intTypePromotion=1
zunia.vn Tuyển sinh 2024 dành cho Gen-Z zunia.vn zunia.vn
ADSENSE

Luận văn : Nhân giống lan Dendrobium bằng phương pháp gieo hạt in-vitro part 4

Chia sẻ: Asdfadf Adgsg | Ngày: | Loại File: PDF | Số trang:9

174
lượt xem
42
download
 
  Download Vui lòng tải xuống để xem tài liệu đầy đủ

Sự nảy mầm của hạt lan trên môi trường Knudson’C và MS bổ sung 1 ppm BA. Một tuần sau khi gieo vào môi trường, tất cả mẫu hạt lan đều hóa nâu vàng. Sau 2 tuần, mẫu bắt đầu có hiện tượng nẩy mầm và có sự khác biệt rõ rệt giữa các loại môi trường khác nhau. Sau 4 tuần, những hạt có màu hơi vàng, dần chuyển sang xanh

Chủ đề:
Lưu

Nội dung Text: Luận văn : Nhân giống lan Dendrobium bằng phương pháp gieo hạt in-vitro part 4

  1. Khoùa luaän toát nghieäp – 2005 Keát quaû – Thaûo luaän Download» http://Agriviet.Com Thí nghieäm 2: II. Caùc quaû lan sau khi ñöôïc khöû truøng seõ ñöôïc gieo vaøo 4 loaïi moâi tröôøng khaùc nhau, ñöôïc theo doõi sau 4 tuaàn nuoâi caáy: Soá maãu Soá maãu Soá maãu Moâi tröôøng Kyù hieäu Noàng ñoä hoùa xanh naûy maàm hoùa naâu BA (4 tuaàn) (2 tuaàn) (1 tuaàn) (ppm) % % % MS M0 0 100 83,33 93,33 M1 1 100 90 100 KC K0 0 100 50 63,33 K1 1 100 43,33 80 Baûng 3: Söï naûy maàm cuûa haït lan treân moâi tröôøng Knudson’C vaø MS boå sung 1 ppm BA. - Moät tuaàn sau khi gieo vaøo moâi tröôøng, taát caû maãu haït lan ñeàu hoùa naâu vaøng. - Sau 2 tuaàn, maãu baét ñaàu coù hieän töôïng naåy maàm vaø coù söï khaùc bieät roõ reät giöõa caùc loaïi moâi tröôøng khaùc nhau. - Sau 4 tuaàn, nhöõng haït coù maøu hôi vaøng, daàn chuyeån sang xanh do coù söï tieáp xuùc vôùi aùnh saùng, taïo ñöôïc dieäp luïc toá. Döïa vaøo baûng keát quaû, chuùng toâi nhaän thaáy: - Haït gieo trong moâi tröôøng MS coù tyû leä naåy maàm raát cao (80- 90%), haàu nhö taát caû caùc maãu haït ñeàu coù hieän töôïng phình leân vaø chuyeån sang vaøng. Trong khi ñoù, maãu haït gieo trong moâi tröôøng Knudson’C, tyû leä naåy maàm raát thaáp (40-50%). Trong thôøi ñieåm naøy haàu nhö khoâng coù söï khaùc bieät giöõa loaïi moâi tröôøng coù vaø khoâng coù kích thích toá. Coù theå trong thôøi ñieåm naøy, kích thích toá khoâng coù aûnh höôûng gì maáy ñoái vôùi khaû naêng naåy maàm cuûa haït. - Sau 4 tuaàn, haït lan hoùa xanh. Trong moâi tröôøng MS coù boå sung BA 1ppm, taát caû maãu haït ñeàu hoùa xanh. neáu khoâng coù kích thích toá tyû leä naøy laø 93,33%. Trong moâi tröôøng KC, tyû leä maãu hoùa xanh thaáp hôn, ôû ñaây coù söï khaùc bieät roõ reät giöõa moâi tröôøng coù vaø khoâng coù kích thích toá. Moâi tröôøng KC coù BA tyû leä naåy maàm cao hôn (80%) so vôùi khoâng coù BA (63,33%). Trong giai ñoaïn naøy, vai troø cuûa kích thích toá ñaõ coù bieåu hieän roõ reät. Caùc maãu haït Trang 33 SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân
  2. Khoùa luaän toát nghieäp – 2005 Keát quaû – Thaûo luaän Download» http://Agriviet.Com gieo trong moâi tröôøng coù kích thích toá, coù maøu xanh ñaäm hôn, haït phình to hôn Töø caùc keát quaû ghi nhaän ñöôïc cho thaáy, ôû cuøng noàng ñoä kích thích toá, nhöng treân moâi tröôøng MS coù noàng ñoä khoaùng cao hôn, thì haït lan naåy maàm nhanh hôn so vôùi moâi tröôøng Knudson’C. Vaäy, moâi tröôøng MS coù 1 ppm BA cho söï naåy maàm cuûa haït lan Dendrobium toát hôn so vôùi moâi tröôøng Knudson’C. Trang 34 SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân
  3. Khoùa luaän toát nghieäp – 2005 Keát quaû – Thaûo luaän Download» http://Agriviet.Com Thí nghieäm 3: III. Caùc maãu haït lan sau khi ñaõ hoùa xanh, ñöôïc caáy chuyeàn qua caùc moâi tröôøng khaùc nhau ñeå taïo protocorm, ñöôïc theo doõi sau 4 tuaàn nuoâi caáy: Moâi tröôøng Kyù hieäu Noàng ñoä BA Tình traïng taïo protocorm (ppm) Sau 2 tuaàn Sau 4 tuaàn MS M0 0 0 + M2 2 + + KC K0 0 + ++ K2 2 ++ +++ Baûng 4: Keát quaû taïo protocorm treân moâi tröôøng Knudson’C vaø MS boå sung 2 ppm BA. Vôùi 0 : khoâng coù söï taïo protocorm. + : taïo thaønh protocorm raát ít. ++ : taïo thaønh protocorm nhieàu. +++ : taïo thaønh protocorm raát nhieàu. - Tuaàn ñaàu tieân treân caû 4 moâi tröôøng ñeàu khoâng taïo protocorm. - Sau 2 tuaàn, haït gieo baét ñaàu bieán ñoåi taïo thaønh moät ñaùm teá baøo coù maøu xanh. - Soá löôïng protocorm ngaøy caøng taêng nhanh sau 3-4 tuaàn, phình to leân, vaø coù laù maàm. Döïa vaøo baûng keát quaû chuùng toâi nhaän thaáy: - Hai tuaàn sau khi caáy, moâi tröôøng MS, haït lan khoâng coù söï bieán ñoåi roõ reät, taïo thaønh raát ít protocorm. Sau boán tuaàn, soá löôïng protocorm taïo thaønh nhieàu, ñöôøng kính nhoû, maøu xanh hôi traéng, laù maàm daøi khoaûng 3-4 mm vaø raát ít . - Trong khi ñoù ôû moâi tröôøng Knudson’C, sau hai tuaàn taát caû caùc haït lan ñeàu bieán ñoåi roõ reät, ñöôøng kính protocorm khoaûng 2mm, treân protocorm coù loâng huùt. Sau 4 tuaàn, soá löôïng protocorm trong moâi tröôøng Knudson’C phaùt trieån nhanh, maøu xanh, laù maàm daøi khoaûng 5-7 mm. Trang 35 SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân
  4. Khoùa luaän toát nghieäp – 2005 Keát quaû – Thaûo luaän Download» http://Agriviet.Com - Trong moâi tröôøng Knudson’C coù chöùa BA, maëc duø soáù löôïng protocorm taïo ra töông ñöông vôùi moâi tröôøng khoâng chöùa BA. Nhöng protocorm phaùt trieån töông ñoái nhanh hôn, söï taêng tröôûng cuûa protocorm ñoàng ñeàu vôùi nhau, coù nhieàu laù maàm khoûe, maøu xanh töôi. Trong moâi tröôøng coù chöùa kích thích toá BA, laø moät cytokinin coù khaû naêng kích thích vaø ñieàu chænh söï phaân baøo, taêng söï chuyeån hoùa chaát dinh döôõng [10]. Toùm laïi: - Töø nhöõng keát quaû ghi nhaän ñöôïc veà thôøi gian vaø soá löôïng protocorm taïo thaønh ta coù theå keát luaän raèng: söï taïo protocorm trong moâi tröôøng Knudson’C coù boå sung kích thích toá BA laø toát nhaát. - Do söï taïo thaønh protocorm trong moâi tröôøng Knudson’C toát hôn, neân taát caû caùc thí nghieäm veà sau, chuùng toâi chæ thöïc hieän treân moâi tröôøng Knudson’C. Trang 36 SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân
  5. Khoùa luaän toát nghieäp – 2005 Keát quaû – Thaûo luaän Download» http://Agriviet.Com Trang 37 SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân
  6. Khoùa luaän toát nghieäp – 2005 Keát quaû – Thaûo luaän Download» http://Agriviet.Com Thí nghieäm 4: IV. Caùc protocorm ñöôïc taïo thaønh töø haït coù chaát löôïng nhö nhau ñöôïc ñöa vaøo caùc thí nghieäm nhaân protocorm, sau 4 tuaàn theo doõi keát quaû ghi nhaän ñöôïc nhö sau: Kích Noàng ñoä Kyù Soá löôïng Chieàu cao Chieàu daøi Ghi chuù thích toá (ppm) hieäu choài môùi choài (cm) laù (cm) 0 0 K0 0 0 0 Protocorm nhoû, ít. 1 K1 1-2 1,5-2 0,5-0,7 Protocorm môùi xanh, nhöng ít. BA 2 K2 4-6 1,5-2,5 0,5-0,7 Protocorm nhieàu, to, xanh, coù loâng huùt. 3 K3 1-2 1,3-1,5 0,5-0,7 Protocorm nhieàu nhöng nhoû. 2ppm 0,1 K4 4-6 2-3,5 1,5-2 Protocorm xanh, to, BA + coù loâng huùt, nhöng ít IBA 0,5 K5 5-7 3-4 2-3 Protocorm xanh, nhöng ít 1 K6 4-5 2-3 1,5-2,5 Protocorm nhoû, hôi vaøng, ít Baûng 5: Keát quaû nhaân protocorm treân moâi tröôøng Knudson’C vôùi kích thích toá khaùc nhau. - Sau 2 tuaàn, baét ñaàu xuaát hieän protocorm môùi, coù loâng huùt. Soá löôïng vaø kích thöôùc thay ñoåi tuyø theo moâi tröôøng. - Sau 3 tuaàn, coù moät soá protocorm baät choài môùi. - Sau 4 tuaàn caùc choài môùi phaùt trieån maïnh, tuyø theo moâi tröôøng maø soá löôïng vaø chieàu cao choài môùi khaùc nhau. Döïa vaøo baûng keát quaû chuùng toâi nhaän thaáy: - Sau 2 tuaàn, moâi tröôøng K1, khoâng thaáy söï xuaát hieän cuûa protocorm môùi. Sang ñeán tuaàn thöù 3, môùi xuaát hieän protocorm môùi. Soá löôïng protocorm môùi taïo thaønh raát ít, coù maøu xanh. Moät soá protocorm baät choài vaøo giöõa tuaàn thöù 4, nhöng soá löôïng naøy raát ít, chæ khoaûng 1-2 choài. - Ôû moâi tröôøng K2, söï nhaân protocorm dieãn ra nhanh vaø maïnh. Sau 2 tuaàn, ñaõ xuaát hieän nhieàu protocorm môùi. Sau 4 tuaàn, soá löôïng protocorm môùi taïo thaønh raát nhieàu, caùc protocorm naøy xanh möôùt, to, xung quanh coù nhieàu loâng tô traéng mòn. Vaøo giöõa Trang 38 SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân
  7. Khoùa luaän toát nghieäp – 2005 Keát quaû – Thaûo luaän tuaàn thöù 3, coù moät soá protocorm môùi baät choài, tuy soá löôïng choài nhieàu, nhöng chieàu cao choài raát thaáp. - Soá löôïng protocorm môùi taïo thaønh nhieàu ôû moâi tröôøng K3, sau 2 tuaàn, ñaõ xuaát hieän nhöõng protocorm môùi. Sang ñeán tuaàn 4, soá löôïng protocorm ñaõ raát nhieàu, tuy nhieân caùc protocorm naøy nhoû, coù moät soá protocorm coù maøu traéng. Haàu heát caùc protocorm môùi ñeàu khoâng baät choài. Trong caùc moâi tröôøng K1, K2, K3, döôùi taùc duïng cuûa kích thích toá BA, caùc maãu caáy ñeàu taïo thaønh protocorm môùi. Caùc protocorm taïo thaønh caøng nhieàu khi noàng ñoä kích thích toá taêng leân, nhöng chaát löôïng protocorm thì ngöôïc laïi (protocorm nhoû vaø traéng). Nhö vaäy, vôùi noàng ñoä kích thích toá thích hôïp seõ taùc ñoäng toát ñeán söï phaân chia teá baøo, nhöng khi noàng ñoä khaù cao, thì cuõng coù theå gaây ñoäc. - Sau 2 tuaàn, trong caùc moâi tröôøng K4, K5, K6, ñaõ thaáy xuaát hieän protocorm môùi. Tuy nhieân, sau 4 tuaàn, soá löôïng protocorm naøy haàu nhö khoâng ñoåi. Trong moâi tröôøng K5 vaø K6, caùc protocorm coù maøu xanh möôùt, to, coù loâng huùt. Soá löôïng protocorm trong moâi tröôøng K6, ít hôn, protocorm coù maøu xanh hôi vaøng, nhoû. - Sang ñeán tuaàn thöù 3, caùc protocorm baät choài, sang ñeán tuaàn thöù 4 caùc protocorm phaùt trieån maïnh, giai ñoaïn naøy haàu heát caùc maãu haïn cheá taïo protocorm maø chæ chuû yeáu taïo choài. So saùnh giöõa cacù moâi tröôøng, thì moâi tröôøng K5 taïo theâm nhieàu choài môùi hôn, caùc choài môùi coù maøu xanh möôùt, vaø khi baät choài thì choài xanh toát vaø ñoàng loaït hôn hai moâi tröôøng coøn laïi, coù moät soá choài coù reã nhoû, maøu traéng, daøi töø 0,1-0,3 cm. Coù söï khaùc bieät roõ reät veà soá löôïng choài môùi, chieàu cao choài vaø chieàu daøi laù giöõa caùc moâi tröôøng chæ coù kích thích toá BA, vaø caùc moâi tröôøng coù BA vaø IAA. Ôû caùc moâi tröôøng chæ coù BA, sang ñeán tuaàn thöù 4, caùc protocorm môùi baät choài, nhöng soá löôïng raát ít, choài phaùt trieån chaäm, vaø thaáp. Caùc moâi tröôøng naøy chæ chuû yeáu taïo theâm protocorm môùi, ít taïo choài. Trong khi ñoù, caùc moâi tröôøng coù BA vaø IAA, caùc maãu caáy chuû yeáu taïo choài, haïn cheá vieäc taïo thaønh protocorm. Nhö vaäy, chuùng toâi nhaän thaáy, söï keát hôïp giöõa BA vaø IAA thì coù lôïi hôn cho vieâc taïo choài môùi, phaùt trieån caây con ñeå söû duïng cho caùc thí nghieäm veà sau. Toùm laïi: - Ñoái vôùi thí nghieäm nhaân protocorm, thì söû duïng moâi tröôøng K2 vaø K5 ñeàu toát, nhöng neáu söû duïng moâi tröôøng K5, thì seõ taïo thaønh nhieàu choài môùi hôn, coù chieàu cao, vaø thích hôïp cho thí nghieäm ra reã sau ñoù. - Neáu söû duïng moâi tröôøng K5 cho quaù trình nhaân gioáng thì heä soá nhaân laø: Trang 39 SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân
  8. Khoùa luaän toát nghieäp – 2005 Keát quaû – Thaûo luaän Cuïm choài ban ñaàu ñöôïc taùch laøm 3, caáy chuyeàn sang moâi tröôøng K5. Sau 4 tuaàn, töø moät cuïm choài, thu ñöôïc 4 choài cao 3-4 cm. Nhö vaäy veà maët lyù thuyeát, ta tính ñöôïc heä soá nhaân choài laø 3x412 choài/naêm. Sau 6 tuaàn, caùc caây con coù chieàu cao 3-4 cm vaø coù 2-3 laù ñöôïc taùch ra ñeå ñöa vaøo thí nghieäm taïo reã. Caùc choài thaáp cuõng ñöôïc taùch ra, tieáp tuïc ñöa vaøo moâi tröôøng K5, ñeå phaùt trieån chieàu cao. Caùc protocorm coøn laïi cuõng ñöïôc taùch ra vaø ñöa vaøo moâi tröôøng K2. Trang 40 SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân
  9. Khoùa luaän toát nghieäp – 2005 Keát quaû – Thaûo luaän Trang 41 SVTH: Nguyeãn Vuõ thò Hoaøng Uyeân
ADSENSE

CÓ THỂ BẠN MUỐN DOWNLOAD

 

Đồng bộ tài khoản
2=>2