Bài giảng Kỹ thuật phân tách tế bào động vật

Chia sẻ: Lavie Lavie | Ngày: | Loại File: PDF | Số trang:50

Thêm vào BST

Báo xấu

126
lượt xem 15
download

Download Vui lòng tải xuống để xem tài liệu đầy đủ

Mời các bạn cùng tham khảo bài giảng Kỹ thuật phân tách tế bào động vật sau đây để bổ sung thêm các kiến thức về phân tách tế bào, ứng dụng của phân tách tế bào, đặc điểm sinh lý và sinh hóa bề mặt tế bào,... Với các bạn chuyên ngành Sinh học thì đây là tài liệu hữu ích.

Chủ đề:

Bình luận(0) Đăng nhập để gửi bình luận!

Lưu

Nội dung Text: Bài giảng Kỹ thuật phân tách tế bào động vật

ThS. Phan Lữ Chính Nhân Kỹ thuật phân tách tế bào động vật
Phân tách tế bào (cell separation) Tách một loại hay nhiều loại tế bào từ một quần thể gồm nhiều loại tế bào khác nhau
Ứng dụng • Chẩn đoán và điều trị bệnh • Nghiên cứu cho liệu pháp miễn dịch • Nghiên cứu cho liệu pháp tế bào gốc • Nghiên cứu ung thư
Phương pháp lọc (Filtration) Kích thước Phương pháp li tâm vật lí Hình dạng (Centrifugation) Tỉ trọng
Phương pháp gắn với chất nền mang ái lực (affinity solid matrix): hạt, bề mặt, lưới,… Đặc điểm sinh lí, Phương pháp tách tế bào được kích hoạt bằng hạt sinh hóa bề mặt tế bào huỳnh quang (FACS) Phương pháp tách tế bào được kích hoạt bằng hạt có từ tính (MACS)
Tạo huyền phù tế bào Mô rắn Mô lỏng Tế bào đang nuôi cấy Tế bào đơn
Biện pháp: – (1) tác dụng một lực cơ học để bẻ gãy những cầu nối. – (2) dùng enzym để phân hủy các cầu nối nói trên.
Phương pháp cắt nhuyễn Sử dụng lục sơ học bẻ gãy các cầu nối liên bào: dùng kéo, dao cắt nhuyễn các mảnh mô. Huyền phù vào dịch PBS, để lắng, thu dịch trong
Phương pháp ép nhuyễn Ép nhuyễn mô: dùng 2 phiến lame ép chặt mảnh mô để thu tế bào đơn đối với những mô có liên kết yếu.
Phương pháp tách bằng màng lọc Tách bằng màng lọc tế bào (Cell strainer): kích thước lỗ trên màng từ 70–100 µm, chỉ cho những tế bào đơn có kích thước tương ứng qua màng.
Tách mô thành tế bào đơn bằng enzym Trypsin Clolagenase Elastase Pronase Dispase …
Lắng đồng tỉ trọng (Isopiknic Sedimentation)
Phương pháp ly tâm theo gradient tỉ trọng
• “Tế bào quan tâm là tế bào a. Tế bào này nằm trong 1 khối mô rắn cùng với 3 loại tế bào khác là b, c và d. Các tế bào có tỉ trọng như sau: a = 1,070 g/cm3, b = 1,077 g/cm3; c = 1,067 g/cm3, d = 1,080 g/cm3”.
• c = 1,067 g/cm3 > a = 1,070 g/cm3 > b = 1,077 g/cm3 > d = 1,080 g/cm3