 3.5 g (-) (+) (+)
  16. Thử nghiệm khả năng sinh Indol Mục đích Phát hiện các VSV có khả năng sinh indol   các VSV có hệ emzym tryptophanase 37oC / 24h Thuốc thử Kovac’s Chủng VSV MT canh trypton Pứ dương tính Pứ âm tính
  17. Thử nghiệm khả năng sinh Indol Là phản ứng giúp phân biệt ◦E. coli (+) với Klebsiella (­) ◦Proteus mirabilis (­) với Proteus khác (+) ◦Bacillus alvei (+) với Bacillus khác (­) … Đối chứng (+) Proteus rettgeri     (­)  Serratia marcescens
  18. Thử nghiệm KIA/TSI  KIA: Kligler iron agar (trang 99) Pepton  20g Lactose 20g Glucose  1g NaCl 5g Feric ammonium citrate 0,5g Sodium thiosulphate 0,5g Agar 15g Phenol red  0,025g Nước cất 1 lít pH 7,4±0,2
  19. Thử nghiệm KIA/TSI  TSI: Triple sugar iron agar (trang 106) Pepton  20g Lactose 10g Sucrose 10g Glucose  1g NaCl 5g Feric ammonium sulphate o,2g Sodium thiosulphate 0,2g Agar 13g Phenol red  0,025g Nước cất 1 lít pH 7,4±0,2
ADSENSE

CÓ THỂ BẠN MUỐN DOWNLOAD

THÔNG TIN
TRỢ GIÚP
HỖ TRỢ KHÁCH HÀNG
Theo dõi chúng tôi

Chịu trách nhiệm nội dung:

Nguyễn Công Hà - Giám đốc Công ty TNHH TÀI LIỆU TRỰC TUYẾN VI NA

LIÊN HỆ

Địa chỉ: P402, 54A Nơ Trang Long, Phường 14, Q.Bình Thạnh, TP.HCM

Hotline: 093 303 0098

Email: support@tailieu.vn

Giấy phép Mạng Xã Hội số: 670/GP-BTTTT cấp ngày 30/11/2015 Copyright © 2022-2032 TaiLieu.VN. All rights reserved.

 

Đồng bộ tài khoản
2=>2