Luận văn : Nhân giống lan Dendrobium bằng phương pháp gieo hạt in-vitro part 3
lượt xem 53
download
au đấy quả lan sẽ được cắt gọt 2 đầu, và dùng dao mổ xẻ dọc quả lan, tách làm 2. Dùng dao giữ phần vỏ quả, dùng kẹp lấy hết hột ra một đĩa petri. Gieo hạt vào môi trường. Thí nghiệm được lặp lại 2 lần, mỗi lần một quả. d. Chỉ tiêu theo dõi. Tỷ lệ hạt sống sau khi gieo. Tình trạng hạt gieo: Xanh. Trắng. Hóa nâu.
Bình luận(0) Đăng nhập để gửi bình luận!
Nội dung Text: Luận văn : Nhân giống lan Dendrobium bằng phương pháp gieo hạt in-vitro part 3
- Khoaù luaän toát nghieäp – 2005 Vaät lieäu – Phöông phaùp Download» http://Agriviet.Com - Sau ñaáy quaû lan seõ ñöôïc caét goït 2 ñaàu, vaø duøng dao moå xeû doïc quaû lan, taùch laøm 2. - Duøng dao giöõ phaàn voû quaû, duøng keïp laáy heát hoät ra moät ñóa petri. - Gieo haït vaøo moâi tröôøng. - Thí nghieäm ñöôïc laëp laïi 2 laàn, moãi laàn moät quaû. d. Chæ tieâu theo doõi. Tyû leä haït soáng sau khi gieo. Tình traïng haït gieo: Xanh. Traéng. Hoùa naâu. Trang 18 SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân
- Khoaù luaän toát nghieäp – 2005 Vaät lieäu – Phöông phaùp Download» http://Agriviet.Com Hình 3.1: Quy trình khöû maãu. Trang 19 SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân
- Khoaù luaän toát nghieäp – 2005 Vaät lieäu – Phöông phaùp Download» http://Agriviet.Com 3.2 Thí nghieäm 2: Tìm moâi tröôøng thích hôïp ñeå gieo haït. a. Muïc ñích thí nghieäm. Tìm moâi tröôøng khoaùng thích hôïp ñeå gieo haït. b. Moâi tröôøng gieo haït. - Moâi tröôøng MS khoâng boå sung kích thích toá, kyù hieäu Mo. - Moâi tröôøng MS boå sung 1ppm BA, kyù hieäu laø M1. - Moâi tröôøng Knudson’C khoâng boå sung kích toá kyù hieäu Ko. - Moâi tröôøng Knudson’C boå sung 1ppm BA, kyù hieäu K1. c. Boá trí thí nghieäm. - Caùc quaû lan ñaõ ñöôïc khöû truøng töø thí nghieäm 1, seõ ñöôïc gieo vaøo 4 loaïi moâi tröôøng thöû nghieäm. - Theo doõi vaø ghi nhaän keát quaû sau 2-4 tuaàn - Thí nghieäm ñöôïc laëp laïi 2 laàn , moãi laàn 15 chai 100ml. d. Chæ tieâu theo doõi. - Thôøi gian haït naåy maàm. - Moâi tröôøng thích hôïp gieo haït Dendrobium. Trang 20 SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân
- Khoaù luaän toát nghieäp – 2005 Vaät lieäu – Phöông phaùp Download» http://Agriviet.Com 3.3 Thí nghieäm 3: Taïo Protocorm a. Muïc ñích thí nghieäm. So saùnh söï thaønh laäp protocorm treân hai moâi tröôøng khaùc nhau - vaø boå sung cuøng noàng ñoä kích thích toá. Tìm moâi tröôøng thích hôïp cho caùc thí nghieäm veà sau. - b. Moâi tröôøng nuoâi caáy. - Moâi tröôøng MS khoâng boå sung kích thích toá, kyù hieäu Mo. - Moâi tröôøng MS boå sung 2ppm BA, kyù hieäu laø M2. - Moâi tröôøng Knudson’C khoâng boå sung kích toá kyù hieäu Ko. - Moâi tröôøng Knudson’C boå sung 2ppm BA, kyù hieäu K2. c. Boá trí thí nghieäm. - Nhöõng maãu haït ñaõ phình to ra, coù maøu xanh, khoâng nhieãm töø thí nghieäm 2. - Theo doõi vaø ghi nhaän keát quaû sau 2-4 tuaàn nuoâi caáy. - Thí nghieäm ñöôïc laëp laïi 3 laàn, moãi laàn 8 chai 100ml. d. Chæ tieâu theo doõi - Thôøi gian taïo protocorm. - Moâi tröôøng taïo protocorm toát nhaát. - Tình traïng phaùt trieån cuûa prorocorm. Trang 21 SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân
- Khoaù luaän toát nghieäp – 2005 Vaät lieäu – Phöông phaùp Download» http://Agriviet.Com 3.4 Thí nghieäm 4: Nhaân protocorm a. Muïc ñích thí nghieäm. So saùnh söï nhaân protocorm treân cuøng moät loaïi moâi tröôøng vôùi noàng ñoä kích thích toá thay ñoåi. b. Moâi tröôøng nuoâi caáy. - Moâi tröôøng Knudson’C ñoái chöùng khoâng boå sung kích thích toá kyù hieäu K0. - Moâi tröôøng Knudson’C boå sung BA vôùi noàng ñoä 1ppm:2ppm:3ppm, kyù hieäu laø K1, K2, K3. - Moâi tröôøng Knudson’C boå sung 2ppm BA vaø IAA vôùi noàng ñoä 0.1ppm:0.5ppm:1ppm, kyù hieäu laø K4, K5, K6. c. Boá trí thí nghieäm. - Söû duïng caùc protocorm ñöôïc taïo thaønh töø thí nghieäm 3. - Theo doõi vaø ghi nhaän keát quaû sau 2-4 tuaàn nuoâi caáy. - Thí nghieäm ñöôïc laëp laïi 3 laàn, moãi laàn 3 chai 500ml. d. Chæ tieâu theo doõi. - Nhaän xeùt moâi tröôøng nhaân nhanh protocorm baät choài toát nhaát: thôøi gian ngaén nhaát cho caây coù chieàu cao 2-3 cm vaø coù 2-3 laù. - Söï taïo thaønh caây giöõa caùc moâi tröôøng. - Maøu saéc vaø chieàu daøi laù. - Thôøi gian xuaát hieän reã ñaàu tieân. Trang 22 SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân
- Khoaù luaän toát nghieäp – 2005 Vaät lieäu – Phöông phaùp Download» http://Agriviet.Com 3.5 Thí nghieäm 5: Ra reã a. Muïc ñích thí nghieäm. Khaûo saùt moâi tröôøng thích hôïp cho söï ra reã. b. Moâi tröôøng nuoâi caáy. - Moâi tröôøng Knudson’C ñoái chöùng khoâng boå sung kích thích toá kyù hieäu K0. - Moâi tröôøng Knudson’C boå sung NAA vôùi noàng ñoä 0.1ppm:0.5ppm:1ppm, kyù hieäu laø KN1, KN2, KN3. - Moâi tröôøng Knudson’C boå sung IAA vôùi noàng ñoä 0.1ppm:0.5ppm:1ppm, kyù hieäu laø KI1, KI2, KI3. - Moâi tröôøng Knudson’C boå sung IBA vôùi noàng ñoä 0.1ppm:0.5ppm:1ppm, kyù hieäu laø KB1, KB2, KB3. c. Boá trí thí nghieäm. - Nhöõng caây con coù chieàu cao töø 2-3 cm vaø coù 2-3 laù ñöôïc taïo thaønh töø thí nghieäm 4. - Theo doõi vaø ghi nhaän keát quaû sau 3-4 tuaàn nuoâi caáy. - Thí nghieäm ñöôïc laëp laïi 3 laàn, moãi laàn 3 chai 500 ml. d. Chæ tieâu theo doõi - Chieàu daøi reã. - Söï taêng tröôûng chieàu cao caây. Trang 23 SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân
- Khoùa luaän toát nghieäp – 2005 Keát quaû – Thaûo luaän Download» http://Agriviet.Com PHAÀN IV: KEÁT QUAÛ – THAÛO LUAÄN Thí nghieäm 1: Khöû truøng maãu. I. Quaû lan sau khi ñöôïc khöû truøng, gieo haït vaøo moâi tröôøng nuoâi caáy, sau 1 tuaàn keát quaû ghi nhaän ñöôïc nhö sau: N Noàng ñoä Thôøi Soáng vaø khoâng nhieãm Cheát vaø khoâng nhieãm Nhieãm T Ca(OCl)2 gian Soá löôïng Tyû leä Soá löôïng Tyû leä Soá löôïng Tyû leä (phuùt) (%) (%) (%) (%) 1 7 15 12 75 0 0 4 25 2 7 20 15 93,75 1 6,25 0 0 3 9 15 16 100 0 0 0 0 4 9 20 10 62,5 6 37,5 0 0 Baûng 1: Keát quaû khöû truøng maãu baèng Ca(OCl)2, sau 1 tuaàn. NT Soá laàn ñoát Soáng vaø khoâng nhieãm Cheát vaø khoâng nhieãm Nhieãm Soá löôïng Tyû leä Soá löôïng Tyû leä Soá löôïng Tyû leä (%) (%) (%) 1 1 16 100 0 0 0 0 2 2 10 62,5 6 37,5 0 0 Baûng 2: Keát quaû khöû truøng maãu baèng phöông phaùp ñoát, sau 1 tuaàn. Maãu haït lan ñöôïc gieo vaøo moâi tröôøng, sau 1 tuaàn khöû truøng, maãu baét ñaàu coù nhöõng bieåu hieän khaùc nhau: - Ñoái vôùi nhöõng maãu soáng vaø khoâng nhieãm, sau 1 tuaàn, haït daàn daàn thích nghi vôùi moâi tröôøng, baét ñaàu chuyeån sang maøu naâu vaøng maät ong. - Coøn vôùi nhöõng maãu haït bò aûnh höôûng bôûi Ca(OCl)2, vaø nhieät ñoä cao, haït chuyeån sang maøu traéng vaø naâu ñuïc, khoâng phaùt trieån. Keát quaû ghi nhaän ñöôïc ôû baûng 1 cho thaáy: - Noàng ñoä Ca(OCl)2 7%, thôøi gian khöû truøng laø 15 phuùt tyû leä haït soáng vaø khoâng nhieãm laø 75%, maãu khoâng bò cheát nhöng tyû leä Trang 30 SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân
- Khoùa luaän toát nghieäp – 2005 Keát quaû – Thaûo luaän Download» http://Agriviet.Com nhieãm cao (25%). Coøn vôùi thôøi gian khöû truøng 20 phuùt, tyû leä haït soáng khaù cao (93,75%), maãu hoaøn toaøn khoâng bò nhieãm, nhöng bò cheát (6,25%). - Khi khöû truøng ôû noàng ñoä taêng thì tyû leä maãu bò cheát taêng theo vaø soá maãu nhieãm giaûm daàn. Ôû noàng ñoä 9%, thôøi gian khöû truøng laø 15 phuùt, tyû leä haït soáng raát cao (100%), maãu haït gieo hoaøn toaøn khoâng bò nhieãm, khoâng cheát. Khi keùo daøi thôøi gian khöû truøng 20 phuùt, thì tyû leä maãu cheát taêng cao (37,5%). Khi ngaâm quaû lan trong dung dòch Ca(OCl)2, phaàn voû beân ngoaøi tieáp xuùc tröïc tieáp vôùi dung dòch khöû truøng, coøn phaàn haït beân trong khoâng bò aûnh höôûng. Khi gieo haït vaøo moâi tröôøng, haït coù khaû naêng phuïc hoài nhanh vaø naåy maàm. Tuy nhieân, neáu taêng noàng ñoä vaø keùo daøi thôøi gian khöû truøng, dung dòch seõ ngaám vaøo beân trong voû quaû, neân sau khi gieo vaøo moâi tröôøng, haït phuïc hoài raát chaäm vaø coù theå seõ bò cheát (hoùa traéng). Nhö vaäy, vôùi caùc noàng ñoä Ca(OCl)2 ñaõ ñöôïc söû duïng trong loaït thí nghieäm, thì noàng ñoä 9% trong thôøi gian 15 phuùt laø thích hôïp nhaát. Keát quaû ghi nhaän ñöôïc ôû baûng 2 cho thaáy: - Khöû truøng quaû lan baèng phöông phaùp ñoát coàn thì maãu haït gieo hoaøn toaøn khoâng bò nhieãm. Nhöng neáu tieán haønh ñoát 2 laàn thì tyû leä maãu cheát cao (37,5%), töông ñöông vôùi phöông phaùp khöû truøng baèng Ca(OCl)2 9%, trong thôøi gian 20 phuùt. - Khi ñoát moät laàn tyû leä maãu soáng laø 100%, töông öùng vôùi khi khöû truøng baèng Ca(OCl)2 9% trong thôøi gian 15phuùt. Khi nhuùng quaû lan vaøo coàn 900 vaø ñoát, thì phaàn voû quaû beân ngoaøi seõ bò aûnh höôûng tröïc tieáp cuûa nhieät ñoä cao, ñoàng thôøi seõ loaïi boû hoaøn toaøn caùc taùc nhaân gaây nhieãm beân ngoaøi voû. Nhöng neáu tieán haønh ñoát 2 laàn, nhieät ñoä cao cuøng vôùi thôøi gian keùo daøi seõ gaây aûnh höôûng ñeán haït beân trong, neân khi gieo vaøo moâi tröôøng, maãu haït phuïc hoài raát chaäm, hoaëc coù theå hoùa naâu, khoâng naûy maàm ñöôïc. Nhö vaäy, khi khöû truøng quaû lan baèng Ca(OCl)2 9% trong thôøi gian 15 phuùt vaø ñoát coàn moät laàn, tyû leä soáng, khoâng nhieãm laø nhö nhau. Tuy nhieân, duøng phöông phaùp ñoát coàn thì haït gieo phuïc hoài vaø naåy maàm nhanh hôn. Ngoaøi ra, phöông phaùp naøy coøn tieát kieäm nhieàu thôøi gian khöû truøng maãu, thao taùc ñôn giaûn hôn, kinh teá hôn. Toùm laïi: maãu khöû truøng laø quaû lan Dendrobium coøn xanh. Vì maãu haït gieo naèm beân trong, neân neáu tieán haønh röûa maãu kyõ vaø ñoát baèng coàn 1 laàn thì coù theå loaïi boû hoaøn toaøn caùc taùc nhaân gaây nhieãm. Haït khoâng bò aûnh höôûng vaø khi gieo vaøo moâi tröôøng seõ phuïc hoài raát nhanh. Trang 31 SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân
- Khoùa luaän toát nghieäp – 2005 Keát quaû – Thaûo luaän Download» http://Agriviet.Com Trang 32 SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân
CÓ THỂ BẠN MUỐN DOWNLOAD
-
Luận văn : Nhân giống lan Dendrobium bằng phương pháp gieo hạt in-vitro part 1
9 p | 255 | 82
-
Luận văn : Nhân giống lan Dendrobium bằng phương pháp gieo hạt in-vitro part 2
9 p | 176 | 66
-
Luận văn: Nhân giống lan Dendrobium bằng phương pháp gieo hạt in-vitro
42 p | 175 | 47
-
Luận văn Thạc sĩ Khoa học ngữ văn: Đặc điểm truyện ngắn Kim Lân
109 p | 213 | 42
-
Luận văn : Nhân giống lan Dendrobium bằng phương pháp gieo hạt in-vitro part 4
9 p | 173 | 42
-
Luận văn: ẢNH HƯỞNG CỦA CÁC CHẤT ĐIỀU HÒA SINH TRƯỞNG ĐẾN QUÁ TRÌNH NUÔI CẤY IN VITRO CỦA HAI GIỐNG LAN DENDROBIUM VÀ CYMBIDIUM (part 9)
9 p | 161 | 38
-
Luận văn : Nhân giống lan Dendrobium bằng phương pháp gieo hạt in-vitro part 5
6 p | 110 | 26
-
Khóa luận tốt nghiệp đại học: Nghiên cứu khả năng nhân giống lan hài Vân Nam (Paphiopedilum callosum) từ phôi bằng kỹ thuật nuôi cấy in vitro
56 p | 59 | 14
-
Luận văn Thạc sĩ Sinh học: Khảo sát tính thích nghi của cây hoàng lan [Cananga Odorata (lam.) hook. f. et thomson] tạo được từ các kỹ thuật nhân giống khác nhau tại tỉnh Bình Phước
80 p | 106 | 10
-
Luận văn Thạc sĩ Sinh học ứng dụng: Nghiên cứu nhân giống in vitro lan Hoàng thảo phi điệp tím (Dendrobium anosmum Lindl.)
51 p | 44 | 6
-
Luận văn Thạc sĩ Sinh học ứng dụng: Nghiên cứu hoàn thiện quy trình nhân giống in vitro lan Hoàng thảo thạch hộc tía (Dendrobium nobile Lindl)
50 p | 56 | 6
-
Luận văn Thạc sĩ Công nghệ sinh học: Nghiên cứu xác định một số đoạn ADN mã vạch và nhân giống lan Phi điệp tím Hòa Bình (Dendrobium anosmun Lindley) bằng kỹ thuật nuôi cấy mô tế bào
86 p | 29 | 6
-
Luận văn Thạc sĩ Sinh học ứng dụng: Nghiên cứu khả năng nhân nhanh lan Hài Giáp (Paphiopedilum malipoense) bằng phương pháp in vitro
84 p | 39 | 5
-
Luận văn Thạc sĩ Khoa học lâm nghiệp: Nghiên cứu bảo tồn loài Lan một lá (Nervilia fordii (Hance) Schlechter) tại Vườn quốc gia Cát Bà, Hải Phòng
135 p | 25 | 4
-
Luận văn Thạc sĩ Quản lý tài nguyên rừng: Nghiên cứu bảo tồn hai loài lan quý hiếm: Lan hài vân bắc (Paphiopedilum callosum (Rchb.f.) Pfitzer), Lan hài lông (Paphiopedilum hirsutissimum (Lindl.ex Hook.) Stein.) tại Khu bảo tồn thiên nhiên Xuân Liên, tỉnh Thanh Hóa
81 p | 20 | 4
-
Luận văn Thạc sĩ Khoa học: Nghiên cứu ảnh hưởng của một số nhân tố sinh thái đến khả năng sinh trưởng của loài lan Gấm (Ludisia discolor (Ker-Gawl.) A.Rich.) nuôi cấy mô tại Đà Nẵng
89 p | 17 | 4
-
Tóm tắt luận văn Tiến sĩ Nông nghiệp: Nghiên cứu tuyển chọn và biện pháp nhân một số giống lan Hồ điệp ở miền Bắc Việt Nam
24 p | 53 | 2
Chịu trách nhiệm nội dung:
Nguyễn Công Hà - Giám đốc Công ty TNHH TÀI LIỆU TRỰC TUYẾN VI NA
LIÊN HỆ
Địa chỉ: P402, 54A Nơ Trang Long, Phường 14, Q.Bình Thạnh, TP.HCM
Hotline: 093 303 0098
Email: support@tailieu.vn