intTypePromotion=1
zunia.vn Tuyển sinh 2024 dành cho Gen-Z zunia.vn zunia.vn
ADSENSE

Bảo quản tinh trùng người bằng Nito lỏng trong môi trường Glycerol, Geyc và Sperm Freeze

Chia sẻ: Sunshine_3 Sunshine_3 | Ngày: | Loại File: PDF | Số trang:6

83
lượt xem
6
download
 
  Download Vui lòng tải xuống để xem tài liệu đầy đủ

Bảo quản đông lạnh tế bào và mô là một nhánh của ngành sinh học nhiệt độ thấp, với mục đích làm ngừng và bảo tồn được đời sống tế bào trong suốt quá trình lưu giữ kéo dài trong tình trạng đóng băng ở nhiệt độ thấp. Nguyên lý cơ bản của bảo quản lạnh sâu là kiểm soát được chuyển động của các phân tử trong các tế bào và mô. Quá trình sống luôn đòi hỏi những biến đổi sinh học, có liên quan đến sự chuyển động của các phân tử trong môi trường nước. Khi nước ở trong và quanh tế bào chuyển thành dạng nước...

Chủ đề:
Lưu

Nội dung Text: Bảo quản tinh trùng người bằng Nito lỏng trong môi trường Glycerol, Geyc và Sperm Freeze

  1. TCNCYH-2003 B¶o qu¶n tinh trïng ng−êi b»ng nit¬ láng trong m«i tr−êng glycerol, GEYC vµ Sperm freeze TrÞnh Sinh Tiªn, TrÞnh B×nh NguyÔn Ngäc Hïng vµ NguyÔn ThÞ B×nh §¹i häc Y Hµ Néi Sö dông ba lo¹i m«i tr−êng glycerol, GEYC vµ Sperm freeze ®Ó b¶o qu¶n tinh trïng ng−êi trong nit¬ láng (-1960C) cho kÕt qu¶: ChÊt l−îng tinh trïng sau b¶o qu¶n b»ng m«i tr−êng GEYC t−¬ng ®−¬ng víi m«i tr−êng Sperm freeze vµ cao h¬n cã ý nghÜa thèng kª so víi b¶o qu¶n ë m«i tr−êng glycerol ®¬n thuÇn (p < 0,01); B¶o qu¶n tinh trïng ng−êi b»ng l¹nh s©u dïng m«i tr−êng GEYC vµ Sperm freeze cã hiÖu qu¶ víi CSF ≥ 50%. (Tõ viÕt t¾t: GEYC: Glycerol – egg yolk – citrat; CSF: Cryosurvival factor; TT: Tinh trïng) I. §Æt vÊn ®Ò tr−êng nµo phï hîp? §Ó gãp phÇn tr¶ lêi c©u hái nµy, chóng t«i tiÕn hµnh “Nghiªn cøu ¸p B¶o qu¶n ®«ng l¹nh tÕ bµo vµ m« lµ mét dông quy tr×nh b¶o qu¶n tinh trïng ng−êi b»ng nh¸nh cña ngµnh sinh häc nhiÖt ®é thÊp, víi l¹nh s©u trong m«i tr−êng glycerol, GEYC vµ môc ®Ých lµm ngõng vµ b¶o tån ®−îc ®êi sèng Sperm freeze” víi môc tiªu: tÕ bµo trong suèt qu¸ tr×nh l−u gi÷ kÐo dµi trong t×nh tr¹ng ®ãng b¨ng ë nhiÖt ®é thÊp. Nguyªn §¸nh gi¸ hiÖu qu¶ m«i tr−êng glycerol, lý c¬ b¶n cña b¶o qu¶n l¹nh s©u lµ kiÓm so¸t GEYC vµ Sperm freeze trong b¶o qu¶n tinh ®−îc chuyÓn ®éng cña c¸c ph©n tö trong c¸c trïng ng−êi b»ng nit¬ láng (-1960C). tÕ bµo vµ m«. Qu¸ tr×nh sèng lu«n ®ßi hái II. ®èi t−îng vµ ph−¬ng ph¸p nh÷ng biÕn ®æi sinh häc, cã liªn quan ®Õn sù nghiªn cøu chuyÓn ®éng cña c¸c ph©n tö trong m«i tr−êng 1. §èi t−îng nghiªn cøu. n−íc. Khi n−íc ë trong vµ quanh tÕ bµo chuyÓn - 30 mÉu tinh dÞch cã tinh dÞch ®å b×nh th−êng thµnh d¹ng n−íc ®¸ ®ñ ®Ó ng¨n c¶n sù chuyÓn ®−îc xÐt nghiÖm vµ b¶o qu¶n t¹i phßng b¶o ®éng cña c¸c ph©n tö, vµ sau ®ã nÕu ®−îc lµm qu¶n M« - Ph«i, Tr−êng §¹i häc Y Hµ Néi trong Êm l¹i, c¸c hÖ thèng sinh häc cña tÕ bµo kh«ng thêi gian tõ th¸ng 5 ®Õn th¸ng 8 n¨m 2002. bÞ tæn th−¬ng, ng−êi ta nãi qu¸ tr×nh b¶o qu¶n thµnh c«ng [5]. ChÊt l−îng tÕ bµo vµ m« ®−îc - Tiªu chuÈn chän ®èi t−îng nghiªn cøu: b¶o qu¶n phô thuéc vµo nhiÒu yÕu tè kh¸c Nam giíi trong ®é tuæi sinh s¶n, kh«ng xuÊt nhau nh−: quy tr×nh b¶o qu¶n, nhiÖt ®é b¶o tinh tõ 3 ®Õn 5 ngµy tr−íc ngµy lÊy tinh dÞch, qu¶n, m«i tr−êng b¶o qu¶n vµ quy tr×nh lµm tan kh«ng sèt, kh«ng dïng thuèc, kh«ng uèng r−îu b¨ng... Theo thêi gian, trªn thÕ giíi nhiÒu lo¹i t¹i thêi ®iÓm lÊy mÉu. m«i tr−êng ®· ®−îc dïng ®Ó b¶o qu¶n l¹nh s©u 2. Ph−¬ng ph¸p nghiªn cøu tinh trïng ng−êi. Tuy nhiªn, nh÷ng c«ng bè vÒ ¸p dông nghiªn cøu can thiÖp. So s¸nh hiÖu qu¶ cña mçi lo¹i m«i tr−êng b¶o qu¶n tinh hiÖu qu¶ b¶o qu¶n cña 3 lo¹i m«i tr−êng ë c¸c trïng rÊt kh¸c nhau. thêi ®iÓm 1, 2, 30 vµ 90 ngµy sau b¶o qu¶n, ë n−íc ta, b¶o qu¶n l¹nh s©u tinh trïng theo c¸c chØ sè tinh trïng sèng di ®éng tiÕn tíi ng−êi ®Ó phôc vô nhu cÇu ch¨m sãc søc khoÎ nhanh sau b¶o qu¶n (CSF1), chØ sè tinh trïng sinh s¶n lµ vÊn ®Ò míi mÎ vµ cÇn thiÕt. C©u sèng di ®éng tiÕn tíi nhanh vµ chËm sau b¶o hái ®Æt ra lµ: trong sè c¸c m«i tr−êng, m«i qu¶n (CSF2), vµ chØ sè tinh trïng sèng sau b¶o - §Ò tµi ®−îc thùc hiÖn t¹i Lab b¶o qu¶n M« - Ph«i §¹i häc Y Hµ Néi. 3
  2. TCNCYH-2003 qu¶n (CSF3). §Ó lµm râ −u ®iÓm cña m«i tr−êng b¶o qu¶n 2.1. ChuÈn bÞ vµ chän mÉu tinh dÞch. theo môc tiªu ®· ®Ò ra, mét quy tr×nh chung ®· ®−îc thùc hiÖn ë tÊt c¶ c¸c mÉu nghiªn cøu. Tinh dÞch ®−îc lÊy trong mét phßng riªng, n»m c¹nh phßng xÐt nghiÖm, b»ng c¸ch tù kÝch - Chia mçi mÉu tinh dÞch thµnh ba phÇn thÝch vµ cho xuÊt tinh th¼ng vµo mét cèc thuû b»ng nhau, cho vµo 3 cèc thuû tinh ®· ghi tinh cã chia v¹ch, miÖng réng, ®· ghi s½n tªn nh·n: tªn bÖnh nh©n, m«i tr−êng pha. Mçi bÖnh nh©n vµ ngµy giê lÊy mÉu. Cèc ®ùng tinh phÇn sö dông mét lo¹i m«i tr−êng, nhá tõng dÞch ®−îc ®Æt trong tñ Êm 370C; sau thêi gian giät m«i tr−êng l¾c ®Òu, theo tØ lÖ glycerol 2 30 phót, lÊy ra ®Ó ®¸nh gi¸ c¸c chØ sè t¹i phßng giät/1ml tinh dÞch [5], m«i tr−êng GEYC xÐt nghiÖm cã nhiÖt ®é æn ®Þnh tõ 20 – 240C. 1ml/1ml tinh dÞch [1], Sperm freeze 0.7ml/1ml Nh÷ng mÉu tinh dÞch trong giíi h¹n b×nh tinh dÞch. Sau khi cho m«i tr−êng, ®Ó mÉu ë th−êng ®−îc tiÕn hµnh b¶o qu¶n ®«ng l¹nh. nhiÖt ®é phßng thÝ nghiÖm 15 phót. 2.2. Quy tr×nh b¶o qu¶n tinh trïng b»ng - N¹p mçi mÉu ®· chuÈn bÞ ®Ó b¶o qu¶n nit¬ láng (- 1960C). trong 4 cäng r¹ (straw) b»ng m¸y hót cÇm tay. Cäng r¹ 0,25 ml, dµi 13 cm, mét ®Çu ®−îc nót 2.2.1. M«i tr−êng b¶o qu¶n. bëi bét dÝnh. Khi n¹p ®Ó l¹i 1 ®o¹n trèng ë ®Çu a. Glycerol: glycerol 99%. kia vµ hµn kÝn b»ng m¸y Ðp nhiÖt. In c¸c th«ng b. Sperm freeze: Do Perti Pro N.V - BØ s¶n tin c¸ nh©n vµ thêi h¹n b¶o qu¶n b»ng m¸y in xuÊt, ®−îc b¸n trªn thÞ tr−êng. lªn thµnh cäng r¹. Thµnh phÇn: 15% glycerol vµ 0,4% albumin - H¹ nhiÖt ®é b»ng m¸y Nicool 10: Tõ huyÕt thanh ng−êi. +25°C xuèng -10°C trong 6 phót; tõ -10°C c. Glycerol – egg yolk – citrat (GEYC) [1]: xuèng -120°C trong 20 phót; tõ -120°C xuèng - §−îc pha t¹i phßng b¶o qu¶n M«, bé m«n 196°C trong 5 phót. M« häc – Ph«i thai häc, theo c«ng thøc cña - ChuyÓn c¸c cäng r¹ vµo gÇu chøa, nhóng Ackerman. Thµnh phÇn trong 200 ml m«i th¼ng vµo b×nh tr÷ GT 35 chøa ®Çy nit¬ láng. tr−êng GEYC cã: - LÊy mÉu sau b¶o qu¶n ®«ng l¹nh: Chän 1 Penicillin 1triÖu UI 01 lä mÉu cÇn lÊy qua ký hiÖu ®· ghi trªn c¸n gÇu. 2 Streptomycin 1gam 01 lä §−a gÇu ra khái b×nh tr÷, lÊy cäng r¹ ®Æt vµo tñ 3 Egg yolks Bét kh« 40 gam Êm 37°C trong 10 phót. 4 Glycerol PA 30 ml 2.4 Xö lý sè liÖu theo phÇn mÒm Epi-Info Version 6.0 cña WHO. KiÓm ®Þnh sù kh¸c biÖt 5 Glycocol Glycin 2 gam b»ng test t vµ sù kh¸c biÖt cã ý nghÜa thèng kª 6 Glucose 2,6 gam khi p < 0,05. 7 Natri citrat PA 2,3 gam 8 N−íc cÊt 2 130 ml lÇn, khö ion kim lo¹i 2.2.2. Quy tr×nh b¶o qu¶n vµ tan ®«ng. 3. Nh÷ng chØ tiªu nghiªn cøu. * CSF1 (chØ sè tinh trïng di ®éng tiÕn tíi nhanh sau b¶o qu¶n) Tû lÖ % tinh trïng di ®éng tiÕn tíi nhanh sau b¶o qu¶n CSF1 = X 100` Tû lÖ % tinh trïng di ®éng tiÕn tíi nhanh tr−íc b¶o qu¶n 4
  3. TCNCYH-2003 • CSF2 (chØ sè tinh trïng di ®éng tiÕn tíi nhanh vµ chËm sau b¶o qu¶n) Tû lÖ % tinh trïng di ®éng tiÕn tíi nhanh vµ chËm sau b¶o qu¶n CSF2 = X 100` Tû lÖ % tinh trïng di ®éng tiÕn tíi nhanh vµ chËm tr−íc b¶o qu¶n • CSF3 (chØ sè tinh trïng sèng sau b¶o qu¶n) Tû lÖ % tinh trïng sèng sau b¶o qu¶n CSF3 = X 100` Tû lÖ % tinh trïng sèng tr−íc b¶o qu¶n III. KÕt qu¶ ChÊt l−îng tinh trïng b¶o qu¶n b»ng nit¬ láng (-1960C) ®−îc ®¸nh gi¸ theo c¸c chØ sè CSF1, CSF2 vµ CSF3 ë c¸c kho¶ng thêi gian sau b¶o qu¶n 1, 2, 30 vµ 90 ngµy. KÕt qu¶ ®−îc tr×nh bµy ë c¸c b¶ng sau. B¶ng 1. ChØ sè chÊt l−îng tinh trïng (CSF1,2,3) ë kho¶ng thêi gian b¶o qu¶n 1 ngµy: ⎯X ± SD. M«i tr−êng Glycerol GEYC Sperm freeze So s¸nh ChØ sè % (I) (II) (III) (p) p I,II < 0,01 CSF1 16,7 ± 12,1 56,7 ± 20,2 59,0 ± 20,1 p I,III < 0,01 (Di ®éng nhanh) p II,III > 0,05 p I,II < 0,01 CSF2 40,0 ± 18,6 69,0 ± 15,2 62,3 ± 16,5 p I,III < 0,01 (D§ nhanh & chËm) p II,III > 0,05 p I,II < 0,01 CSF3 58,0 ± 17,5 76,0 ± 13,5 69,3 ± 13,6 p I,III < 0,05 (TT sèng) p II,III > 0,05 Qua kÕt qu¶ trªn cho thÊy, ë c¶ 3 chØ sè, m«i tr−êng GEYC ®¶m b¶o hiÖu qu¶ cao h¬n so víi khi dïng m«i tr−êng Glycerol víi ý nghÜa thèng kª p 0,05). B¶ng 2. ChØ sè chÊt l−îng tinh trïng (CSF1,2,3) ë kho¶ng thêi gian b¶o qu¶n 2 ngµy: ⎯X ± SD. M«i tr−êng Glycerol GEYC Sperm freeze So s¸nh ChØ sè % (I) (II) (III) (p) p I,II < 0,01 CSF1 16,7 ± 14,2 52,3 ± 18,3 55,3 ± 20,3 p I,III < 0,01 (Di ®éng nhanh) p II,III > 0,05 p I,II < 0,01 CSF2 37,0 ± 15,8 62,3 ± 16,5 56,7 ± 15,2 p I,III < 0,01 (D§ nhanh &chËm) p II,III > 0,05 p I,II < 0,01 CSF3 54,0 ± 16,3 72,0 ± 13,0 65,7 ± 13,8 p I,III < 0,05 (TT sèng) p II,III > 0,05 KÕt qu¶ trªn cho thÊy, sau hai ngµy b¶o qu¶n, chÊt l−îng tinh trïng ®−îc ®¸nh gi¸ theo c¸c chØ tiªu vÉn ®−îc duy tr× t−¬ng øng nh− sau mét ngµy. 5
  4. TCNCYH-2003 B¶ng 3. ChØ sè chÊt l−îng tinh trïng (CSF1,2,3) ë kho¶ng thêi gian b¶o qu¶n 30 ngµy: ⎯X ± SD. M«i tr−êng Glycerol GEYC Sperm freeze So s¸nh ChØ sè % (I) (II) (III) (p) 17,7 ± 15,5 55,7 ± 23,0 50,0 ± 20,3 p I,II < 0,01 CSF1 p I,III < 0,01 (Di ®éng nhanh) p II,III > 0,05 CSF2 33,3 ± 10,6 62,3 ± 12,2 54,0 ± 14,0 p I,II < 0,01 (D§ nhanh & chËm) p I,III < 0,05 p II,III < 0,05 p I,II < 0,01 CSF3 49,0 ± 14,0 75,3 ± 13,8 65,7 ± 14,5 p I,III < 0,05 (TT sèng) p II,III < 0,05 KÕt qu¶ trªn cho thÊy sau 30 ngµy b¶o qu¶n, chÊt l−îng tinh trïng vÉn ®−îc duy tr× víi c¸c chØ sè ®¸nh gi¸ m«i tr−êng GEYC vÉn cao h¬n so víi m«i tr−êng Sperm freeze. Tuy nhiªn chØ sè CSF2, CSF3 cßn cao h¬n víi sù kh¸c biÖt cã ý nghÜa thèng kª víi p < 0,05. B¶ng 4. ChØ sè chÊt l−îng tinh trïng (CSF1,2,3) ë kho¶ng thêi gian b¶o qu¶n 90 ngµy: X ± SD. M«i tr−êng Glycerol GEYC Sperm freeze So s¸nh ChØ sè % (I) (II) (III) (p) p I,II < 0,01 CSF1 22,3 ± 12,5 56,7 ± 18,8 59,0 ± 23,1 p I,III < 0,01 (Di ®éng nhanh) p II,III > 0,05 p I,II < 0,01 CSF2 38,3 ± 13,9 64,0 ± 13,5 55,3 ± 12,0 p I,III < 0.05 (D§ nhanh & chËm) p II,III < 0,05 p I,II < 0,01 CSF3 54,0 ± 15,9 73,7 ± 13,8 67,3 ± 15,3 p I,III < 0.05 (TT sèng) p II,III > 0,05 KÕt qu¶ trªn cho thÊy sau 90 ngµy b¶o qu¶n, - C¸c chØ sè CSF1, CSF2 vµ CSF3 ë tÊt c¶ m«i tr−êng GEYC vÉn duy tr× ®−îc c¸c chØ sè c¸c giai ®o¹n b¶o qu¶n, khi dïng hai m«i chÊt l−îng tinh trïng cao h¬n so víi m«i tr−êng tr−êng hçn hîp GEYC vµ Sperm freeze, ®Òu Glycerol víi sù kh¸c biÖt cã ý nghÜa thèng kª (p ®¹t trªn møc 50%, nh−ng kh«ng v−ît qu¸ 76%. < 0,01). So víi m«i tr−êng chuÈn Sperm freeze - ChØ sè CSF1 vµ CSF2 ë tÊt c¶ c¸c giai th× chØ sè CSF2 trong m«i tr−êng GEYC kh«ng ®o¹n b¶o qu¶n khi dïng m«i tr−êng ®¬n thuÇn nh÷ng vÉn duy tr× ®−îc hiÖu qu¶ cao h¬n nh− glycerol ®Òu ë møc d−íi 50%. chØ sè CSF1, CSF3 mµ cßn cao h¬n víi sù kh¸c - ë tÊt c¶ c¸c giai ®o¹n b¶o qu¶n, dïng m«i biÖt cã ý nghÜa thèng kª p < 0,05. tr−êng hçn hîp GEYC vµ Sperm freeze, c¸c Tõ nh÷ng kÕt qu¶ x¸c ®Þnh chØ sè CSF, chØ sè CSF1, CSF2 vµ CSF3 ®Òu cao h¬n cã ý chóng t«i cã nh÷ng nhËn xÐt sau: nghÜa thèng kª so víi dïng m«i tr−êng glycerol. - ChØ sè CSF3 ë tÊt c¶ c¸c giai ®o¹n b¶o - Cã sù kh¸c biÖt nh−ng ch−a cã ý nghÜa qu¶n khi dïng 3 lo¹i m«i tr−êng ®Òu ®¹t møc thèng kª vÒ chØ sè CSF1, khi dïng m«i tr−êng trªn 50% (trõ giai ®o¹n sau 30 ngµy víi m«i GEYC vµ Sperm freeze ë tÊt c¶ c¸c giai ®o¹n tr−êng glycerol). b¶o qu¶n; trong khi ®ã chØ sè CSF2 vµ CSF3 6
  5. TCNCYH-2003 kh¸c nhau cã ý nghÜa thèng kª hoÆc kh«ng cã mÉu tinh dÞch ®−îc b¶o qu¶n thµnh c«ng. ChØ ý nghÜa thèng kª tuú giai ®o¹n b¶o qu¶n. sè nµy t−¬ng øng víi chØ sè CSF1 vµ CSF2 mµ iv. bµn luËn chóng t«i ®Æt ra trong c«ng tr×nh nghiªn cøu nµy. Theo chóng t«i, chØ sè CSF1 (tinh trïng di 1. VÒ ph−¬ng ph¸p nghiªn cøu. ®éng tiÕn tíi tr−íc nhanh, sau b¶o qu¶n ®«ng §Ó ®¸nh gi¸ ®−îc hiÖu qu¶ cña tõng m«i l¹nh) lµ chØ sè cã gi¸ trÞ thùc tÕ nhÊt, cÇn ®−îc tr−êng b¶o qu¶n dïng trong c«ng tr×nh nghiªn ®Æt ra khi x¸c ®Þnh chÊt l−îng cña mét mÉu sau cøu nµy, chóng t«i ®· tiÕn hµnh lµm ®«ng l¹nh b¶o qu¶n l¹nh s©u, ®Æc biÖt lµ nh÷ng mÉu cã cho tõng mÉu tinh dÞch ë c¸c thêi ®iÓm nh− tinh dÞch ®å thÊp h¬n giíi h¹n b×nh th−êng. nhau víi cïng mét quy tr×nh thao t¸c kü thuËt. 2. VÒ hiÖu qu¶ b¶o qu¶n l¹nh s©u tinh Trong ®ã, nh÷ng yÕu tè ¶nh h−ëng ®Õn chÊt trïng ng−êi cña 3 m«i tr−êng dïng trong l−îng tinh trïng sau b¶o qu¶n ®· ®−îc chó ý c«ng tr×nh nµy. lµ: sèc l¹nh, tèc ®é lµm l¹nh (h¹ nhiÖt ®é chËm theo ch−¬ng tr×nh cña m¸y Nicool 10), lµm tan Cho ®Õn nay, glycerol ®· ®−îc c«ng nhËn lµ ®«ng sau b¶o qu¶n (®−a mÉu ®«ng l¹nh vµo tñ chÊt b¶o vÖ l¹nh cã hiÖu qu¶ nhÊt trong b¶o Êm 370C). VÒ sèc l¹nh, theo nhiÒu t¸c gi¶, tinh qu¶n tinh trïng. Glycerol lµm h¹ thÊp ®iÓm ®ãng trïng ng−êi kh«ng hoÆc rÊt Ýt nh¹y c¶m víi yÕu b¨ng, lµm gi¶m tËp trung c¸c chÊt ®iÖn gi¶i, duy tè nµy, tuy nhiªn kh«ng lo¹i trõ tÝnh nh¹y c¶m tr× ®é pH vµ lµm t¨ng tÝnh bÒn v÷ng cña mµng cña mét sè mÉu tuú c¸ thÓ. Trong c¶ 3 m«i tinh trïng [5] [2]. Trong hai m«i tr−êng hçn hîp tr−êng ®· dïng, ®Òu cã glycerol lµ chÊt chèng ®· sö dông trong c«ng tr×nh, tØ lÖ glycerol ®Òu sèc l¹nh cho tinh trïng [5], m«i tr−êng chøa chiÕm kho¶ng 15%. M«i tr−êng Sperm freeze cã lßng ®á trøng, theo mét sè t¸c gi¶ còng cã kh¶ thªm 0,4% albumin huyÕt thanh ng−êi, m«i n¨ng lµm gi¶m tÝnh nh¹y c¶m víi sèc l¹nh cho tr−êng GEYC cã thªm 20% lßng ®á trøng, mét tØ tinh trïng cña mét sè c¸ thÓ [3] [4]. lÖ nhá glucose, glycin vµ citrat natri. Nh÷ng thµnh phÇn ®−îc ®−a thªm nµy cã t¸c dông hç trî cho Trong c«ng tr×nh nµy, 30 mÉu tinh dÞch ®· glycerol gióp duy tr× ¸p lùc thÈm thÊu vµ pH, ®ång ®−îc x¸c ®Þnh cã tinh dÞch ®å n»m trong giíi thêi cung cÊp n¨ng l−îng cho tinh trïng tr¸nh h¹n cña mét tinh dÞch ®å b×nh th−êng (theo tiªu viÖc sö dông phospholipid bªn trong tÕ bµo [4]. chuÈn do WHO 1999 ®Ò xuÊt [6]). Trong ®ã nh÷ng th«ng sè quan träng lµ: mËt ®é tinh trïng, KÕt qu¶ nghiªn cøu tõ c«ng tr×nh nµy qua tØ lÖ tinh trïng di ®éng tiÕn tíi tr−íc, tØ lÖ tinh c¸c chØ sè tinh trïng sau b¶o qu¶n (CSF1, CSF2 trïng cã h×nh th¸i b×nh th−êng. Chóng t«i cho vµ CSF3) lµ nh÷ng sè liÖu x¸c nhËn tÝnh hiÖu qu¶ r»ng víi nh÷ng môc tiªu nghiªn cøu ®· ®Æt ra, cña 3 m«i tr−êng ®· dïng. viÖc chän mÉu nghiªn cøu nh− vËy lµ phï hîp. - C¨n cø tiªu chuÈn cña HiÖp héi ng©n hµng VÒ thêi gian b¶o qu¶n (hay thêi ®iÓm lÊy M« Hoa Kú, c¶ 3 m«i tr−êng ®Òu ®¹t chØ sè CSF3 mÉu sau b¶o qu¶n ®Ó ®¸nh gi¸) ë c«ng tr×nh trªn 50%; riªng víi m«i tr−êng glycerol ®¬n thuÇn nµy lµ 1, 2, 30 vµ 90 ngµy. §©y lµ nh÷ng mèc ë giai ®o¹n b¶o qu¶n 30 ngµy, chØ sè nµy chØ ®¹t thêi gian b¶o qu¶n ng¾n. Theo chóng t«i cã thÓ 49%. NÕu c¨n cø vµo chØ sè CSF1 vµ CSF2, m«i phï hîp víi liÖu tr×nh ®iÒu trÞ cho c¸c cÆp v« tr−êng GEYC vµ Sperm freeze ®Òu ®¹t møc trªn sinh mµ c¸c nhµ l©m sµng ¸p dông nh− läc röa 50% ë tÊt c¶ c¸c giai ®o¹n b¶o qu¶n, trong khi tinh trïng b¬m vµo buång tö cung, thô tinh ®ã dïng m«i tr−êng glycerol ®¬n thuÇn hai chØ sè trong èng nghiÖm... Nh÷ng nghiªn cøu b¶o nµy chØ ®¹t møc thÊp d−íi 40%, sù kh¸c biÖt nµy qu¶n tinh trïng dµi ngµy sÏ ®−îc thùc hiÖn tiÕp cã ý nghÜa thèng kª. Tõ nh÷ng nhËn xÐt trªn, tôc sau c«ng tr×nh nghiªn cøu nµy. chóng t«i cho r»ng dïng hai m«i tr−êng GEYC vµ Sperm freeze ®Ó b¶o qu¶n l¹nh s©u tinh trïng râ Theo tiªu chuÈn cña HiÖp héi ng©n hµng rµng cã hiÖu qu¶ h¬n so víi dïng m«i tr−êng M« Hoa Kú [5], chØ sè tinh trïng di ®éng sau glycerol ®¬n thuÇn. b¶o qu¶n CSF lµ tõ 50% trë lªn th× ®−îc coi lµ 7
  6. TCNCYH-2003 - So s¸nh c¸c chØ sè CSF1 gi÷a 2 m«i truêng 2. Quy tr×nh b¶o qu¶n tinh trïng ng−êi b»ng hçn hîp ë c¶ 4 giai ®o¹n, tuy cã kh¸c biÖt nh−ng l¹nh s©u dïng m«i tr−êng GEYC vµ Sperm kh«ng cã ý nhÜa thèng kª. §ång thêi, sù kh¸c biÖt freeze cã hiÖu qu¶ víi chØ sè CSF ≥ 50%. gi÷a c¸c chØ sè CSF2 vµ gi÷a c¸c chØ sè CSF3 ë - Bµi b¸o lµ mét phÇn cña luËn v¨n cao häc vµ c¸c giai ®o¹n b¶o qu¶n còng kh«ng hoµn toµn cã nghiªn cøu c¬ së. B¹n ®äc cã thÓ t×m ®äc toµn ý nghÜa thèng kª. Tõ nh÷ng nhËn xÐt trªn, chóng v¨n t¹i Th− viÖn tr−êng §HYHN, Trung t©m th«ng tin Y häc, Th− viÖn Quèc gia. t«i cho r»ng hiÖu qu¶ b¶o qu¶n l¹nh s©u tinh trïng ng−êi trong nghiªn cøu nµy gi÷a hai m«i tµi liÖu tham kh¶o tr−êng Sperm freeze vµ m«i tr−êng GEYC lµ 1. Tr−¬ng C«ng Hæ, Hå M¹nh T−êng t−¬ng ®−¬ng nhau. (2001). Ph−¬ng ph¸p tr÷ tinh trïng. Ph−¬ng Tuy nhiªn, khi sö dông cÇn c©n nh¾c nh÷ng ph¸p xÐt nghiÖm tinh dÞch. BÖnh viÖn Phô s¶n −u ®iÓm vµ nh−îc ®iÓm cña 2 lo¹i m«i tr−êng nµy Tõ Dò, Thµnh phè Hå ChÝ Minh. vÒ quy tr×nh thao t¸c. M«i tr−êng Sperm freeze lµ 2. Hå M¹nh T−êng, NguyÔn ThÞ Mai, L¹i m«i tr−êng ®−îc pha s½n, b¸n trªn thÞ tr−êng, gi¸ V¨n T¸m (2000). Tr÷ l¹nh tinh trïng ng−êi cao vµ cã h¹n dïng ng¾n; tuy nhiªn sau khi lµm trong thô tinh nh©n t¹o. Thêi sù Y d−îc häc. Bé tan ®«ng mÉu ®Ó ®¸nh gi¸ chÊt l−îng vµ sö dông V (1), tr: 8-10 tinh trïng chØ cÇn lo¹i bá m«i tr−êng b»ng 3. Foote RH; McGonagle; Goldstein M; ph−¬ng ph¸p läc röa tinh trïng th«ng th−êng Feldschuh J (2002). The influence of (ph−¬ng ph¸p swim up hoÆc ph−¬ng ph¸p thang cryoprotective media and processing nång ®é). M«i tr−êng GEYC lµ m«i tr−êng cã thÓ procedures on motility and migration of frozen tù pha, gi¸ thµnh h¹, nh−ng muèn lµm s¹ch m«i – thawed human sperm. Asian J Androl, 4(2), tr−êng ®Ó cã tinh trïng cÇn ph¶i ly t©m t¸ch phÇn pp: 137 – 41. nh»m t¸ch hoµn toµn m«i tr−êng, ®Æc biÖt lµ c¸c 4. Hollanders J.M., Carver – Ward J.A. h¹t lßng ®á trøng. (1996). Male Infertility from A to Z. Studies in III. kÕt luËn: profertility series. The Parthenon publishing Nghiªn cøu b¶o qu¶n tinh trïng ng−êi, mÉu Group, Vol. 4, p. 32-33. cã tinh dÞch ®å trong giíi h¹n b×nh th−êng b»ng 5. J.K.Sherman (1990). Cryopreservation of nit¬ láng (- 1960C) víi 3 m«i tr−êng glycerol, human semen. CRC Handbook of the GEYC vµ Sperm freeze, chóng t«i cã nh÷ng Laboratory Diagnosis and Treatment of kÕt luËn sau: Infertility. pp: 229-258. 1. ChÊt l−îng tinh trïng sau b¶o qu¶n ë m«i 6. World health organisation (1999). WHO tr−êng GEYC t−¬ng ®−¬ng víi m«i tr−êng Sperm laboratory manual for the examination of human freeze vµ cao h¬n cã ý nghÜa thèng kª so víi b¶o semen and sperm – Cervical mucus interation. qu¶n ë m«i tr−êng glycerol ®¬n thuÇn. Fourth edition, Cambridge University press. 34. Summary deep – cryopreservation of human spermatoza in glycerol, geyc and sperm freeze Deep – cryopreservation (- 1960C) of human spermatoza in glycerol, GEYC and Sperm freeze media shows that after preservation, quality of spermatozais the same in GEYC and Sperm freeze but higher in glycerol medium with statisticallysignificant level p < 0,01. CSF of deep – cryopreservation of human spermatoza in GEYC and Sperm freeze media are > 50%. 8
ADSENSE

CÓ THỂ BẠN MUỐN DOWNLOAD

 

Đồng bộ tài khoản
2=>2