Xây dựng quy trình định lượng coixol trong Cam thảo nam (Scoparia dulcis L., Scropulariaceae) bằng phương pháp sắc kí lỏng hiệu năng cao

Y Học TP. Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số 2 * 2019 Nghiên cứu Y học<br /> <br /> <br /> XÂY DỰNG QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG COIXOL<br /> TRONG CAM THẢO NAM (SCOPARIA DULCIS L., SCROPULARIACEAE)<br /> BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÍ LỎNG HIỆU NĂNG CAO<br /> Phạm Thị Thanh Hương*, Trần Thị Vân Anh*<br /> <br /> TÓMTẮT<br /> Mở đầu: Cam thảo nam (Scoparia dulcis L. Scrophulariaceae) là dược liệu được sử dụng khá phổ biến<br /> nhưng tiêu chuẩn kiểm soát chất lượng vẫn chưa được nâng cao. Đề tài thực hiện nghiên cứu xây dựng quy<br /> trình định lượng coixol (một alcaloid chính trong Cam thảo nam) bằng phương pháp sắc kí lỏng hiệu năng<br /> cao nhằm nâng cao tiêu chuẩn kiểm nghiệm dược liệu.<br /> Mục tiêu: Xây dựng và thẩm định qui trình định lượng coixol trong Cam thảo nam. Áp dụng qui<br /> trình đã xây dựng và thẩm định để định lượng coixol trong các mẫu thu hái ở các thời điểm và địa phương<br /> khác nhau<br /> Đối tượng – Phương pháp nghiên cứu: Đối tượng nghiên cứu là hàm lượng coixol có trong Cam thảo<br /> nam. Nghiên cứu các điều kiện của quy trình xử lý mẫu và điều kiện sắc kí để định lượng coixol trong S.<br /> dulcis bằng phương pháp sắc kí lỏng hiệu năng cao<br /> Kết quả: Xác định điều kiện phân tích sắc kí: Cột Cosmosil 2,5 Chlolester (75 x 2,0 mm; 2,5 µm);<br /> nhiệt độ cột 35 oC; tốc độ dòng: 0,45 mL/phút; thể tích tiêm mẫu 1 µl; bước sóng phát hiện: 230 nm;<br /> chương trình rửa giải (A: nước, B: ACN) 0-3 phút: 5 % B, 3-14 phút: 5-15 % B, 14-15 phút; 15-90 % B,<br /> 15-24 phút; 90 % B. Qui trình định lượng đều đạt các chỉ tiêu đánh giá về tính phù hợp của hệ thống, tính<br /> đặc hiệu, độ đúng, độ chính xác và tính tuyến tính. Đã áp dụng quy trình đã xây dựng và thẩm định để<br /> khảo sát hàm lượng coixol trong các mẫu Cam thảo nam thu hái ở thời điểm và địa phương khác nhau. Hàm<br /> lượng coixol trong các mẫu dao động trong khoảng 0,61 – 2,14 mg/g<br /> Kết luận: Đề tài đã xây dựng qui trình định lượng coixol trong Cam thảo nam bằng phương pháp<br /> UPLC-PDA làm cơ sở cho việc nâng cao tiêu chuẩn kiểm nghiệm dược liệu<br /> Từ khóa: Cam thảo nam, định lượng coixol, UPLC<br /> ABSTRACT<br /> QUANTIFICATION OF COIXOL IN SCOPARIA DULCIS<br /> BY HIGH PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY<br /> Pham Thi Thanh Huong, Tran Thi Van Anh<br /> * Ho Chi Minh City Journal of Medicine * Supplement of Vol. 23 - No 2- 2019: 101-107<br /> <br /> Background: Sweet-broom (Scoparia dulcis L., Scrophulariaceae) is used widely as a medicinal herb;<br /> however, the quality control standards of S. dulcis have not been improved. Therefore, the aim of this study<br /> is to develop a method for the quantification of coixol (a major alkaloid in S. dulcis) by UPLC-PDA<br /> Objectives: This research aims to develop and validate a method for the determination of coixol in<br /> S. dulcis and apply the method for quantifying of coixol in different materials.<br /> Methods: The subject of this study was the content of coixol in S. dulcis. The method for preparation<br /> samples and the UPLC chromatographic conditions for determination of coixol in S. dulcis were studied.<br /> *<br /> Khoa Dược, Đại học Y Dược Thành phố Hồ Chí Minh<br /> Tác giả liên lạc: TS. Trần Thị Vân Anh ĐT: 0918852989 Email: ttvananh@ump.edu.vn<br /> <br /> Chuyên Đề Dược 101<br /> Nghiên cứu Y học Y Học TP. Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số 2 * 2019<br /> <br /> Results: A simple UPLC method was developed for quantitative determination of coixol in S.<br /> dulcis following chromatographic conditions: Cosmosil 2,5 Cholester column (2,0 ID x 75 mm; 2,5<br /> µm), mobile phase in gradient mode including mixture of water (A) and acetonitrile (B) with the<br /> program 0 - 3 min.: 5 % B, 3 - 14 min.: 5 – 15 % B, 14 - 15 min.: 15 – 90 % B, 24 min.: 90 % B, flow<br /> rate of 0.45 mL/min., detection wavelength of 230 nm. This procedure meets all requirements of<br /> system suitability and quantitative method validation such as linearity, specificity, precision and<br /> accuracy. This method was applied for analyzing different S. dulcis samples. The contents of coixol in<br /> S. dulcis were in range 0.61 –2.14 mg/g<br /> Conclusion: The validated method for determination of coixol in S. dulcis could be used in quality<br /> control of herbal materials.<br /> Key words: Scoparia dulcis, quantification of coixol, UPLC<br /> ĐẶTVẤNĐỀ ĐỐITƯỢNG-PHƯƠNGPHÁPNGHIÊNCỨU<br /> Cam thảo nam (Scoparia dulcis L. Đối tượng nghiên cứu<br /> Scrophulariaceae) là một dược liệu được sử Coixol trong các mẫu CTN (toàn cây)<br /> dụng lâu đời trong y học dân gian ở Việt Nam thu hái tại Tp Hồ Chí Minh trong 12 tháng<br /> và các nước trên thế giới như Ấn Độ, Brazil, (10/2017- 9/2018), và các mẫu thu hái ở 11<br /> Colombia, Nhật Bản…với các công dụng như tỉnh vào tháng 3/2018 (HT: Hà Tĩnh, KH:<br /> trị tiểu đường, trị loét dạ dày, trị rắn cắn, giảm Khánh Hòa, LĐ: Lâm Đồng, ĐL: Đắc Lắc;<br /> đau, hạ sốt, làm mát cơ thể…(7). Cam thảo nam GL: Gia Lai; TN: Tây Ninh; BD: Bình Dương;<br /> được sử dụng khá phổ biến, tuy nhiên tiêu ĐN-1: Biên Hòa-Đồng Nai, ĐN-2: Cẩm Mỹ-<br /> chuẩn kiểm soát chất lượng S. dulcis vẫn chưa Đồng Nai; LA: Long An) . Mẫu được xay<br /> được nâng cao. Trong Dược điển Việt Nam V nhỏ, rây qua rây 0,425 mm và xác định mất<br /> ban hành năm 2018, chuyên luận về Cam thảo khối lượng do làm khô.<br /> nam chỉ dừng ở chỉ tiêu định lượng chất chiết<br /> Thiết bị phân tích<br /> được trong dược liệu(2).<br /> Hệ thống sắc kí lỏng hiệu năng cao<br /> Nhiều nghiên cứu cho thấy thành phần Acquity UPLC (Waters), đầu dò PDA; cột<br /> hóa học của S. dulcis khá đa dạng gồm nhiều Cosmosil 2,5 Cholester (75 x 2,0 mm; 2,5 µm);<br /> nhóm hợp chất khác nhau như terpenoid, cân phân tích Sartorius BP-221S (0,01 mg).<br /> alcaloid, flavonoid và một số chất khác(6).<br /> Dung môi-hóa chất<br /> Trong đó, coixol là một alcaloid chính trong S.<br /> dulcis với nhiều tác dụng dược lý đã được Acetonitril, methanol đạt chuẩn HPLC<br /> chứng minh như hạ đường huyết, kháng (Merck); nước cất 2 lần dùng cho sắc kí lỏng;<br /> khuẩn, kháng nấm, kháng virus HIV, điều hòa Chất đối chiếu coixol phân lập từ S. dulcis đạt<br /> bài tiết chất nhầy đường hô hấp, điều hòa thần độ tinh khiết (98,1%).<br /> kinh(1,3,5,6,8). Coixol đáp ứng được tiêu chí của Phương pháp nghiên cứu<br /> một chất marker có thể sử dụng trong việc tiêu Khảo sát qui trình chiết xuất coixol từ<br /> chuẩn hóa dược liệu S. dulcis. CTN: khảo sát các yếu tố bao gồm dung<br /> Để nâng cao tiêu chuẩn kiểm soát chất môi chiết, thời gian chiết, số lần chiết). Sử<br /> lượng dược liệu, đề tài này được thực hiện dụng mẫu CTN thu hái vào tháng 10/2018<br /> nhằm tạo cơ sở cho việc bổ sung chỉ tiêu định tại TP. Hồ Chí Minh để thực hiện khảo sát.<br /> lượng bằng phương pháp sắc kí lỏng hiệu Dựa trên sắc ký đồ kiểm tra pic coixol với<br /> năng cao trong chuyên luận kiểm nghiệm mẫu đối chiếu; so sánh diện tích pic coixol<br /> dược liệu Cam thảo nam (CTN). giữa các lần thử nghiệm.<br /> <br /> <br /> 102 Chuyên Đề Dược<br /> Y Học TP. Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số 2 * 2019 Nghiên cứu Y học<br /> <br /> Xây dựng và thẩm định qui trình định phút/65 phút/85 phút) ở nhiệt độ 40 oC. Kết<br /> lượng coixol trong CTN: thăm dò điều kiện quả chọn thời gian chiết 45 phút là tối ưu.<br /> sắc kí (pha động, kỹ thuật rửa giải) với mục Thăm dò nhiệt độ chiết<br /> đích tách pic coixol hoàn toàn (Rs>1,5) với các<br /> Sử dụng MeOH 100% làm dung môi<br /> pic lân cận trong khi mẫu thử. Qui trình được<br /> chiết, chiết ở 45 phút với nhiệt độ thay đổi là<br /> thẩm định tính phù hợp hệ thống, tính đặc<br /> (35 oC/40 oC/50 oC/60 oC). Kết quả khảo sát cho<br /> hiệu, khoảng tuyến tính, độ chính xác và độ<br /> thấy chiết ở nhiệt độ 40 oC cho diện tích pic<br /> đúng theo hướng dẫn của ICH(4).<br /> coixol lớn nhất.<br /> Hàm lượng coixol trong S. dulcis được tính<br /> Thăm dò tỉ lệ dung môi; dược liệu, số lần<br /> theo công thức:<br /> chiết<br /> Chiết mẫu dược liệu với tỉ lệ dược liệu: dung<br /> môi (30 mg: 1,5 ml) các lần chiết 1, 2, 3 đều có<br /> Với : hàm lượng coixol có trong dược hiện diện của pic coixol. Để thuận lợi cho việc xử<br /> liệu (mg/g), : Diện tích pic của mẫu thử (µV lý mẫu, tăng tỉ lệ dược liệu: dung môi (30 mg: 3<br /> x s), : Diện tích pic của mẫu chuẩn (µV x s), ml), sau khi chiết lần 1 với điều kiện đã chọn,<br /> Nồng độ của mẫu chuẩn (mg/ml), : Độ mẫu được ly tâm, bã dược liệu được chiết lần 2<br /> pha loãng của mẫu đo, : Khối lượng dược và lần 3 với 2 ml dung môi. Kết quả cho thấy lần<br /> liệu (mg), : Độ ẩm dược liệu (%), : Hàm chiết thứ 2, pic coixol chỉ chiếm 1,84%. Như vậy<br /> lượng chất đối chiếu (%). có thể chiết kiệt coixol trong 1 lần chiết, thuận<br /> Áp dụng quy trình đã xây dựng và thẩm tiện cho việc xử lý mẫu.<br /> định để khảo sát hàm lượng coixol trong các Kết quả khảo sát các điều kiện chiết coixol<br /> mẫu Cam thảo nam thu hái tại Tp Hồ Chí từ dược liệu (quy trình xử lý mẫu) trình bày<br /> Minh trong 12 tháng (10/2017 – 9/2017) và mẫu tóm tắt ở Bảng 1.<br /> Cam thảo nam thu hái tạo 12 địa phương vào Bảng 1: Kết quả khảo sát các điều kiện xử lý mẫu<br /> tháng 3/2018. ACN MeOH MeOH MeOH<br /> Dung môi<br /> 100% 100% 90% 80%<br /> KẾTLUẬN Diện tích pic coixol 176637 267393 2657908 259075<br /> Kết quả khảo sát quy trình chiết xuất coixol Thời gian chiết 25 phút 45 phút 65 phút 85 phút<br /> Diện tích pic coixol 250877 253807 25342 245027<br /> từ CTN o o o o<br /> Nhiệt độ chiết 35 C 40 C 50 C 60 C<br /> Thăm dò dung môi chiết Diện tích pic coixol 277383 281318 244950 234015<br /> Cân chính xác 30 mg dược liệu Cam thảo Số lần chiết Lần 1 Lần 2 Lần 3<br /> Không<br /> nam vào ống nghiệm có nắp vặn, thêm chính Diện tích pic coixol<br /> 64780 1220<br /> phát<br /> (98,15% (1,84%)<br /> xác 1,5 ml dung môi (acetonitril/MeOH 100%/ hiện<br /> MeOH-H2O (9:1)/ MeOH-H2O (8:2). Siêu âm 30 Từ kết quả khảo sát, qui trình chiết coixol<br /> phút, lọc dịch chiết qua màng lọc 0,22 µm, được xác định: Cân chính xác 30 mg bột dược<br /> dịch lọc được tiêm vào máy UPLC và phân liệu CTN cho vào ống nghiệm có nắp 5 ml,<br /> tích. Kết quả chọn dung môi MeOH chiết được thêm chính xác 3 ml methanol 100%, siêu âm<br /> coixol trong mẫu tốt nhất. 45 phút ở 40 oC. Lọc qua màng lọc milipore<br /> Thăm dò thời gian chiết cellulose acetate 0,22 µm, dịch lọc tiêm vào hệ<br /> Sử dụng MeOH 100% làm dung môi chiết, thống sắc kí, phân tích theo các điều kiện<br /> thay đổi thời gian chiết lần lượt là (25 phút/45 đã chọn.<br /> <br /> <br /> <br /> <br /> Chuyên Đề Dược 103<br /> Nghiên cứu Y học Y Học TP. Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số 2 * 2019<br /> <br /> Khảo sát các điều kiện sắc kí tách pic coixol Kết quả thẩm định qui trình<br /> tronng mẫu thử Tính phù hợp hệ thống<br /> Sau khi tiến hành thăm dò, điều kiện sắc Tiến hành phân tích 6 lần mẫu CTN chiết<br /> kí được lựa chọn như sau: cột Cosmosil 2,5 theo qui trình trên để kiểm tra tính phù hợp<br /> Cholester (75 x 2,0 mm; 2,5 µm), nhiệt độ cột hệ thống. Phép thử chỉ có giá trị khi pic<br /> 30 oC, tốc độ dòng: 0,45 ml/phút, thể tích coixol và các pic lân cận tách hoàn toàn<br /> tiêm mẫu: 1µl, bước sóng phát hiện 230 nm, (Rs>1,5)<br /> pha động A (H2O), B (ACN), chương trình<br /> Kết quả thực nghiệm cho thấy giá trị RSD<br /> rửa giải 0 – 3 phút: 5% B, 3 – 14 phút: 5 -15 %<br /> % của thời gian lưu và diện tích pic đều 1,5<br /> B. Cân bằng cột trong vòng 5 phút giữa 2 lần<br /> (Bảng 2). Như vậy quy trình đạt tính phù hợp<br /> chạy liên tiếp.<br /> hệ thống<br /> Bảng 2: Kết quả thẩm định tính phù hợp hệ thống của quy trình<br /> Lần tiêm mẫu S Rt N k' As α Rs<br /> Lần 1 71216 10,40 19036,37 44,22 1,17 1,25 4,74<br /> Lần 2 73501 10,38 19147,83 44,10 1,16 1,25 5,11<br /> Lần 3 73884 10,40 19176,85 44,24 1,17 1,33 9,07<br /> Lần 4 73706 10,41 19311,4 44,27 1,16 1,33 9,15<br /> Lần 5 73220 10,39 19178,6 44,17 1,12 1,33 9,33<br /> Lần 6 74371 10,391 19063,23 44,18 1,19 1,25 4,66<br /> TB 73316 10,394 19152,38 44,20 1,16303 1,29 7,01<br /> SD 1099,2 0,0138 97,97997<br /> Đạt Đạt Đạt Đạt<br /> RSD% 1,499 0,133 0,511581<br /> ’<br /> Yêu cầu RSD < 2% RSD < 2% RSD < 2% k >1 0,8 < As < 1,5 1,05 < a < 2 Rs > 1,5<br /> <br /> Độ đặc hiệu<br /> <br /> <br /> <br /> <br /> Sắc kí đồ mẫu trắng Sắc kí đồ mẫu đối chiếu<br /> <br /> <br /> <br /> <br /> Sắc kí đồ mẫu thử Sắc kí đồ mẫu thử thêm đối chiếu<br /> <br /> Hình 1: Kết quả khảo sát tính đặc hiệu<br /> <br /> <br /> <br /> <br /> 104 Chuyên Đề Dược<br /> Y Học TP. Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số 2 * 2019 Nghiên cứu Y học<br /> <br /> Triển khai sắc kí mẫu trắng, mẫu đối Độ lặp lại<br /> chiếu, mẫu thử và mẫu thử thêm chất đối Tiến hành xử lý và sắc ký 6 mẫu thử khác<br /> chiếu. Quan sát thời gian lưu và diện tích pic<br /> nhau để thẩm định độ lặp lại. Bảng 3 trình bày<br /> của coixol trong các mẫu. Sắc kí đồ mẫu trắng<br /> không xuất hiện pic có thời gian lưu tương kết quả thực hiện khảo sát độ lặp lại, RSD của<br /> ứng với thời gian lưu mẫu đối chiếu coixol, hàm lượng coixol trong 6 mẫu < 2%. Kết quả<br /> mẫu thử và mẫu thêm chất đối chiếu có pic cho thấy qui trình đạt độ lặp lại.<br /> với thời gian lưu tương ứng với pic coixol, khi<br /> Bảng 3: Kết quả thẩm định độ lặp lại<br /> thêm chất đối chiếu vào mẫu thử, diện tích pic<br /> Khối lượng Hàm lượng<br /> coixol tăng lên (Hình 1). Mẫu mẫu (mg) Diện tích pic g/mg<br /> Phổ UV-Vis của pic coixol trong mẫu thử Mẫu 1 30,0 71388 0,80<br /> Mẫu 2 30,0 71466 0,80<br /> tương ứng với mẫu đối chiếu; các pic coixol<br /> Mẫu 3 300 73542 0,82<br /> trong mẫu thử, mẫu đối chiếu, mẫu thử thêm Mẫu 4 30,0 70715 0,79<br /> chất đối chiếu đều đạt độ tinh khiết khi kiểm Mẫu 5 30,0 73916 0,82<br /> Mẫu 6 30,0 71766 0,80<br /> tra trên phần mềm Empower.<br /> TB 72132,17 0,805<br /> Tính tuyến tính SD 1289,162 0,012<br /> RSD% 1,787 1,787<br /> Nồng độ khảo sát từ 1,0 đến 500 µg/mL.<br /> Kết quả khảo sát cho thấy phương trình hồi Độ đúng<br /> qui y=10586x+5847,5 với hệ số tương quan là Sử dụng phương pháp thêm dung dịch<br /> chuẩn vào dung dịch thử ở 3 tỷ lệ nồng độ để<br /> R2 = 0,9998 (Hình 2). Theo trắc nghiệm t, hệ số a<br /> thẩm định độ đúng. Bảng 4 trình bày kết quả<br /> có ý nghĩa, hệ số b không có ý nghĩa. Theo trắc khảo sát độ đúng<br /> nghiệm F phương trình tương thích với độ tin<br /> Nhận xét: Tỷ lệ phục hồi nằm trong<br /> cậy 95%. Như vậy phương trình tuyến tính của khoảng 99,0 % -106,0 %. Như vậy qui trình có<br /> coixol là ӯ = 10586X. độ đúng cao.<br /> Nồng độ (µg/ml) Diện tích đỉnh<br /> Bảng 4: Kết quả khảo sát độ đúng<br /> 500 5316897<br /> Tỷ lệ<br /> 250 2600811 % chuẩn KL thêm KL tìm Trung<br /> phục hồi<br /> 100 1096068 thêm vào vào (µg) thấy (µg) bình %<br /> (%)<br /> 50 553902 195 197 101,03<br /> 25 262399 100,51<br /> 80% 195 201 103,08<br /> 10 110423 RSD = 2,33 %<br /> 195 190 97,44<br /> 5 58272 244 259 106,15<br /> 1 9479 105,46<br /> 100 % 244 254 104,10<br /> RSD = 0,97 %<br /> 244 259 106,15<br /> 295 303 102,71<br /> 104,41<br /> 120 % 295 309 104,75<br /> RSD = 1,27 %<br /> 295 312 105,76<br /> Áp dụng qui trình định lượng các mẫu CTN<br /> Áp dụng qui trình tiến hành định lượng<br /> các mẫu Cam thảo nam thu hái ở Tp. HỒ CHÍ<br /> MINH trong 12 tháng (10/2017 -9/2018) và các<br /> mẫu Cam thảo nam thu hái ở các địa phương<br /> Hình 2: Tương quan giữa nồng độ và diện tíc pic coixol<br /> <br /> <br /> Chuyên Đề Dược 105<br /> Nghiên cứu Y học Y Học TP. Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số 2 * 2019<br /> <br /> khác nhau vào tháng 3/2018 (kết quả trình bày ở Hình 3 và Hình 4).<br /> <br /> <br /> <br /> <br /> Hình 3: Khảo sát hàm lượng coixol trong các mẫu Cam thảo nam thu hái trong 12 tháng tại TP. Hồ Chí Minh<br /> <br /> <br /> <br /> <br /> Hình 4: Hàm lượng coixol trong các mẫu CTN thu hái ở các địa phương khác nhau (3/2018)<br /> BÀNLUẬN cao trong khoảng tháng 12-3, vì vậy có thể đề<br /> xuất việc thu hái S. dulcis nên tập trung vào<br /> Khảo sát hàm lượng coixol trong CTN theo<br /> thời gian này<br /> thời gian thu hái cho thấy có sự thay đổi, từ<br /> Khảo sát hàm lượng coixol theo địa điểm<br /> tháng 12 - tháng 3, hàm lượng coixol dao động<br /> thu hái tại 12 tỉnh cho thấy hàm lượng coixol<br /> trong khoảng 1,9 -2,4 mg/g, từ tháng 4 hàm<br /> trong các mẫu S. dulcis dao động trong khoảng<br /> lượng coixol trong mẫu bắt đầu giảm, trong<br /> 0,46 - 2,14 mg/g. Hàm lượng coixol cao nhất<br /> khoảng tháng 5 - tháng 10 hàm lượng coixol<br /> với mẫu thu hái ở tỉnh Bình Dương (2,14<br /> thấp < 1,0 mg/g Thời điểm thu hái thường<br /> mg/g), thấp nhất ở tỉnh Gia Lai (0,46 mg/g).<br /> được hướng dẫn trong các tài liệu là: mùa<br /> Như vậy, hàm lượng coixol trong S. dulcis thay<br /> xuân đến mùa hạ(2), qua kết quả khảo sát cho<br /> đổi theo vùng địa lý thu hái. Các mẫu thu hái<br /> thấy hàm lượng coixol ở trong mẫu S. dulcis<br /> <br /> <br /> 106 Chuyên Đề Dược<br /> Y Học TP. Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số 2 * 2019 Nghiên cứu Y học<br /> <br /> ở các tỉnh phía Nam (Bình Dương, Đồng Nai, Tandem Mass Spectrometry and UV Detection”, Biomedical<br /> chromatography, 31(10).<br /> Long An, Bà Rịa – Vũng Tàu, TP. Hồ Chí 2. Bộ Y tế (2018), Dược Điển Việt Nam V, Nhà xuất bản Y học,<br /> Minh) có hàm lượng cao hơn các tỉnh Tây Hà Nội, tr. 1096-1097.<br /> 3. Hayashi T, Gotoh K, Ohnishi K, et al. (1994), “6-Methoxy-<br /> Nguyên (Đắc Lắc, Gia Lai).<br /> 2-benzoxazolinone in Scoparia dulcis and its production by<br /> KẾTLUẬN cultured tissues”. Phytochemistry, 37(6), pp.1611-1614.<br /> 4. International Conference on Harmonization (ICH), Q2B:<br /> Qui trình định lượng coixol trong CTN Validation of Analytical Procedures: Methodology, May 1997<br /> 5. Jae H, Jiho L, Su R, Park H (2014), “Suppressive effects of<br /> được xây dựng và đã được thẩm định đạt các<br /> coixol, glyceryl trilinoleate and natural products derived<br /> yêu cầu tính phù hợp hệ thống, độ đặc hiệu, from Coix lachryma-jobi var. ma-yuen on gene expression,<br /> tính tuyến tính, độ lặp lại, độ đúng. Qui trình production and secretion of airway MUC5AC mucin”,<br /> Archives of Pharmacal Research, 38(5), pp.620-627.<br /> cũng đã được áp dụng khảo sát hàm lượng 6. Mishra MR, Behera RK, Jha S, et al. (2011), “A brief review<br /> coixol trong các mẫu CTN thu hái ở TP. Hồ on phytoconstituents and ethnopharmacology of Scoparia<br /> Chí Minh trong 12 tháng và mẫu thu hái ở các dulcis Linn. (Scrophulariaceae)”, International Journal of<br /> Phytomedicine, 3(4), pp.422-438<br /> tỉnh. Kết quả cho thấy hàm lượng coixol trong 7. Report TD (2002), “Technical Data Report for Vassourinha<br /> CTN cao nhất vào tháng 12-tháng 3, và trong (Scoparia dulcis)”, Austin, Texas: Sage Press.<br /> 8. Sharma KR, Adhikari A, Hafizur RM, et al. (2015), “Potent<br /> các mẫu khảo sát hàm lượng coixol thay đổi<br /> insulin secretagogue from Scoparia dulcis L. of nepalese<br /> trong khoảng 0,61 – 2,14 mg/g origin”, Phytotherapy Research, 29(10), pp.1672-1675.<br /> Đề tài góp phần tạo cơ sở cho việc nâng<br /> cao tiêu chuẩn kiểm nghiệm CTN. Ngày nhận bài báo: 18/10/2018<br /> <br /> TÀILIỆUTHAMKHẢO Ngày phản biện nhận xét bài báo: 01/11/2018<br /> 1. Ali A, Haq FU, Arfeen Q, Sharma KR, Adhikari A, Ngày bài báo được đăng: 15/03/2019<br /> Musharraf SG (2017), “Sensitive Quantification of Coixol, a<br /> Potent Insulin Secretagogue, in Scoparia dulcis Extract using<br /> High Performance Liquid Chromatography combined with<br /> <br /> <br /> <br /> <br /> Chuyên Đề Dược 107<br />